用于非酒精性脂肪性肝炎患病风险预测或诊断的微生物标志物制造技术

本申请提供一种微生物标志物，属于生物技术领域，具体涉及一种肝病生物标志物及其应用。本发明专利技术首次发现了肠道菌群中Staphylococcus、Clostridium、Blautia等微生物与非酒精性脂肪性肝炎存在密切关联，通过本申请标志物对肝病进行早期诊断，具有特异性高、敏感性强、检测对象采集处理简易、无侵害性、成本低等优点。该标志物的发现为诊断和治疗肝病提供了参考。疗肝病提供了参考。疗肝病提供了参考。

【技术实现步骤摘要】
用于非酒精性脂肪性肝炎患病风险预测或诊断的微生物标志物


[0001]本申请涉及疾病诊断领域，尤其涉及一种用于非酒精性脂肪肝患病风险预测或诊断的微生物标志物。

技术介绍

[0002]非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大致分为两种类型。第一种类型是最常见的类型，包括非酒精性脂肪肝(NAFL)疾病，其是普通的脂肪肝疾病。第二种类型是一种严重的疾病，包括非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，其是一种由脂肪肝引起肝细胞的炎症的疾病。
[0003]非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是一种常见的、通常是“沉默的”肝病。它在组织学上类似于酒精性肝病，但发生在饮酒很少或不饮酒的人身上。NASH具有以下三个主要特征，并且这三个主要特征将其与其它代谢起源的肝病区分开来：肝脏中的异常脂肪堆积或沉积(肝脂肪变性)、肝脏炎症，和肝损伤或肝组织损伤(肝纤维化)。
[0004]大多数患有NASH的人身体健康并且不知道他们有肝脏问题。然而，NASH可能很严重，并可能导致肝硬化，其中肝脏受到永久性损伤、留下瘢痕以及不再能够正常发挥功能。肝硬化甚至可以进一步发展为肝细胞癌。约10％到15％的患有组织学上证实的NASH的患者会发展为肝硬化及其后遗症，例如肝功能衰竭和肝细胞癌(HCC)。
[0005]通常，首先是在常规血液测试组中包括的肝脏测试中发现结果升高的人中怀疑患有NASH，并且当进一步评估显示没有明显的原因(例如药物治疗、病毒性肝炎或过度使用酒精)导致肝脏疾病，以及当肝脏的X射线或影像学研究显示有脂肪时，怀疑是NASH。然而，实际上能够诊断NASH并区分非酒精性脂肪肝和NASH的唯一方法是肝脏活检。肝脏活检时，将针穿过皮肤以取出一小块肝脏。当使用显微镜进行组织学检查的结果确认脂肪有炎症和肝细胞有损伤或纤维化时，就诊断为NASH。从活检中获得的一条重要信息是肝脏中是否已经形成瘢痕组织(纤维化组织)。目前，主要是通过取出肝组织并通过显微镜对其进行检查的组织病理学方法，来进行NASH的诊断和对NASH治疗效果的确认。
[0006]本领域缺乏适用于快速鉴定NASH的方法的微生物标志物，阻碍了非酒精性脂肪性肝炎的精准预防，早期诊断和治疗。

技术实现思路

[0007]本申请的偶然发现微生物与非酒精性脂肪肝炎之间存在强相关性，并通过验证试验验证了这种相关性。本申请的目的在于提供一种可检测疾病的标志物，以解决非酒精性脂肪性肝炎早期诊断和治疗的问题。
[0008]为实现以上目的，本申请具体提供以下技术方案：
[0009]本专利技术一方面提供一种可检测疾病的生物标志物，所述生物标志物至少包含如下的微生物：Staphylococcus、Clostridium、Blautia中的一种或多种。
[0010]另一方面本申请还提供微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，
所述非酒精性脂肪性肝炎检测为患病风险预测、疾病诊断、监测或治疗。
[0011]所述微生物来自于动物排泄物样本；
[0012]优选地，所述排泄物为粪便、尿液。
[0013]所述微生物来自于人的粪便、尿液样本。
[0014]通过测量待测样本中微生物的丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断；
[0015]优选地，通过测量待测样本中Staphylococcus丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断；
[0016]优选地，通过测量待测样本中Clostridium丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断；
[0017]优选地，通过测量待测样本中Blautia丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断。
[0018]所述微生物的检测包括以下检测步骤：
[0019]a.使用核酸样本分离装置，从测定对象中分离微生物的核酸样本；
[0020]b.使用基因测序装置，对所述核酸样本进行测序，获得测序结果；
[0021]c.使用对比装置，将所述测序结果与已知正常水平的基因特征进行比对，同时将所获得的相对丰度值与预定的临界值(cutoff)进行比较，来预测患病风险或疾病诊断。
[0022]所述微生物还包括Corynebacterium、Bifidobacterium、Allobaculum、Bacteroides、Psychrobacter、Jeotgalicoccus、Erysipelotrichaceae p
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a5、Coprobacillus、Phascolarctobacterium、Coriobacteriaceae、Desulfovibrionaceae、Clostridiales、Saccharibacteria(TM7)中的一种或多种。
[0023]当待测样本中Staphylococcus、Blautia、Corynebacterium、Bacteroides、Jeotgalicoccus、Desulfovibrionaceae、Erysipelotrichaceae p
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a5、Coprobacillus、Phascolarctobacterium中一种或多种的丰度高于临界值时，所述检测对象的患病风险增加；
[0024]当待测样本中Clostridium、Bifidobacterium、Clostridiales、Allobaculum、Psychrobacter、Coriobacteriaceae、Saccharibacteria(TM7)中一种或多种丰度低于临界值时，所述检测对象的患病风险增加。
[0025]所述微生物的丰度是基于对其基因序列的计算所提供的。
[0026]与现有技术相比，本申请的有益效果包括：
[0027]一方面，本申请发现并提供与非酒精性脂肪性肝炎症状显著关联的微生物标志物，该微生物能够用于非酒精性脂肪性肝炎早期诊断。另一方面，相比于其他检测方案具有判断准确性提升，具有特异性高、敏感性强、检测对象采集处理简易、无侵害性、成本低等优点。此外，本申请所述的微生物标志物可为研发改善非酒精性脂肪性肝炎类微生物制品提供参考素材，并且也可能用于治疗非酒精性脂肪性肝炎的微生态制剂。
附图说明
[0028]为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对本申请范围的限定。
[0029]图1为M组肝细胞染色后放大100倍(左)和400倍(右)的影像；
[0030]图2为C组肝细胞染色后放大100倍(左)和400倍(右)的影像。
具体实施方式
[0031]如本文所用之术语：
[0032]“由
……
制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.微生物标志物在非酒精性脂肪性肝炎检测试剂中的用途，其特征在于，所述试剂适用于检测微生物，所述微生物包括：Staphylococcus、Clostridium、Blautia中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，其特征在于，所述非酒精性脂肪性肝炎检测为患病风险预测、疾病诊断或监测。3.根据权利要求1任一项所述的微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，其特征在于，所述微生物来自于动物排泄物样本；优选地，所述排泄物为粪便、尿液。4.根据权利要求1任一项所述的微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，其特征在于，所述微生物来自于人的粪便、尿液样本。5.根据权利要求1所述的微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，其特征在于，通过测量待测样本中微生物的丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断；优选地，通过测量待测样本中Staphylococcus丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断；优选地，通过测量待测样本中Clostridium丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断；优选地，通过测量待测样本中Blautia丰度来预测肝脏患病风险或疾病诊断。6.根据权利要求1
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5所述的微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，其特征在于，所述微生物的检测包括：a.使用核酸样本分离装置，从测定对象中分离所述微生物的核酸样本；b.使用基因测序装置，对所述核酸样本进行测序，获得测序结果；c.使用对比装置，将所述测序结果与已知正常水平的基因特征进行比对，同时将所获得的相对丰度值与预定的临界值(cutoff)进行比较，来预测患病风险或疾病诊断。7.根据权利要求1
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5任一项所述的微生物标志物在检测非酒精性脂肪性肝炎试剂中的用途，其特征在于，所述微生物还包括Corynebacterium、Bifidob...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱灵平，童国相，吴扬哲，余度，郭江，邓运明，
申请(专利权)人：广东华微医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：