本发明专利技术提供了一种醋酸杆菌和含有该菌的菌剂、以及它们的应用。所述醋酸杆菌分类命名为Gluconobacter oxydans JBD6，保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M 20221826。在本发明专利技术提供的醋酸杆菌产生的酶的作用下，巴豆醛能够转化为巴豆酸，实现生物法制备巴豆酸，与现有技术的化学合成法相比，具有反应条件温和、转化率高、副产物少、安全高效、环境友好、无污染等优点。无污染等优点。
【技术实现步骤摘要】
一种醋酸杆菌和含有该菌的菌剂、以及它们的应用
[0001]本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种醋酸杆菌和含有该菌的菌剂、以及它们的应用。
技术介绍
[0002]巴豆酸，又名丁烯酸，分子中含有双键和羧基，有顺式和反式两种结构，是一种重要的中间体，用途十分广泛。在工业上主要用于制备各种树脂、表面涂料、杀菌剂、增塑剂等，同时也是重要的医药中间体、农药中间体。巴豆酸作为一种不饱和脂肪酸，最主要的用途是作为聚醋酸乙烯涂料的原料。
[0003]目前，巴豆醛转化为巴豆酸的生产方法主要为化学合成法，以氧化催化巴豆醛为主，但化学合成法普遍具有能耗大、成本高、反应路线复杂等缺陷。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于提供一种以巴豆醛为原料，生物法制备巴豆酸的醋酸杆菌，以解决化学合成法存在的缺陷，具有反应温和、转化率高等优点。
[0005]本专利技术提供一种醋酸杆菌，所述醋酸杆菌分类命名为Gluconobacter oxydans JBD6，保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M 20221826。
[0006]本专利技术还提供一种菌剂，该菌剂含有上文所述的醋酸杆菌的活菌体。
[0007]在一种具体的实施方式中，所述菌剂为将醋酸杆菌进行发酵培养得到的菌液或者为将所述菌液固液分离得到的菌体。
[0008]在一种具体的实施方式中，所述菌剂为将所述菌液分离得到的湿菌体。
[0009]本专利技术还提供一种上文所述的醋酸杆菌或者上文所述的菌剂在氧化巴豆醛制备巴豆酸的方法中的应用。
[0010]在一种具体的实施方式中，所述醋酸杆菌具有耐高醛和耐高酸的能力。
[0011]在一种具体的实施方式中，所述醋酸杆菌至少耐受20g/L巴豆酸。
[0012]本专利技术还提供一种氧化法制备巴豆酸的方法，将上文所述的醋酸杆菌和/或上文所述的菌剂与含有巴豆醛的水溶液进行接触。
[0013]在一种具体的实施方式中，所述接触的过程包括：将所述的醋酸杆菌和/或所述菌剂与含有巴豆醛的水溶液进行混合得到混合液，在搅拌状态下，所述混合液中的巴豆醛在所述醋酸杆菌和/或所述菌剂产生的酶的作用下转化生成巴豆酸，其中，转化条件包括：转化温度为28～36℃，转化时间为1～24h，通空气量为0.1m3/h。
[0014]本专利技术还提供一种氧化法制备巴豆酸的方法，包括以下步骤：
[0015](1)对果园土壤悬液进行筛选分离得到耐高醛和耐高酸的醋酸杆菌，所述醋酸杆菌为上文所述的醋酸杆菌；
[0016](2)对所述醋酸杆菌进行发酵培养，得到含醋酸杆菌的菌液；
[0017](3)将所述菌液进行离心分离或者过滤分离得到湿菌体；
[0018](4)使所述湿菌体与含有巴豆醛的水溶液进行混合得到混合液，在搅拌状态下，所述混合液中的巴豆醛在所述湿菌体产生的酶的作用下转化生成巴豆酸，其中，转化条件包括：转化温度为28～36℃，转化时间为1～24h，通空气量为0.1m3/h。
[0019]本专利技术的有益效果至少包括：
[0020]在本专利技术提供的醋酸杆菌产生的酶的作用下，巴豆醛能够转化为巴豆酸，实现生物法制备巴豆酸，与现有技术的化学合成法相比，具有反应条件温和、转化率高、副产物少、安全高效、环境友好、无污染等优点。
[0021]生物保藏
[0022]本专利技术提供的菌株为醋酸杆菌，分类命名为Gluconobacter oxydans JBD6，于2022年12月05日被保藏于中国典型培养物保藏中心(保藏单位的简称为CCTCC，地址位于湖北省武汉市武汉大学，邮编430072)，保藏编号为CCTCC NO：M 20221826。
具体实施方式
[0023]在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以组合得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
[0024]第一方面，本专利技术提供一种醋酸杆菌，所述醋酸杆菌分类命名为Gluconobacter oxydans JBD6，于2022年12月05日被保藏于中国典型培养物保藏中心(保藏单位的简称为CCTCC，地址位于湖北省武汉市武汉大学，邮编430072)，保藏编号为CCTCCNO：M 20221826。
[0025]所述醋酸杆菌的16s DNA序列见SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
[0026]第二方面，本专利技术提供一种菌剂，该菌剂含有上述的醋酸杆菌的活菌体。
[0027]根据本专利技术，对所述菌剂的剂型没有特别的限制，可以制备成不同的剂型，并添加相应的辅料等成分，如所述菌剂可以为液态菌剂和/或固态菌剂，例如可以为醋酸杆菌的扩大培养的发酵液(菌液)，或者为过滤发酵液或者离心发酵液得到的菌体。其中，在何种剂型的菌剂中添加何种辅料为本领域技术人员所熟知，在此不再详细说明。
[0028]第三方面，本专利技术提供上述的醋酸杆菌、上述的菌剂在氧化巴豆醛制备巴豆酸的方法中的应用。
[0029]根据本专利技术，上述的醋酸杆菌、上述的菌剂可以用于氧化巴豆醛制备巴豆酸，相对于化学合成法，具有反应温和、环境友好、转化率高、操作简单、副产物少等优点。
[0030]第四方面，本专利技术还提供一种氧化法制备巴豆酸的方法，将上述的醋酸杆菌和/或上述菌剂与含有巴豆醛的水溶液进行接触。
[0031]其中，所述接触的过程包括：将所述的醋酸杆菌和/或所述菌剂与含有巴豆醛的水溶液进行混合得到混合液，在搅拌状态下，所述混合液中的巴豆醛在所述醋酸杆菌和/或所述菌剂产生的酶的作用下转化生成巴豆酸，其中，转化条件包括：转化温度为25～36℃，转化时间为1～24h，通空气量为0.1m3/h。
[0032]氧化巴豆醛生产巴豆酸的反应方程式为：
[0033][0034]第五方面，本专利技术还提供一种氧化法制备巴豆酸的方法，包括以下步骤：
[0035]步骤一、对果园土壤悬液进行筛选分离得到耐高醛和耐高酸的醋酸杆菌，所述醋酸杆菌为上文所述的醋酸杆菌；
[0036]本专利技术提供的醋酸杆菌从果园土壤悬液中分离得到，通过采用特定的培养基，使筛选分离得到的醋酸杆菌具有耐高醛和耐酸性能。具体地，具有耐高醛和耐酸性能的醋酸杆菌的筛选方法包括以下步骤：
[0037]步骤(1)、将果园土壤悬液加到第一培养基中，置于摇床上进行振荡培养得到一级菌液，所述第一培养基的组成为：酵母膏1g/L、葡萄糖3g/L、巴豆酸1g/L；
[0038]步骤(1)的振荡培养条件为：培养温度30℃，培养时间48h；
[0039]步骤(2)、取10mL一级菌液接种到100mL第一培养基中，置于摇床上进行振荡培养得到二级菌液；
[0040]步骤(2)的振荡培养条件为：培养温度30℃，培养时间24h；
[0041]步本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种醋酸杆菌，其特征在于，所述醋酸杆菌分类命名为Gluconobacter oxydans JBD6，保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M 20221826。2.一种菌剂，其特征在于，该菌剂含有权利要求1所述的醋酸杆菌的活菌体。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为将醋酸杆菌进行发酵培养得到的菌液或者为将所述菌液固液分离得到的菌体。4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂为将所述菌液分离得到的湿菌体。5.权利要求1所述的醋酸杆菌或者权利要求2至4任一项所述的菌剂在氧化巴豆醛制备巴豆酸的方法中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述醋酸杆菌具有耐高醛和耐高酸的能力。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述醋酸杆菌至少耐受20g/L巴豆酸。8.一种氧化法制备巴豆酸的方法，其特征在于，将权利要求1所述的醋酸杆菌和/或权利要求2至4任一项所述的菌剂与含有巴豆醛的水溶液进...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾俊华，陈帅，陈双，
申请(专利权)人：湖南酵本生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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