BacillusrugosusYC25及在烟草病害防控中的应用制造技术

本发明专利技术属于农业微生物领域，公开了Bacillus rugosus YC25及在烟草病害防控中的应用，所述的菌株的保藏编号为CCTCC NO:M20221894。该菌株首次被报道可同时用于烟草黑胫病、根腐病、立枯病、赤星病、炭疽病、灰霉病和线虫的防治，与现有杀菌剂和杀虫剂无交互抗药性。与目前使用化学合成农药防治相比，由于其来自于自然环境，具有高效、低毒、不污染环境和不易产生抗药性等优点，具有广阔的应用前景。景。

【技术实现步骤摘要】
Bacillus rugosus YC25及在烟草病害防控中的应用


[0001]本专利技术属于农业微生物领域，具体涉及Bacillus rugosus YC25及在烟草病害防控中的应用。

技术介绍

[0002]由于耕地有限和经济利益的驱动，多数烟区存在连作种植习惯，连作已成为烟草种植地区的主要种植模式。长期连作和大量使用化学肥料等原因导致植烟土壤逐渐退化，生产力下降、病害加重、烟叶品质降低等问题。大量研究表明，长期连作会造成烟田土壤养分与土壤微生物区系非均衡性变化，土壤细菌多样性与均匀度降低，导致土传病原菌大量繁殖以及土壤酶活性下降，对作物的生长和优质生产极为不利。烟草黑胫病、青枯病和根结线虫是烟草的主要土传病害，在烟区普遍发生，并导致大量减产。镰刀菌根腐病的发病范围和发病程度呈上升趋势，严重地块造成绝收。另外，烟草土传病害存在混合发生的情况，增加了防治的难度，进一步加重了土传病害的危害。烟草土传病害的防控主要依靠化学杀菌剂，易造成环境污染和病原菌抗药性，同时破坏烟草根际微生物群落，而有研究表明，土传性病害发生与土壤细菌多样性及种群结构的变化有直接关系。生物防治作为一种新型的病害防治措施，不仅对植物具有防病促生的作用，而且能有效克服生产中存在的农药残留和病菌抗药性问题。另外，微生物菌剂具有调控植物根际微生物群落结构功能，形成不利于病害发生的土壤微生物群落结构即“抑菌土”。
[0003]针对上述问题本专利技术分离出一株新的芽孢杆菌Bacillus rugosus YC25，首次报道对烟草黑胫病、根腐病、立枯病和根结线虫均具有良好的防效，同时在烟草根系具有较好的定殖能力。并兼具对烟草地上部病害赤星病、炭疽病和灰霉病等病害达到防控效果。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种分离的芽孢杆菌，所述芽孢杆菌为Bacillus rugosus YC25，其保藏编号为CCTCC NO:M20221894。所述的Bacillus rugosus YC25可用于烟草黑胫病、根腐病、立枯病、赤星病、炭疽病和灰霉病等烟草病害的防治。
[0005]本专利技术的另一个目的在于提供Bacillus rugosus YC25的在制备植物病原菌抑制剂或是线虫杀虫剂中的应用，特别是用于制备防治烟草病害药物。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术方案来实现：
[0007]一种分离的芽孢杆菌，从烟草根际分离，经鉴定为Bacillus rugosus，已于2022年12月07日送至中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：Bacillus rugosus YC25；保藏编号为CCTCC NO:M20221894；地点：中国武汉武汉大学。
[0008]菌株在NA培养基上生长良好，淡黄色单菌落(图1)。
[0009]本专利技术的保护范围还包括Bacillus rugosus YC25的发酵液，获得发酵液过程中使用的培养基包括但不限于LB培养基、或培养基：甘薯粉16
‑
19g/L、酵母粉16
‑
19g/L、玉米浆4
‑
6g/L、硫酸镁0.6
‑
1.0g/L、磷酸二氢钾0.1
‑
0.3g/L，pH6.5
‑
7。
[0010]本专利技术的保护内容包括：
[0011]Bacillus rugosus YC25或其发酵液或其发酵上清在防治烟草病害中的应用；
[0012]以上所述的应用中，其应用方式是将含有Bacillus rugosus YC25或其发酵液或其发酵上清的制剂，对烟草进行灌根处理，或是直接喷施。
[0013]Bacillus rugosus YC25或其发酵液或其发酵上清在制备烟草病害生防制剂中的应用；
[0014]以上所述的应用中，所述的烟草病害包括但不限于由烟草疫霉(Phytophthora nicotianae)、镰刀菌(Fusarium sp.)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、链格孢菌(Alternaria sp.)、烟草炭疽菌(Colletotrichum nicotianae)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)和/或烟草线虫导致的病害。
[0015]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0016](1)本专利技术提供了一种Bacillus rugosus，该菌株首次被报道可用于同时防治烟草黑胫病、根腐病、立枯病、赤星病、炭疽病、灰霉病和线虫病的防治，并且具有一定的耐酸性和根系及烟田定殖能力，与现有杀菌剂和杀虫剂无交互抗药性。
[0017](2)与目前使用化学合成农药防治相比，由于其来自于自然环境，具有高效、低毒、不污染环境和不易产生抗药性等优点。
附图说明
[0018]图1Bacillus rugosus YC25菌株菌落形态示意图。
[0019]图2Bacillus rugosus YC25全基因组比对。
[0020]图3Bacillus rugosus YC25离体抑菌作用。
[0021]图4Bacillus rugosus YC25菌剂防治烟草黑胫病效果示意图。
具体实施方式
[0022]为了更好地解释本专利技术，以下结合具体实施例进一步阐明本专利技术的主要内容，但本专利技术的内容不仅仅局限于以下实施例。本专利技术所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规技术，所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。
[0023]实施例1：
[0024]Bacillus rugosus YC25的获得及鉴定
[0025]一株分离的芽孢杆菌，从恩施来凤县烟草根际土壤分离得到，经全基因组测序于NCBI比对结合生理生化鉴定后属于Bacillus rugosus(图1，图2，表1，表2)，已于2022年12月07日送至中国典型培养物保藏中心进行保藏，分类命名：Bacillus rugosus YC25；保藏编号为CCTCC NO:M20221894；地点：中国武汉武汉大学
[0026]在本专利技术中，Bacillus rugosus YC25或被简称为YC25。
[0027]表1：菌株YC25生理生化特性
–
酶活、碳源氧化
[0028][0029]+：阳性反应；
‑
：阴性反应；
[0030]表2：菌株YC25生理生化特性
–
利用碳源产酸
[0031][0032]+：阳性反应；
‑
：阴性反应；W：弱阳性反应实施例2：
[0033]Bacillus rugosus YC25对烟草病害病原菌的离体抑菌活性
[0034]烟草真菌病害病原菌从斜面活化至PDA平板，30℃培养6d备用。将YC25单菌落转至NB培养基，35℃，180rpm摇床振荡培养12h。发酵液10μL滴于PDA平板两端，24h后用4mm打孔器接入上述病原菌菌碟，以接培养基菌碟作本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株分离的Bacillus rugosus YC25菌株，所述菌株的保藏编号为CCTCC NO: M20221894。2.权利要求1所述菌株的发酵液。3.根据权利要求2所述的发酵液，获得发酵液过程中使用的培养基为LB培养基，或培养基：甘薯粉16
‑
19g/L、酵母粉16
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19g/L、玉米浆4
‑
6g/L、硫酸镁0.6
‑
1.0g/L、磷酸二氢钾0.1
‑
0.3g/L，pH6.5
‑
7。4.权利要求1所述的Bacillus rugosusYC25或其发酵液或其发酵上清在防治烟草病害中的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎妍妍，汪弘毅，李锡宏，秦晓敏，李方明，张友臣，任晓红，郭利，袁跃斌，
申请(专利权)人：中国烟草总公司湖北省公司，
类型：发明
国别省市：