一种体外快速制备肿瘤细胞球的方法技术

本发明专利技术提供了一种体外快速制备肿瘤细胞球的方法，该方法将肿瘤细胞接种于U型细胞培养板上，并对该U型培养板进行特殊处理。在此基础上，采用不同种类的肿瘤细胞，结合基质胶促进细胞成球的特性，通过显微镜观察细胞成球的情况。该方法构建的肿瘤细胞球有助于在三维层面开展化合物对肿瘤细胞的影响，为抗肿瘤化合物筛选提供了新的研究思路和解决方案。物筛选提供了新的研究思路和解决方案。物筛选提供了新的研究思路和解决方案。

【技术实现步骤摘要】
一种体外快速制备肿瘤细胞球的方法


[0001]本专利技术属于细胞生物学
，具体而言，涉及肿瘤细胞三维培养的构建方法，尤其涉及一种基于三维培养肿瘤细胞球快速制备的方法。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤已成为严重威胁人类健康的纪斌。目前对于肿瘤治疗的常规方案包括手术、放疗和化疗。但这些治疗方案并不能完全有效的治疗肿瘤，因此探索肿瘤的形成、生长的机制以及抗肿瘤化合物的筛选，迫切需要一个能够模拟体内肿瘤生长的细胞模型。
[0003]在过往的研究中，体外细胞通常采用二维单层细胞培养，其主要特点包括操作简便、培养条件可控、便于观察能优点。但随着研究的深入，研究者发现二维细胞培养不能够完全准确反应体内肿瘤生长情况，尤其是在肿瘤微环境、细胞
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胞外基质互作[参见：D Herrmann，JRW Conway，C Vennin，A Magenau，P Timpson. Three
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dimensional cancer models mimic cell
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matrix interactions 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种体外快速制备肿瘤细胞球的方法，其特征在于，将消化后的肿瘤细胞接种至甲基纤维素包被的U型细胞培养板中，培养得到成团的肿瘤细胞，向所述U型细胞培养板中加入基质胶，培养，得到肿瘤细胞球。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲基纤维素包被的U型细胞培养板通过如下方法制备得到：取U型细胞培养板，置于细胞培养箱，35
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37℃静置10
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20min，使用无菌甲基纤维素溶液覆盖U型细胞培养板的培养孔，至于细胞培养箱，35
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37℃静置20
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40min；吸出甲基纤维素溶液，取无菌双蒸水洗涤培养板若干次；吸净残留双蒸水，将培养板至于细胞培养箱，37℃静置过夜即得。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述甲基纤维素溶液的质量体积浓度为1%。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述消化后的肿瘤细胞通过如下步骤得到：选取对数生长期的肿瘤细胞，去掉细胞上清液，加入无菌PBS清洗若干次；加入胰蛋白酶细胞消化液消化，待细胞都变圆后加入含血清的培养基终止消化；用移液器吹打细胞，然后将细胞悬液吸到离心管中，离心弃上清，加入培养基，将细胞密度调整至1
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105个/mL。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，加入基质胶的操作步骤为：冰上融化基质胶，并同时预冷枪头；细胞培养4
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8h后，显微镜观察细胞成团情况；小心吸取细胞上清液，勿吸取细胞团；用预冷的枪头小心吸取融化的基质胶，加入细胞培养板中，轻柔混匀。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，基质胶的用量为：每2
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【专利技术属性】
技术研发人员：孙益军，季雨，黄莺，马雪，蒋敏，高丽娜，
申请(专利权)人：江苏凯基生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：