一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，该方法包括以下步骤：St.1利用计算仪器检测待测双标记化合物同位素丰度值所需分辨率，确定是否满足分析要求；St.2根据化合物的质谱响应情况，选择合适浓度样品进行高分辨液质联用仪检测，重复进样6

【技术实现步骤摘要】
一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法


[0001]本专利技术涉及同位素丰度检测
，具体涉及一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法。

技术介绍

[0002]随着生命科学领域的快速发展，稳定同位素标记化合物，尤其是双标记同位素化合物作为内标试剂或示踪剂，在蛋白质组学(如
13
C,
15
N双标记氨基酸作为SILAC技术的关键试剂，用于蛋白质定量分析)、代谢组学(
13
C标记葡萄糖、
13
C,
15
N双标记谷氨酰胺等示踪剂，用于代谢流量分析)、生态环境(
13
C,
15
N双标记尿素、
15
N硫铵等，用于地质、动植物特定元素的物质迁移分析)等领域应用广泛。
[0003]作为内标试剂，当稳定同位素标记化合物中同一种元素同位素提供的质量数不够多时，需要两种同位素标记以增加其质量差。例如，使用
15
N标记赖氨酸作为内标试剂对蛋白质进行定量分析时，只能本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：St.1利用计算仪器检测待测双标记化合物同位素丰度值所需分辨率，确定是否满足分析要求；St.2根据化合物的质谱响应情况，选择合适浓度样品进行高分辨液质联用仪检测，重复进样6
‑
8次；St.3根据液质联用仪结果计算仪器检测偏差值IDD和相对同位素偏差值RID，满足IDD小于RID后可进行丰度计算，根据提取离子流图选择适当的质谱图扫描范围，计算待测双标记化合物同位素丰度值。2.根据权利要求1所述的一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，其特征在于，检测待测双标记化合物同位素丰度值所需分辨率方法基于以下公式得到：其中m1，m2为该化合物中质量数最相近的两个同位素标记模式化合物质量，R为所述检测双标记化合物所需分辨率。3.根据权利要求1所述的一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，其特征在于，进样的浓度高于化合物检出限200
‑
1000倍。4.根据权利要求1所述的一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，其特征在于，高分辨液质联用仪检测色谱条件如下：色谱柱：Hypersil GOLD VANQUISH色谱柱100mm
×
2.1mm，1.9μm；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为含0.01
‑
5.0％甲酸的水溶液；洗脱条件：90％B等度洗脱5min；流速：0.1
‑
1.0mL/min；进样量：1μL。5.根据权利要求1所述的一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，其特征在于，高分辨液质联用仪检测色谱条件如下：Orbitrap Exploris 120四极杆轨道阱高分辨质谱；离子源：ESI；电喷雾电压：3500V；鞘气：5.34L/min；辅助气：9.35L/min；离子传输管温度：320℃；扫描模式：全扫描模式下正离子扫描；分辨率：12000。6.根据权利要求1所述的一种利用高分辨液质联用仪测定双标记化合物同位素丰度的方法，其特征在于，仪器检测偏差值IDD是基于以下公式得到的：
其中M
max
...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷雯，赵雅梦，赵诚，范若宁，解龙，喻静兰，徐增益，
申请(专利权)人：上海化工研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：