一种生防型复合菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术涉及复合菌领域，具体涉及一种生防型复合菌剂及其制备方法，制备过程包括：（1）使用无菌的取样器收集废弃秸秆以及动物粪便，冷冻干燥密封后，在冰柜内保存备用；（2）将复合菌样使用纯化水进行分散，收集上清液，密封保存；（3）将第（2）步得到的上清液倒入至准备好的培养基内，培养，从而收集第一培养液；（4）将废弃秸秆和动物粪便加入至培养基内，培养，收集第二培养液；（5）再次培养，即得到生防型复合菌剂。本发明专利技术针对性地使用了植物生长茂盛区域的植物秸秆和动物粪便作为菌样，对于其中的菌落进行培养以及驯化，得到分解效果高且活性高的复合菌落，将该菌落用于当地，从而增强当地的植物的生防效果。植物的生防效果。

【技术实现步骤摘要】
一种生防型复合菌剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及复合菌领域，具体涉及一种生防型复合菌剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]近年来，伴随着农药市场的规范化及菜农环保意识的提升，生物防控配合高温季节闷棚渐成为菜农处理土壤的理想选择，这样既能杀灭土壤中的有害菌、害虫、根结线虫等，又能补充、保全土壤中的部分有益微生物菌，从很大程度上降低了土传病害的发生概率。
[0003]废弃垃圾、秸秆、粪便是农业生产中广泛应用的肥料，对改良土壤、补充土壤养分发挥了重要作用。但是废弃垃圾、秸秆、粪便使土壤生态环境发生了很大改变，在改良土壤、补充土壤养分的同时也为病菌虫害营造了适宜的环境条件，使其数量不断积累，导致病害加重，作物产量下降。同时废弃垃圾、秸秆、粪便在自然条件下腐烂分解速度很慢，比如秸秆主要成分为纤维素、半纤维素和木质素在自然条件下腐烂分解速度很慢，加之现有机械难以将废弃垃圾、秸秆、粪便充分粉碎和深翻，进一步导致废弃垃圾、秸秆、粪便分解速度缓慢，影响整地质量和播种质量，形成的虚空苗床对作物生根和幼苗生长极为不利，还易导致旱、冻灾害加重。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的问题，本专利技术的目的是提供一种生防型复合菌剂及其制备方法。
[0005]本专利技术的目的采用以下技术方案来实现：本专利技术的第一个目的是提供一种生防型复合菌剂的制备方法，制备过程包括：（1）使用无菌的取样器收集废弃秸秆以及动物粪便，冷冻干燥后形成复合菌样，装入无菌盒子内，密封后，在冰柜内保存备用；（2）将干燥后的复合菌样取出后，放置至恢复室温，取出部分置于玻璃瓶内，使用纯化水进行分散，室温下震荡1
‑
3h，然后过滤或离心，收集上清液，密封保存；（3）将第（2）步得到的上清液倒入至准备好的培养基内，保持温度为15
‑
30℃，培养至成熟后，继续培养至第三代，从而收集第一培养液；（4）将废弃秸秆和动物粪便加入至培养基内，混合后，同时加入第（3）步收集的第一培养液，培养至秸秆被腐蚀消耗以及粪便被分解后，继续转接培养三代后，收集第二培养液；（5）将第（4）步得到的第二培养液进行转接至培养基内，在培养基内加入秸秆和粪便，在15
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30℃下培养16
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25天，即得到生防型复合菌剂。
[0006]优选地，所述第（1）步骤内，收集的废弃秸秆以及动物粪便均来自于农作物生长茂盛的地区，动物粪便不限于家禽和家畜，包括当地以相应植物为食物的动物的粪便。
[0007]优选地，所述第（1）步骤内，冰柜的温度为
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18~
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20℃。
[0008]优选地，所述第（2）步骤内，复合菌样与纯化水的质量比例是1
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5:20
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50。
[0009]优选地，所述第（3）步骤内，培养基为Pc培养基，包括：蔗糖5.0g/L，蛋白胨5.0g/L，酵母粉5.0g/L，氯化钠5.0g/L，氯化钙2.0g/L，磷酸氢二钾0.5g/L，七水硫酸镁0.5g/L，pH值6.7。
[0010]优选地，所述第（3）步骤内，上清液加入质量是培养基质量的5%
‑
10%。
[0011]优选地，所述第（4）步骤内，废弃秸秆和动物粪便为当地的废弃植物秸秆和当地以相应植物为食物的动物粪便，废弃秸秆和动物粪便均经过干燥和灭菌处理，加入量是培养基质量的15%
‑
20%。
[0012]优选地，所述第（4）步骤内，第一培养液加入质量是培养基质量的5%
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10%。
[0013]优选地，所述第（4）步骤内，培养基为Ms培养基，包括：尿素0.1g/L，硫酸铵0.4g/L，磷酸氢二钾0.25g/L，碳酸钙0.5g/L，氯化钠0.05g/L，硫酸镁0.025g/L，pH=6.5。
[0014]优选地，所述第（5）步骤内，第二培养液加入质量是培养基质量的5%
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10%。
[0015]优选地，所述第（5）步骤内，培养基为Ma培养基，包括：磷酸氢二钾2.8g/L，硝酸钠3.2g/L，氯化钙0.5g/L，七水硫酸镁0.5g/L，七水硫酸亚铁7.3mg/L，一水硫酸镁2.6mg/L，硫酸锌2.0mg/L，二氯化钴3.3mg/L，pH=6.8。
[0016]优选地，所述第（5）步骤内，废弃秸秆和动物粪便为当地的废弃植物秸秆和当地以相应植物为食物的动物粪便，废弃秸秆和动物粪便均经过干燥和灭菌处理，秸秆和粪便的加入量是培养基质量的2%
‑
6%。
[0017]本专利技术的第二个目的是提供一种生防型复合菌剂，采用上述制备方法制备得到。
[0018]本专利技术的有益效果为：本专利技术针对性地使用了植物生长茂盛区域的植物秸秆和动物粪便作为菌样，对于其中的菌落进行培养以及驯化，从而得到分解效果高且活性高的复合菌落，然后将该菌落用于当地表现并不是很好的秸秆和粪便中，从而增强当地的植物的生防效果。
[0019]本专利技术独特之处有以下两点：第一点是使用生长较好的土地的废气秸秆和动物粪便作为菌样，将该菌样培育几代后，用于当地的秸秆和粪便中培育，从而得到更适合当地的复合菌，该方法筛选掉了不适合当地生长的菌落以及分解当地秸秆和粪便较弱的菌落，筛选出了不仅适合当地生长而且分解当地秸秆和粪便较强的菌落，一举两得。
[0020]第二点是本专利技术使用了三种不同的培养基依次进行培育筛选，即本专利技术第（3）步中，对于第一次处理的菌液使用的是同时含有碳源和氮源的Pc培养基，目的是为了使菌液内的菌落大量生长，为更好地筛选做准备；第（4）步中，即加入了大量的本地的废弃秸秆和动物粪便作为碳源和氮源主要来源，目的是为了筛选出更适合分解本地的秸秆和粪便的复合菌落；第（5）步中，加入了少量的秸秆和粪便，以及更换至培养基Ma，且培养天数延长，从而培育出在较为贫瘠的条件下仍然能够具有较高活性的菌落，也为了筛选出耐候性的菌落。
具体实施方式
[0021]为了更清楚的说明本专利技术，对本专利技术的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的
理解，现对本专利技术的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本专利技术的可实施范围的限定。
[0022]下面结合以下实施例对本专利技术作进一步描述。
实施例1
[0023]一种生防型复合菌剂的制备方法，制备过程包括：（1）使用无菌的取样器收集废弃秸秆以及动物粪便，冷冻干燥后形成复合菌样，装入无菌盒子内，密封后，在
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18~
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20℃冰柜内保存备用；（2）将干燥后的复合菌样取出后，放置至恢复室温，取出部分置于玻璃瓶内，使用纯化水进行分散，复合菌样与纯化水的质量比例是3:25，室温下震荡2h，然后过滤或离心，收集上清液，密封保存；（3）将第（2）步得到的上清液倒入至准备好的培养基内，上清液加入质量是培养基质量的10%，保持温度为25℃，培养至成熟后，继续培养至第三代，从而收集第一培养液；（4）将废弃秸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生防型复合菌剂的制备方法，其特征在于，制备过程包括：（1）使用无菌的取样器收集废弃秸秆以及动物粪便，冷冻干燥后形成复合菌样，装入无菌盒子内，密封后，在冰柜内保存备用；（2）将干燥后的复合菌样取出后，放置至恢复室温，取出部分置于玻璃瓶内，使用纯化水进行分散，室温下震荡1
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3h，然后过滤或离心，收集上清液，密封保存；（3）将第（2）步得到的上清液倒入至准备好的培养基内，保持温度为15
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30℃，培养至成熟后，继续培养至第三代，从而收集第一培养液；（4）将废弃秸秆和动物粪便加入至培养基内，混合后，同时加入第（3）步收集的第一培养液，培养至秸秆被腐蚀消耗以及粪便被分解后，继续转接培养三代后，收集第二培养液；（5）将第（4）步得到的第二培养液进行转接至培养基内，在培养基内加入秸秆和粪便，在15
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30℃下培养16
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25天，即得到生防型复合菌剂。2.根据权利要求1所述的一种生防型复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述第（1）步骤内，收集的废弃秸秆以及动物粪便均来自于农作物生长茂盛的地区，动物粪便不限于家禽和家畜，包括当地以相应植物为食物的动物的粪便；冰柜的温度为
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18~
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20℃。3.根据权利要求1所述的一种生防型复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述第（2）步骤内，复合菌样与纯化水的质量比例是1
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5:20
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50。4.根据权利要求1所述的一种生防型复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述第（3）步骤内，培养基为Pc培养基，包括：蔗糖5.0g/L，蛋白胨5.0g/L，酵母粉5.0g/L，氯化钠5.0g/L，氯化钙2.0g/L，磷酸氢二钾0...

【专利技术属性】
技术研发人员：王修宁，裴德修，
申请(专利权)人：山东海岱绿洲生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：