一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种乳酸菌/桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法，包括以下步骤：(1)含桃胶、茯苓培养液制备；(2)菌种活化；(3)乳酸菌发酵培养得发酵产物；(4)高压微射流均质得发酵产物溶胞物；(5)制备发酵产物溶胞物水凝胶。本发明专利技术创造性地利用乳酸菌发酵产物溶胞物与桃胶、茯苓中存在的大量植物多糖、蛋白质、氨基酸等活性成分，再加入新型发酵产品黄原胶，通过分子中大量的羟基、羧基、氨基相互以氢键等方式物理交联緾绕形成立体网络水凝胶，从而达到增加蛋白质、多肽类活性分子及混悬液体系稳定性之目的，且无需低温储存，久置无沉淀且稳定性更高。淀且稳定性更高。淀且稳定性更高。

【技术实现步骤摘要】
一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法


[0001]本专利技术涉及益生菌发酵产物溶胞物的
，尤其涉及一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法。

技术介绍

[0002]乳酸菌发酵产物溶胞物包含菌体及在发酵过程中合成的全部活性成分，含有肽聚糖、磷壁酸、蛋白质、磷脂、甾醇、脂肪酸、各种酶类、肽和氨基酸、核苷酸、胞外多糖等，不仅为肌肤提供丰富营养，还具有良好的抗衰老效果，因此广泛应用在化妆品护肤产品领域。
[0003]桃胶是桃树为了让伤口更快愈合而分泌出来的一种胶状物质，主要含有葡萄糖醛酸以及半乳糖，还含有植物胶原蛋白以及脂肪、碳水化合物等，桃胶本身也是一种生物糖胶原料，也是类似于黄原胶或阿拉伯树胶类似用途的一种医美原料，可减少皱纹，嫩肤，具有一定的养颜、护肤功效。茯苓为担子菌纲多孔菌科茯苓属的一种药食两用的真菌，富含多种有效成分，包括茯苓多糖、三萜类、月桂酸、麦角甾醇、腺嘌呤及胆碱等活性物质，具有良好的美白祛斑消疣等护肤效果。基于“双向发酵”技术，研究药食同源植物桃胶和茯苓对乳酸菌液态发酵体系的协同影响，赋能开发更多兼具功效与环境友好型的产品，具有广阔的市场前景。所谓“双向发酵”是指采用具有一定活性成分的中药材或药渣作为药性基质来代替传统的营养基质，并把经过优选的菌种加入其中进行微生物转化。其双向性体现在药性基质在提供益生菌所需营养的同时，还受到益生菌中酶的影响而改变自身的组织、成分，产生新的性味功能，具有自动化程度较高、物质传递高、继承性好、人为可控性强、有效成分更容易富集、工业化生产较为容易，且发酵液可直接作为化妆品原料应用的特点。
[0004]但在现有技术中，作为化妆品备案目录中的原料，乳酸菌相关产品多为发酵滤液和发酵产物溶胞物，前者离心过滤掉了乳酸菌菌体，而后者将乳酸菌破壁后得到，虽保留更多的活性成分，但多为水溶性混悬液，放置过程中会出现分层、沉降，使用前需摇匀，造成配方时使用不方便且含量不均匀，最终影响产品美观及使用体验等众多问题。此外，乳酸菌为厌氧菌，生产时需要一定的厌氧条件，同时对营养要求又非常苛刻，为了提高活菌数或延长活菌的存活时间，有时需要在常用的MRS培养基中加入营养液如牛肉汤等，使其生产成本大幅提高，为此，我们提出一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法来解决上述提出的问题。

技术实现思路

[0005]本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。
[0006]鉴于上述现有乳酸菌发酵产物溶胞物存在的问题，提出了本专利技术。
[0007]因此，本专利技术目的是提供一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法，其创造性地利用乳酸菌发酵产物溶胞物与桃胶、茯苓中存在的大量植物多糖、蛋白质、
氨基酸等活性成分，再加入新型发酵产品黄原胶、瓜尔胶，通过分子中大量的羟基、羧基、氨基相互以氢键等方式物理交联緾绕形成立体网络水凝胶，从而达到增加蛋白质、多肽类活性分子及混悬液体系稳定性之目的，且无需低温储存，久置无沉淀且稳定性更高。
[0008]为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
[0009]步骤S1，5％桃胶溶液制备：取50g桃胶，洗净除杂后，加入950g0.1mol/L的NaCO3和NaHCO3溶液于80
‑
90℃浸泡、水解4h，粉碎，减压滤过，用稀盐酸溶液调节pH值至6.0
‑
7.0，灭菌得到5％桃胶溶液；
[0010]步骤S2，10％茯苓提取液的制备：取茯苓菌核粉末100g，加70％乙醇500g，于95℃水浴回流提取3h，冷却至室温，抽滤，提取2次，合并滤液并将滤液减压浓缩回收乙醇，再加水溶解，过滤，加水至1000g，灭菌得到茯苓提取液；
[0011]步骤S3，培养液制备：分别按5％的重量比称取5％桃胶溶液和10％茯苓提取液，加入MRS液体培养基中，灭菌，得培养液；
[0012]步骤S4，乳酸菌发酵产物溶胞物的制备：
[0013]纯种活化：取
‑
80℃冻存的乳酸菌甘油菌并接种于MRS培养基上活化，30
‑
42℃培养20
‑
30h，得到种子培养基；
[0014]发酵培养：取活化后的种子培养基按1％
‑
5％比例接种于含有桃胶和茯苓的培养液中，30
‑
42℃培养20
‑
30h，即得乳酸菌发酵产物；
[0015]乳酸菌发酵产物溶胞物制备:取乳酸菌发酵产物，用微射流高压均质机18000
‑
20000psi先均质1次，再提高均质压力至23000
‑
25000psi均质2次，温度控制在0℃
‑
10℃，即得乳酸菌发酵产物溶胞物。
[0016]步骤S5，乳酸菌发酵产物溶胞物水凝胶的制备：
[0017]在乳酸菌发酵产物溶胞物中加入功能性助剂，搅拌均匀，再称取总量0.3％黄原胶和0.3％瓜尔胶，混合均匀后撒于液面，室温条件下搅拌使完全溶解即得到淡黄色透明水凝胶。
[0018]作为本专利技术所述乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法的一种优选方案，其中：所述步骤S1中所述桃胶溶液的浓度为2％
‑
8％，培养液中桃胶加入量为0.1％
‑
0.5％。
[0019]作为本专利技术所述乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法的一种优选方案，其中：所述步骤S2中所述茯苓提取液的浓度为5％
‑
15％，培养液中茯苓提取液加入量为0.3％
‑
0.7％。
[0020]作为本专利技术所述乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法的一种优选方案，其中：所述步骤S3中所述的MRS培养基包括：维生素C、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、葡萄糖、半胱氨酸、双歧糖、酵母浸粉、牛肉浸粉、大豆蛋白胨和牛肉蛋白胨。
[0021]作为本专利技术所述乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法的一种优选方案，其中：所述步骤S4中所述种子培养基的加入量为培养液的1％
‑
5％。
[0022]作为本专利技术所述乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法的一种优选方案，其中：所述步骤S4中所述微射流高压均质次数2
‑
5次，其中均质压力梯度增加，先用18000
‑
20000psi均质1次，再将均质压力增加至23000
‑
25000psi均质2次，温度控制在0
‑
10
℃。
[0023]作为本专利技术所述乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法的一种优选方案，其中：所述步骤S5中所述水凝胶材料包括黄本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1，5％桃胶溶液制备：取50g桃胶，洗净除杂后，加入950g0.1mol/L的NaCO3和NaHCO3溶液于80
‑
90℃浸泡、水解4h，粉碎，减压滤过，用稀盐酸溶液调节pH值至6.0
‑
7.0，灭菌得到5％桃胶溶液；步骤S2，10％茯苓提取液的制备：取茯苓菌核粉末100g，加70％乙醇500g，于95℃水浴回流提取3h，冷却至室温，抽滤，提取2次，合并滤液并将滤液减压浓缩回收乙醇，再加水溶解，过滤，加水至1000g，灭菌得到茯苓提取液；步骤S3，培养液制备：分别按5％的重量比称取5％桃胶溶液和10％茯苓提取液，加入MRS液体培养基中，灭菌，得培养液；步骤S4，乳酸菌发酵产物溶胞物的制备：纯种活化：取
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80℃冻存的乳酸菌甘油菌并接种于MRS培养基上活化，30
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42℃培养20
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30h，得到种子培养液；发酵培养：取活化后的种子培养基按1％
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5％比例接种于含有桃胶和茯苓的培养液中，30
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42℃培养20
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30h，即得乳酸菌发酵产物；乳酸菌发酵产物溶胞物制备:取乳酸菌发酵产物，用微射流高压均质机18000
‑
20000psi先均质1次，再提高均质压力至23000
‑
25000psi均质2次，温度控制在0℃
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10℃，即得乳酸菌发酵产物溶胞物。步骤S5，乳酸菌发酵产物溶胞物水凝胶的制备：在乳酸菌发酵产物溶胞物中加入功能性助剂，搅拌均匀，再称取总量0.3％黄原胶和0.3％瓜尔胶，混合均匀后撒于液面，室温条件下搅拌使完全溶解即得到淡黄色透明水凝胶。2.根据权利要求1所述的乳酸菌桃胶、茯苓发酵产物溶胞物水凝胶的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中所述桃胶水溶液的浓度为2％

【专利技术属性】
技术研发人员：查建生，吴琼珠，徐根兴，李新岗，郑云云，吴鑫，郑庆香，朱宪杰，王会玉，吴培培，童莉，
申请(专利权)人：南京斯拜科生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：