从三七中提取分离的四环三萜类皂苷及其在抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于植物提取技术领域，公开了从三七中提取分离的四环三萜类皂苷及其在抗肿瘤药物中的应用，本发明专利技术从三七根提取分离得到了20(S)

【技术实现步骤摘要】
从三七中提取分离的四环三萜类皂苷及其在抗肿瘤药物中的应用


[0001]本专利技术属于植物提取
，涉及从三七中提取分离的四环三萜类皂苷及其在抗肿瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]三七又名田七、金不换，在著名著作《本草纲目》中就有关于三七的使用记载，曰：“止血、散血、定痛，
……
乃阳明厥阴血分之药，
……
金刃箭伤跌扑杖疮血出不止者，嚼烂涂，或为末掺之，其血即止。亦主吐血衄血
……”
。传统认为三七具有消肿定痛、止血散瘀、治疗跌打损伤、治妇科疾病等功效，现代药理学表明其具有抗炎、抗肿瘤、清除氧自由基、保护心肌细胞、保护脑组织、抗血栓、增强免疫力、止血、抗纤维化、抗氧化等作用。
[0003]三七有效成分主要是三七皂苷类化合物，目前对于三七中皂苷类化合物的提取分离不够充分，本专利技术针对三七中的皂苷类化合物进行提取分离，得到一些新的化合物单体，以此补充三七皂苷化合物库，并对分离得到的化合物进行细胞毒性试验，以期找到一些结构新颖，并具有良好抗毒性的三七皂苷，为后续深入研究提供科学依据。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供从三七中提取分离的四环三萜类皂苷及方法、在抗肿瘤药物中的应用，得到了三种新的四环三萜类皂苷。
[0005]本专利技术从三七中提取分离的四环三萜类皂苷，结构为下述结构式中的任意一种：
[0006][0007]本专利技术提供了从三七中提取分离四环三萜类皂苷的方法，称取三七根粉末，用第一萃取剂在60℃下萃取，合并萃取液，减压蒸干，混悬于蒸馏水中，依次用CH2Cl2和正丁醇萃取，得到CH2Cl2萃取物和正丁醇萃取物；取正丁醇萃取物，用水饱和CH2Cl2‑
MeOH进行硅胶柱层析，其中CH2Cl2与MeOH的体积比为10∶1～3∶1，分成10个流分Fr.1～Fr.10；流分Fr.3经制备HPLC分离，以体积浓度70％CH3OH和体积浓度90％CH3OH为洗脱剂，得到5个亚流分Fr.3
‑
1～Fr.3
‑
5；亚流分Fr.3
‑
3经制备型HPLC，以体积浓度60％CH3OH洗脱，得到5个亚组分Fr.3
‑3‑
1～Fr.3
‑3‑
5；亚组分Fr.3
‑3‑
4经半制备HPLC，以体积浓度40％CH3CN洗脱，在保留时间t
R
＝25.7min纯化得到化合物2，在保留时间t
R
＝47.3min纯化得到化合物3；流分Fr.5经制备
HPLC分离，以体积浓度60％CH3OH洗脱分为4个亚流分Fr.5
‑
1～Fr.5
‑
4，亚流分Fr.5
‑
4经体积浓度35％CH3CN制备HPLC进一步纯化，在保留时间t
R
＝38.3min得到化合物1。
[0008]具体地，所述第一萃取剂是体积浓度80％MeOH。
[0009]具体地，所述第二萃取剂是CH2Cl2。
[0010]本专利技术还提供了从三七中提取分离的四环三萜类皂苷在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0011]特别地，本专利技术提供了从三七中提取分离的四环三萜类皂苷在制备治疗人宫颈癌药物中的应用。
[0012]更具体地是，专利技术提供了从三七中提取分离的四环三萜类皂苷在制备抑制人宫颈癌Hela细胞的药物中的应用。
[0013]本专利技术从三七根部提取分离了三种新的四环三萜类皂苷。本专利技术提取分离的三个化合物能够有效抑制癌细胞增殖，具有明显的抗癌活性，可作为潜在的先导化合物开发相关抗癌药物。
附图说明
[0014]图1为化合物1的1H
‑
NMR谱；
[0015]图2为化合物1的
13
C
‑
NMR谱；
[0016]图3为化合物1的HSQC谱；
[0017]图4为化合物1的HMBC谱；
[0018]图5为化合物1的TOCSY谱；
[0019]图6为化合物1的IR谱；
[0020]图7为化合物1的HR
‑
ESI
‑
MS谱；
[0021]图8为化合物1部分水解产物的HR
‑
ESI
‑
MS光谱。
[0022]图9为化合物2的1H
‑
NMR谱；
[0023]图10为化合物2的
13
C
‑
NMR谱；
[0024]图11为化合物2的HSQC谱；
[0025]图12为化合物2的HMBC谱；
[0026]图13为化合物2的IR谱；
[0027]图14为化合物2的HR
‑
ESIMS谱。
[0028]图15.为化合物3的1H
‑
NMR谱；
[0029]图16为化合物3的
13
C
‑
NMR谱；
[0030]图17为化合物3的1H
‑1H COSY谱；
[0031]图18为化合物3的HSQC谱；
[0032]图19为化合物3的HMBC谱；
[0033]图20为化合物3的IR谱；
[0034]图21为化合物3的HR
‑
ESIMS谱。
具体实施方式
[0035]本实施采用的三七根茎购买于成都市荷花池中药材市场，经成都生物研究所李甫
副研究员鉴定为三七根茎，保存于中国科学院成都生物研究所709实验室。实验仪器与试剂如表1所示。
[0036]表1实验仪器与试剂
[0037][0038][0039]本专利技术提供了从三七中提取分离四环三萜类皂苷的方法，称取三七根(100.0Kg)粉末，用200L 80％MeOH(所用百分比为体积浓度，下同)在60℃下萃取3次，合并萃取液，减压蒸干，混悬于20L蒸馏水中，依次用CH2Cl2(3
×
15L，指提取3次，每次溶剂用量为15L，下同)和n
‑
BuOH(3
×
15L)萃取，得到CH2Cl2萃取物(1.58Kg)和n
‑
BuOH萃取物(11.34Kg)。取正丁醇萃取部分(2.0Kg)，用水饱和CH2Cl2‑
MeOH(CH2Cl2与MeOH的体积比为10∶1～3∶1)进行硅胶柱层析(CC)，分成10个流分(Fr.1～Fr.10)。Fr.3(50.00g)经制备HPLC分离，以70％和90％CH3OH为洗脱剂，得到5个亚流分(Fr.3
‑
1～Fr.3
‑
5)。Fr.3
‑
3(11.2g)经制备型HPLC，60％CH3OH洗脱，得到5个亚组分(Fr.3
‑3‑
1～Fr.3
‑3‑
5)。Fr.3
‑3‑
4(0.67g)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.从三七中提取分离的四环三萜类皂苷，其特征在于，结构为下述结构式中的任意一种：2.从三七中提取分离权利要求1所述的四环三萜类皂苷的方法，其特征在于，称取三七根粉末，用第一萃取剂在60℃下萃取，合并萃取液，减压蒸干，混悬于蒸馏水中，依次用CH2Cl2和正丁醇萃取，得到CH2Cl2萃取物和正丁醇萃取物；取正丁醇萃取物，用水饱和CH2Cl2‑
MeOH进行硅胶柱层析，其中CH2Cl2与MeOH的体积比为10∶1～3∶1，分成10个流分Fr.1～Fr.10；流分Fr.3经制备HPLC分离，以体积浓度70％CH3OH和体积浓度90％CH3OH为洗脱剂，得到5个亚流分Fr.3
‑
1～Fr.3
‑
5；亚流分Fr.3
‑
3经制备型HPLC，以体积浓度60％CH3OH洗脱，得到5个亚组分Fr.3
‑3‑
1～Fr.3
‑3‑
5；亚组分Fr.3
‑3‑
4经半制备HPLC，以体积浓度40％CH3CN洗脱，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：张迹，李甫，胡卫成，宁志恒，
申请(专利权)人：淮阴师范学院，
类型：发明
国别省市：