【技术实现步骤摘要】
人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型及其构建方法
[0001]本申请是申请日为2022年12月14日、申请号为202211598172.4、专利技术名称为《人乳头瘤病毒分型及相关基因甲基化一体化检测模型及其构建方法》的分案申请。
[0002]本专利技术涉及分子生物学分析检测
,具体涉及一种人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型及其构建方法。
技术介绍
[0003]宫颈癌是人体最常见的癌瘤之一,不但在女性生殖器官癌瘤中占首位,而且是女性各种恶性肿瘤中最多见的癌瘤。宫颈癌的发生,在地理分布上的特点是高发区常连接成片,各省宫颈癌相对高发区的市、县也常有互相连接现象。总的趋势是农村高于城市,山区高于平原。根据29个省、市,自治区回顾调查我国宫颈癌死亡率占总癌症死亡率的第四位,占女性癌的第二位。宫颈癌患者的平均发病年龄以40~50岁为最多,60~70岁又有一高峰出现,20岁以前少见。
[0004]目前宫颈癌的筛查包括宫颈细胞学检测及人乳头瘤病毒(HPV)检测。细胞学检测包括巴氏涂片和TCT液基细胞压片,其诊断水平受医师主观因素影响较大。HPV DNA检测相比细胞学检测,能够对高危型和低危型进行分型和定量检测,但是大部分HPV为一过性感染,不会发展为宫颈癌前病变或宫颈癌,但易给妇女造成不必要的心理负担。因此单一依靠HPV筛查,会造成过度诊断和过度治疗。
技术实现思路
[0005]本专利技术旨在提供一种人乳头瘤病毒分型及相关基因甲基化一体化检测模型及其构建方法以弥 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型,其特征在于,包括:宫颈细胞DNA提取模块、测序模块、探针设计模块、富集测序模块和生信分析模块;所述宫颈细胞DNA提取模块用于提取待测宫颈细胞DNA,将所述DNA片段化,进行末端修复和接头连接;所述测序模块用于进行甲基化处理,再进行PCR富集和质检;所述探针设计模块用于根据宫颈癌相关基因和18种HPV基因组全长序列,设计探针;所述富集测序模块用于通过所述探针靶向富集目标区域的核酸,进行高通量测序;所述生信分析模块用于进行生信分析,比对HPV分型;从序列与18种HPV型别比对的结果中,分别提取分型各基因所包含的reads,计算基因甲基化分值,并统计基因覆盖深度,以甲基化分值与基因覆盖深度作为HPV基因甲基化高低程度指标,对样本进行分类预测;对宫颈癌相关基因甲基化进行检测;所述18种HPV基因组包括HPV6、HPV11、HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68a、HPV69和HPV82;所述宫颈癌相关基因为:ADCYAP1、AJAP1、ANKRD18CP、APC、ASTN1、CADM1、CCNA2、CDH1、CDH13、CDH6、CDKN2A、DAPK1、DLX1、EPB41L3、FAM19A4、FANCI、FHIT、GATA4、GFRA1、HS3ST2、JAM3、KCNIP4、LHX8、LMX1A、MAL、MIR124
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1、MIR124
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2、MIR124
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3、PAX1、PCDHA13、PCDHA4、POU4F3、RARB、RNASEH2A、RUBCNL、RXFP3、SLIT2、SOX1、SOX17、ST6GALNAC5、TERT、TIMP3、WIF1、ZNF671和ZSCAN1。2.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型,其特征在于,所述比对HPV分型包括:使用bismark将预处理后数据与18种HPV参考基因组序列进行比对,得到序列比对结果的详细信息,计算得到覆盖度,以覆盖度大于40%筛选数据得到基本分型信息。3.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型,其特征在于,所述以甲基化分值与基因覆盖深度作为HPV基因甲基化高低程度指标,对样本进行分类预测包括:将每种HPV分型的每个基因区域的甲基化分值与基因覆盖深度相乘,得到一个判断值,若所述判断值大于等于1.04,则判定为CIN2+;若所述判断值小于1.04,则判定为≤CIN1。4.根据权利要求1所述人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型,其特征在于,所述对宫颈癌相关基因甲基化进行检测包括:比对至人宫颈癌相关基因组生成bam文件,去冗余提取所有CpG位点,再从所述所有CpG位点中提取宫颈癌相关基因CpG位点,分别提取各高密度高关联区域所包含的reads,计算区域内甲基化分值,以甲基化分值作为宫颈癌相关基因甲基化高低程度指标,对样本进行分类预测。5.权利要求1~4任一项所述人乳头瘤病毒分型及宫颈癌相关基因甲基化一体化检测模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:提取待测宫颈细胞DNA,将所述DNA片段化,进行末端修复和接头连...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈汶,伍建,王海丽,韩路,姬晓雯,刘娜,王亚坤,陈思淼,戴钰,
申请(专利权)人:北京迈基诺基因科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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