一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法技术

本发明专利技术公开了一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，包括如下步骤：S1：取2份待检测样品，其中一份与纯水按一定比例混合，并用紫外分光光度仪进行扫描；S2：得到样品吸光度谱图，并将其减去纯水吸光度谱图，得到差值谱图；S3：将S1中的另一份待检测样品，通过0.22微米的过滤器过滤，以去除其中的微生物，取一定量的纯水，作为空白对照；本发明专利技术利用紫外分光光度仪进行测量，无需进行复杂的操作和专业知识，快速：本发明专利技术能够在短时间内完成微生物检测，大大节省了检测时间，经济：本发明专利技术的检测仪器和试剂成本较低，可以在普通实验室中进行，准确：本发明专利技术能够准确地检测水样中微生物和细菌的数量和种类。物和细菌的数量和种类。

【技术实现步骤摘要】
一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法


[0001]本专利技术涉及紫外分光光度检测
，具体为一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法。

技术介绍

[0002]纯水是各种实验常用的实验耗材，其起到很多作用，比如作为空白实验组，作为承载体，或者稀释液，但是纯水中，也可能受到污染，如微生物和细菌污染。
[0003]微生物和细菌污染已成为许多水源地的主要环境问题之一。传统的微生物检测方法包括培养法、荧光染色法和PCR等，这些方法具有操作复杂、耗时长、需要专业知识等缺点。因此，开发一种快速、准确和易操作的微生物和细菌检测方法至关重要。
[0004]近年来，紫外分光光度（UV
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Vis）技术越来越广泛地应用于水质检测领域。与其他检测技术相比，紫外分光光度技术具有快速、简便、经济等优点。虽然已有一些研究使用紫外分光光度技术进行微生物检测，但对于微生物数量和种类的识别仍存在不足。
[0005]因此，有必要提供一种新的紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法解决上述技术问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，具备操作简单、快速、经济和准确的优点。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，包括如下步骤：S1：取2份待检测样品，其中一份与纯水按一定比例混合，并用紫外分光光度仪进行扫描；S2：得到样品吸光度谱图，并将其减去纯水吸光度谱图，得到差值谱图；S3：将S1中的另一份待检测样品，通过0.22微米的过滤器过滤，以去除其中的微生物，取一定量的纯水，作为空白对照，将待测样品和空白对照液注入两个不同的石英比色皿中；S4：调节波长为290nm，将两个石英比色皿依次放入光路中，记录各自的吸光度值；S5：估算细菌数量：根据已知每个细菌中DNA的数量，可以通过前述步骤计算出每个样品中的DNA浓度，从而得到细菌的数量，细菌中DNA的含量为3pg，因此可根据这个数值来估算纯水中细菌的数量；S6：通过对差值谱图的分析，确定微生物和细菌特有的吸收峰，从而识别和计量待检测样品中存在的微生物数量和种类。
[0008]优选的，所述步骤S1中，取一定量的待检测样品，通常为5ml至500ml之间，与同等体积的纯水按比例混合。
[0009]优选的，所述步骤S1中，样品处理前要严格消毒，并遵守相关安全操作规程。
[0010]优选的，所述步骤S2中，将混合后的样品使用紫外分光光度仪扫描并记录吸收率谱图，此时需要注意，应先进行纯水的扫描，并用该谱图减去样品的谱图，得到差值谱图，这样可以消除纯水本身的对吸收峰的影响，更准确地确定微生物的吸收峰。
[0011]优选的，所述步骤S2中，注意混合纯水与待检测样品的比例，采用1:1的体积比例。
[0012]优选的，所述步骤S4中，根据Lambert
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Beer定律C=A/εl（其中C为溶液中分子浓度，A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，l为光程），可得到待测样品中DNA的浓度。
[0013]优选的，所述步骤S4中，使用已校准的紫外分光光度计，在290nm处测定待测样品和空白对照液的吸光度值。
[0014]优选的，所述步骤S4中，将待测样品的吸光度值减去空白对照的吸光度值，即得到完整样品的吸光度值。
[0015]优选的，所述步骤S6中，通过对差值谱图的分析，可以确定微生物和细菌特有的吸收峰，从而识别和计量待检测样品中存在的微生物数量和种类，可以采用多元回归分析、人工神经网络算法或支持向量机算法等方法进行分析，以确定微生物存在的类型和数量。
[0016]优选的，所述步骤S6中，紫外分光光度仪的波长范围应在190nm至300nm之间，以保证有效检测微生物和细菌的吸收峰。
[0017]与相关技术相比较，本专利技术提供的一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法具有如下有益效果：1、操作简单：本专利技术利用紫外分光光度仪进行测量，无需进行复杂的操作和专业知识。
[0018]2、快速：本专利技术能够在短时间内完成微生物检测，大大节省了检测时间，让工作人员快速检修纯水处理设备。
[0019]3、经济：本专利技术的检测仪器和试剂成本较低，可以在普通实验室中进行。
[0020]4、准确：本专利技术能够准确地检测水样中微生物和细菌的数量和种类。
实施方式
[0021]下面将结合本专利技术中的实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
实施例
[0022]紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，包括如下步骤：S1：取2份待检测样品，其中一份与纯水按一定比例混合，并用紫外分光光度仪进行扫描；取一定量的待检测样品，通常为5ml至500ml之间，与同等体积的纯水按比例混合，样品处理前要严格消毒，并遵守相关安全操作规程。
[0023]S2：得到样品吸光度谱图，并将其减去纯水吸光度谱图，得到差值谱图；将混合后的样品使用紫外分光光度仪扫描并记录吸收率谱图，此时需要注意，应先进行纯水的扫描，并用该谱图减去样品的谱图，得到差值谱图，这样可以消除纯水本身的对吸收峰的影响，更准确地确定微生物的吸收峰，注意混合纯水与待检测样品的比例，采用1:1的体积比例。
[0024]S3：将S1中的另一份待检测样品，通过0.22微米的过滤器过滤，以去除其中的微生物，取一定量的纯水，作为空白对照，将待测样品和空白对照液注入两个不同的石英比色皿中；S4：调节波长为290nm，将两个石英比色皿依次放入光路中，记录各自的吸光度值；根据Lambert
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Beer定律C=A/εl（其中C为溶液中分子浓度，A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，l为光程），可得到待测样品中DNA的浓度，使用已校准的紫外分光光度计，在290nm处测定待测样品和空白对照液的吸光度值，将待测样品的吸光度值减去空白对照的吸光度值，即得到完整样品的吸光度值。
[0025]S5：估算细菌数量：根据已知每个细菌中DNA的数量，可以通过前述步骤计算出每个样品中的DNA浓度，从而得到细菌的数量，细菌中DNA的含量为3pg，因此可根据这个数值来估算纯水中细菌的数量；S6：通过对差值谱图的分析，确定微生物和细菌特有的吸收峰，从而识别和计量待检测样品中存在的微生物数量和种类，通过对差值谱图的分析，可以确定微生物和细菌特有的吸收峰，从而识别和计量待检测样品中存在的微生物数量和种类，可以采用多元回归分析、人工神经网络算法或支持向量机算法等方法进行分析，以确定微生物存在的类型和数量，紫外分光光度仪的波长范围应在190nm至300nm之间，以保证有效检测微生物和细菌的吸收峰。
[0026]取纯水样本五份，每份为20ml，标记为A、B、C、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：取2份待检测样品，其中一份与纯水按一定比例混合，并用紫外分光光度仪进行扫描；S2：得到样品吸光度谱图，并将其减去纯水吸光度谱图，得到差值谱图；S3：将S1中的另一份待检测样品，通过0.22微米的过滤器过滤，以去除其中的微生物，取一定量的纯水，作为空白对照，将待测样品和空白对照液注入两个不同的石英比色皿中；S4：调节波长为290nm，将两个石英比色皿依次放入光路中，记录各自的吸光度值；S5：估算细菌数量：根据已知每个细菌中DNA的数量，可以通过前述步骤计算出每个样品中的DNA浓度，从而得到细菌的数量，细菌中DNA的含量为3pg，因此可根据这个数值来估算纯水中细菌的数量；S6：通过对差值谱图的分析，确定微生物和细菌特有的吸收峰，从而识别和计量待检测样品中存在的微生物数量和种类。2.根据权利要求1所述的一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，其特征在于：所述步骤S1中，取一定量的待检测样品，通常为5ml至500ml之间，与同等体积的纯水按比例混合。3.根据权利要求1所述的一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，其特征在于：所述步骤S1中，样品处理前要严格消毒，并遵守相关安全操作规程。4.根据权利要求1所述的一种紫外分光光度纯水细菌与微生物快速检测方法，其特征在于：所述步骤S2中，将混合后的样品使用紫外分光光度仪扫描并记录吸收率谱图，此时需要注意，应先进行纯水的扫描，并用该谱图减去样品的谱图，得到差值谱图，这样可以消除纯...

【专利技术属性】
技术研发人员：路俊峰，罗勇鸿，巨春玲，姚春芳，
申请(专利权)人：宜良滴源饮水工贸有限公司，
类型：发明
国别省市：