一种通过制备大豆-藻蓝双蛋白提高蛋白质乳化特性的方法技术

本发明专利技术公开了一种通过制备大豆

【技术实现步骤摘要】
r/min的转速离心20min，取上清液使用2 M HCL调pH至4.0，4℃静置过夜，搅拌均匀后在4℃下再次以10000 r/min的转速离心20 min，取离心后沉淀加入适量蒸馏水，以8000r/min的转速离心10min 重复水洗两次沉淀，加入适量蒸馏水在水洗的沉淀中，搅拌溶解后至溶液pH值为7.0，冻干48h后得到大豆蛋白
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藻蓝蛋白共沉淀双蛋白样品粉末。
实施例4
[0017]将大豆分离蛋白和藻蓝蛋白以1.2:0.8的质量比于去离子水混匀，配置成浓度为5%的蛋白质溶液，使用2 M NaOH调节pH至11.0，避光搅拌120min，搅拌均匀后在4℃下以10000 r/min的转速离心20min，取上清液使用2 M HCL调pH至4.0，4℃静置过夜，搅拌均匀后在4℃下再次以10000 r/min的转速离心20min，取离心后沉淀加入适量蒸馏水，以8000r/min的转速离心10min 重复水洗两次沉淀，加入适量蒸馏水在水洗的沉淀中，搅拌溶解后至溶液pH值为7.0，冻干48h后得到大豆蛋白
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藻蓝蛋白共沉淀双蛋白样品粉末。
实施例5
[0018]将大豆分离蛋白和藻蓝蛋白以1.4:0.6的质量比于去离子水混匀，配置成浓度为5%的蛋白质溶液，使用2 M NaOH调节pH至11.0，避光搅拌120min，搅拌均匀后在4℃下以10000 r/min的转速离心20min，取上清液使用2 M HCL调pH至4.0，4℃静置过夜，搅拌均匀后在4℃下再次以10000 r/min的转速离心20min，取离心后沉淀加入适量蒸馏水，以8000r/min的转速离心10min 重复水洗两次沉淀，加入适量蒸馏水在水洗的沉淀中，搅拌溶解后至溶液pH值为7.0，冻干48h后得到大豆蛋白
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藻蓝蛋白共沉淀双蛋白样品粉末。
对比例1
[0019]将大豆分离蛋白与去离子水混匀，配置成浓度为5%的蛋白质溶液，使用2 M NaOH调节pH至11.0，避光搅拌120min，搅拌均匀后在4℃下以10000 r/min的转速离心20min，取上清液使用2 M HCL调pH至4.0，4℃静置过夜，搅拌均匀后在4℃下再次以10000 r/min的转速离心20min，取离心后沉淀加入适量蒸馏水，以8000r/min的转速离心10min 重复水洗两次沉淀，加入适量蒸馏水在水洗的沉淀中，搅拌溶解后至溶液pH值为7.0，冻干48h后得到大豆分离蛋白样品粉末。
对比例2
[0020]将藻蓝蛋白与去离子水混匀，配置成浓度为5%的蛋白质溶液，使用2 M NaOH调节pH至11.0，避光搅拌120min，搅拌均匀后在4℃下以10000 r/min的转速离心20min，取上清液调pH至4.0，4℃静置过夜，搅拌均匀后在4℃下再次以10000 r/min的转速离心20min，取离心后沉淀加入适量蒸馏水，以8000 r/min的转速离心10min 重复水洗两次沉淀，加入适量蒸馏水在水洗的沉淀中，搅拌溶解后至溶液pH值为7.0，冻干48h后得到藻蓝蛋白样品粉末。
利用以下实验验证实验效果：
[0021]1.使用浊度法测定样品的乳液活性指数（EAI）和稳定性指数（ESI）。将等分的蛋白
质样品(1 mg/mL)和5 mL玉米油与35 mL蛋白质溶液混合,并使用均质器(M133/128
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0, Biospec Products, Inc., ESGC, Switzerlanc)在10000 rpm下均质1 min。取50 μL乳剂与4.95 mL.SDS溶液(1 mg/mL)分别在0和10 min进行测定。用1 mL塑料试管在λ=500 nm(紫外可见分光光度计)下测定紫外吸收。分别使用方程计算EAI和ESI。
[0022][0023][0024]其中，A0和A
10
分别是均质后0 min和10 min稀释乳液的吸光度;C是蛋白质浓度(g/mL)；D是稀释因子(100)；φ是玉米油的体积分数(0.125)；L为比色皿光径(1 cm)。
[0025]2.由图二可知，经过共沉淀法制备双蛋白后，样品混合液中藻蓝蛋白含量达到Co
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0.6时，Co
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0.6组样品的乳液活性指数比只添加原大豆蛋白组样品的乳液活性指数高；样品混合液中藻蓝蛋白含量达到Co
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0.8时，Co
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0.6组样品的EAI比Co
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0.8组样品的EAI高；样品混合液中藻蓝蛋白含量分别达到Co
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1、Co
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1.2时,样品的EAI逐渐提高；样品混合液中藻蓝蛋白含量达到Co
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1.4时，Co
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1.4组样品的EAI比Co
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1.2组样品的EAI低。且Co
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0.6、Co
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0.8、Co
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1、Co
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1.2和Co
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1.4组样品的EAI均高于大豆蛋白或藻蓝蛋白组样品的EAI。
[0026]3.由图三可知，经过共沉淀法制备双蛋白后，Co
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0.6、Co
‑
0.8、Co
‑
1组样品的ESI均比大豆蛋白组样品的ESI低，Co
‑
1.2，Co
‑
1.4组样品的ESI均比只添加原大豆蛋白组样品的ESI高，Co
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0.6、Co
‑
0.8、Co
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1、Co
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1.2、Co
‑
1.4组样品的ESI随着藻蓝蛋白含量的提高而上升，且均高于藻蓝蛋白组样品的ESI。
[0027]由测定结果可知，经过共沉淀法制备双蛋白后，样品ESI和EAI的数值比大豆蛋白或藻蓝蛋白样品的数值高，说明通过共沉淀法制备双蛋白提高了蛋白质的乳化特性，并考虑经济效益及进行实地生产的可实施性等影响因素，由此得出大豆分离蛋白与藻蓝蛋白的最佳比例是0.8:1.2。
参考文献
[0028][1]周小虎,章超桦,赵良忠等.不同方法制备豌豆
‑
草鱼双蛋白的热诱导凝胶特性比较[J].广东海洋大学学报,2022,42(03):79
‑
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‑
289.[3]CHEN X, CHEN Y, ZOU L, et al. Plant
‑
based nanoparticles prepared from proteins and phospholipids consisting of a core
‑
multilayer shell structure: Fabrication, stability, and 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种通过制备大豆
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藻蓝双蛋白提高蛋白质乳化特性的方法，其特征在于，所述方法是将大豆蛋白与藻蓝蛋白混合配成蛋白质溶液，并通过共沉淀法得到共沉淀大豆
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藻蓝双蛋白样品。2.权利要求1所述的大豆
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藻蓝双蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：（1）将大豆分离蛋白和藻蓝蛋白与去离子水混匀，配置成蛋白质溶液，使用2
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M
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NaOH调节 pH至110，避光搅拌120min。3.（2）搅拌均匀后以 10
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000r/min的转速离心20min，取上清液使用 2
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M
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HCl调pH至4.0，静置过夜，搅拌均匀后在 4.℃下再次以 10000 r/min 的转速离心 20min。4.（3）取上清液调pH，在4℃下静置过夜，搅...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜智模，李兰欣，张雪晴，苏睿涵，王欢，杜智敖，侯宇谦，崔轩恺，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
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