本申请提供了一种蜡样芽孢杆菌及其应用和制剂，该蜡样芽孢杆菌(Lactobacillussiniperca)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO：13947。本申请还提供了上述芽孢杆菌在制备抑制金色葡萄球菌、巨型球菌、库特氏菌、嗜水气单胞菌、巨大芽孢杆菌和MRSA耐甲氧西林金葡的制剂中的应用。本申请的芽孢杆菌作为一种生物抑菌微生物，有利于减少抗生素药物的使用，可以用于制备抑制金色葡萄球菌、巨型球菌、库特氏菌、嗜水气单胞菌、巨大芽孢杆菌和MRSA耐甲氧西林金葡的制剂。和MRSA耐甲氧西林金葡的制剂。和MRSA耐甲氧西林金葡的制剂。
【技术实现步骤摘要】
蜡样芽孢杆菌及其应用和制剂
[0001]本专利技术涉及微生物领域，更具体地，涉及一种蜡样芽孢杆菌及其应用和制剂。
技术介绍
[0002]目前，随着抗生素的大量使用，面临着耐药性的问题。生物抑菌的作用越来越受到重视。
技术实现思路
[0003]本申请提供了一种蜡样芽孢杆菌(Lactobacillus siniperca)，所述芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No：13947。
[0004]本申请还提供了包括上述蜡样芽孢杆菌的制剂。
[0005]本申请还提供了上述芽孢杆菌在制备抑制金色葡萄球菌、巨型球菌、库特氏菌、嗜水气单胞菌、巨大芽孢杆菌和MRSA耐甲氧西林金葡的制剂中的用途。
[0006]本申请的芽孢杆菌作为一种生物抑菌微生物，有利于减少抗生素药物的使用，可以在制备抑制金色葡萄球菌、巨型球菌、库特氏菌、嗜水气单胞菌、巨大芽孢杆菌和MRSA耐甲氧西林金葡的制剂中发挥重要作用。
附图说明
[0007]图1和图2示出了本申请的芽孢杆菌的扫描电镜照片。
[0008]图3至图5分别示出了该细菌的革兰氏染色、芽孢染色和鞭毛染色图片。
[0009]图6和图7分别示出了该细菌在LB培养基和血琼脂培养基下培养的菌落形态。
[0010]图8和图9分别示出了在庆大霉素和丁胺卡那存在下的菌落形态，显示该菌对庆大霉素和丁胺卡那敏感。
[0011]图10至图14分别示出了该细菌对金色葡萄球菌、巨型球菌、库特氏菌、嗜水气单胞菌、巨大芽孢杆菌的抑菌效果。
[0012]图15至图18分别示出了带菌琼脂块、菌液浸泡纸片、上清液浸泡纸片和滤液浸泡纸片的抑菌效果。
[0013]本申请的蜡样芽孢杆菌菌株(Lactobacillus siniperca)wqr2017
‑
3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，属于鳜鱼乳杆菌，其保藏编号为CGMCC No：13947，保藏日为：2017年3月28日，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
具体实施方式
[0014]下面的实施例可以使本领域技术人员更全面地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。
[0015]本申请提供了一种蜡样芽孢杆菌，从患病鲈鱼体表伤口溃烂处分离得到。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No：13947，
保藏日为：2017.3.28。
[0016]菌株的生理生化特征：
[0017](1)接触酶阳性
[0018]取洁净玻片1张，在中央加3％H2O21滴，用接种环挑取细菌置于其中，立即观察结果。若立即出现大量气泡为阳性。
[0019](2)氧化酶阳性
[0020]取洁净滤纸条，沾取菌落少许，加氧化酶试剂(10g/L盐酸四甲基对苯二胺水溶液或10g/L盐酸二甲基对苯二胺水溶液)1滴，1min内观察结果。也可将试剂滴加到菌落上进行试验。结果：阳性者立即变粉红色，5～10s内呈深紫色。
[0021](3)精氨酸双水解酶阳性
[0022]接试验菌于含精氨酸的Thornley氏半固体培养基中，并以不含精氨酸的肉汤培养基作空白对照。穿刺接种后，用一二层灭菌后融化的凡士林密封培养物并保温培养。凡7天内由黄橙色转变为红色者即为阳性。
[0023](4)脲酶阳性
[0024]将待检菌接种于含有尿素的培养基中，35℃孵育18
‑
24h，观察结果。培养基变为红色为阳性，不变为阴性。
[0025](5)水解淀粉(阳性)
[0026]将被检菌划线接种于淀粉琼脂平板或试管中，35℃孵育18
‑
24h，加入革兰碘液数滴，立即观察结果。结果：阳性反应，菌落周围有无色透明区，其它地方蓝色；阴性反应，培养基全部为蓝色。
[0027](6)硝酸盐还原实验(阳性)
[0028]将待检菌接种于硝酸盐培养基(内含小倒管)中，35℃孵育1
‑
4d。将甲、乙等量混合液(用时混合)0.1ml加于试管内，立即或10min内观察结果。结果：出现红色为阳性反应。
[0029](7)柠檬酸盐利用试验(阳性)
[0030]将待检菌接种于柠檬酸盐培养基上，置35℃孵育1
‑
4d，逐日观察结果。结果：若用溴麝香草酚兰指示剂，斜面出现菌落或菌苔，培养基变蓝色为阳性；无菌落生长，培养基绿色为阴性。
[0031](8)葡萄糖代谢类型鉴别试验
[0032]挑取少许纯培养物(不要从选择性平板中挑取)接种2支培养管中，在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气(作为密封管)，另一管不加(作为开放管)。置35℃孵箱孵育48h以上。结果：两管培养基均不产酸(颜色不变)为阴性；两管都产酸(变黄)为发酵型；加液体石蜡管不产酸，不加液体石蜡管产酸为氧化型。本菌的葡萄糖氧化发酵试验为发酵型，产酸不产气，可在强酸性或强碱性环境中生存。
[0033]细菌形态：
[0034]图1和图2示出了菌株的扫描电镜照片，图1中的菌株为细胞爬片培养，图2为滴片，放大倍数1万倍。图1是将细胞爬片丢在LB液体培养基[LB液体培养基的配制(1L)：在950ml ddH2O中加入胰化蛋白胨(tryptone)10g；酵母提取物(yeast extract)5g；NaCl 10g。用1M的NaOH调节pH值到7.0，定容至1L。121℃，20min高压灭菌，4℃储存。]中，培养12
‑
16小时，取出后用多聚赖氨酸包被，再电镜扫描后的图片。图2是直接将用LB液体培养基培养了12
‑
16
小时后的细菌培养液滴在玻片上，用多聚赖氨酸包被，再电镜扫描后的图片。从图1和图2可以看出，该细菌除了有鞭毛作为运动器官外，还有纤毛。菌体细胞杆状，末端钝圆，多数二联排列，1.0～1.2微米
×
3.0～5.0微米。
[0035]图3至图5分别示出了该细菌的革兰氏染色、芽孢染色和鞭毛染色图片。通过染色实验得知，菌体细胞杆状，末端钝圆，多数二联排列，1.0～1.2微米
×
3.0～5.0微米。生长温度范围15～45℃，10℃以下生长缓慢，60℃保温30min再37℃培养仍能生长。产芽孢，芽孢圆形或柱形，中生或近中生，1.0～1.5微米，孢囊无明显膨大。革兰氏阳性，无荚膜，周身鞭毛。
[0036]菌落形态：
[0037]图6和图7分别示出了该细菌在LB固体培养基[LB液体培养基的配制(1L)：在950ml ddH2O中加入胰化蛋白胨(tryptone)10g；酵母提取物(yeast extract)5g；NaCl 10g。用1M的NaOH调节pH值到7.0，定容至1L。然后加入15g琼脂粉。121℃，20min高压灭菌，待冷却至50
‑
60℃时，倒制平板。倒制本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种蜡样芽孢杆菌(Lactobacillussiniperca)，所述蜡样芽孢杆菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNO：13947，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院...
【专利技术属性】
技术研发人员：王庆容，李春涛，宋培勇，魏福伦，
申请(专利权)人：遵义师范学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。