【技术实现步骤摘要】
一种通过核酸链组装结构连接的抗体偶联核酸药物的复合物及其制备方法与应用
[0001]本专利技术涉及生物医学领域,具体涉及一种通过核酸链组装结构连接的抗体偶联核酸药物的复合物及其制备方法与应用。
技术介绍
[0002]抗体偶联寡核苷酸技术是利用偶联反应将抗体与寡核苷酸连结,并构建成具有目标靶向性的偶联物。寡核苷酸本身不具备靶向性,在人体血液系统中循环时极易被核酸酶降解,因此抗体
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寡核苷酸的偶联技术大幅度提高了寡核苷酸在体内的稳定性与利用率。根据疾病相关目标细胞的特异性,抗体可将寡核苷酸高效并安全地递送到达。
[0003]抗体偶联寡核苷酸常用四种偶联技术:电荷相互作用、Avidin/Streptavidin
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Biotin偶联、直接偶联和核酸双链杂交。电荷相互作用是将负电荷的寡核苷酸主链(抗体或抗体片段)与带正电荷的鱼精蛋白构建成融合蛋白(抗体偶联寡核苷酸antibody
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oligonucleotide conjugates,AOC)。该偶联技术的优点为操作简单,灵活,且多阳离子复合物可充当溶酶体逃逸剂使寡核苷酸进入细胞。Avidin/Streptavidin
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Biotin偶联技术是将硫醇修饰的DNA与马来酰亚胺激活的链霉亲和素产生化学连结,构建出链霉亲和素
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DNA,从而将各类生物素化蛋白通过非共价连接。Avidin/Streptavidin
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Biotin是1984年第一个用于AOC研发的偶联技术 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.通过核酸链组装结构连接的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,包括依次连接的抗体、核酸链组装结构和小核酸分子;所述抗体为靶向细胞表面抗原的特异性抗体;所述核酸链组装结构包括不少于1条的单链DNA;所述小核酸分子为靶向疾病基因治疗靶点的siRNA、miRNA或ASO。2.根据权利要求1所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述核酸链组装结构包括1条RL链,所述RL链为单链DNA,其末端连接有La片段;所述小分子核酸的数量为≥1的整数,每个小分子核酸的末端皆连接有L
’
片段,所述L
’
片段为单链DNA;所述RL链与L
’
片段部分互补或完全互补,组装成分枝状DNA结构;所述抗体连接有La片段。3.根据权利要求2所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述RL链的序列与人转录组无同源性,所述RL链与L
’
片段互补配对的长度为10~30bp。4.根据权利要求1所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述核酸链组装结构包括1条RL链和n条Ln链,n为≥0的整数;所述RL链或Ln链为单链DNA,所述RL链的末端连接有La片段;所述RL链与Ln链序列完全互补或部分互补,组装成分枝状或多面体DNA结构;所述小分子核酸的数量为≥1的整数,每个小分子核酸的末端皆连接有Ln
’
片段,所述Ln
’
片段与Ln链完全互补或部分互补;所述抗体连接有La片段。5.根据权利要求4所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述RL链的序列与人转录组无同源性,且所述RL链与Ln链互补的片段长度为10~30bp;每条Ln链与1个小分子核酸连接,Ln链与Ln
’
片段互补片段长度为10~30bp;所述La片段的长度为10
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30nt。6.根据权利要求2~5任一项所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述RL链的核酸序列为TTATCGGCGCCAACCGCCGA
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(CTACATTGTAGGTTCCACTGGTTGCTAA)4或TTATCGGCGCCAACCGCCGA
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(AACAACAACAACAACTTT)4;其中La片段位于RL链末端,所述La片段与抗体的化学连接linker选自DBCO
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N3、SMCC、SPDP、TCO/Tetrazine或HyNic/4FB;所述Ln链的核酸序列为CTACATTGTAGGTTCCACTGGTTGCTAA或AACAACAACAACAACTTT。7.根据权利要求1所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述细胞表面抗原包括HER2、TROP2、EGFR、CD22、CD30、CD33、CD79b、CD71、BCMA、Nectin
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4、CEA、HBSAG、SCC、TPA和/或MARA中的至少一种。8.根据权利要求1所述的抗体
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小核酸复合物,其特征在于,所述靶向疾病基因治疗靶点中的疾病包括乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌、胃癌、食管癌、涎腺肿瘤、肾癌、肺癌、胆管癌、膀胱癌、前列腺癌、结直肠癌、胰腺癌、鳞状上皮细胞癌、神经胶质肉瘤、淋巴瘤、骨髓瘤、黑色素瘤、睾丸肿瘤、白血病、类风湿关节炎、囊性纤维化、年龄相关性黄斑变性、慢性阻塞性肺病、高血压、青光眼、干眼病、过敏性结膜炎、色素性视网膜炎、急性前部缺血性视神经病变、成人急性...
【专利技术属性】
技术研发人员:曲娜,邹佳佳,赵泽坤,史权威,鲍印,沈思琳,
申请(专利权)人:北京君全智药生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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