一种用于胚胎移植前培养的胚胎培养液制造技术

本发明专利技术公开了一种用于胚胎移植前培养的胚胎培养液。本发明专利技术提供的用于胚胎或囊胚的体外培养的培养液，包括：层粘连蛋白、纤粘连蛋白和表皮生长因子；培养液中，层粘连蛋白的浓度为10

【技术实现步骤摘要】
一种用于胚胎移植前培养的胚胎培养液


[0001]本专利技术属于生殖医学领域，具体涉及一种用于胚胎移植前培养的胚胎培养液，可显著提高胚胎着床率。

技术介绍

[0002]试管婴儿是体外受精－胚胎移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。“试管婴儿”可以简单地理解成由实验室的试管代替了输卵管的功能而称为“试管婴儿”。尽管体外受精原用于治疗由输卵管阻塞引起的不孕症，现已发现体外受精对由于宫内膜异位症(endometriosis)，精子异常(数目异常或形态异常)引起的不孕症，甚至原因不明性不孕症都有所帮助。
[0003]体外授精：将精子进行预处理，将精液经过洗涤后去除精浆中的杂质，将精子放入培养箱中进行上游，然后将上游到培养液中的精子加入到含有卵子的培养基内；卵子受精后形成一个新细胞即受精卵，然后继续培养；分裂至8～10个细胞的胚胎或囊胚时，将胚胎或囊胚移植至女性子宫腔底部，一般距离宫底1.5cm左右。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种用于胚胎移植前培养的胚胎培养液，可显著提高胚胎着床率。
[0005]本专利技术提供了一种用于胚胎或囊胚的体外培养的培养液，包括：层粘连蛋白、纤粘连蛋白和表皮生长因子；所述培养液中，层粘连蛋白的浓度为10
‑
300μg/mL、纤粘连蛋白的浓度为10
‑
100μg/mL，表皮生长因子的浓度为10
‑
100ng/mL。/>[0006]所述培养液中，层粘连蛋白的浓度为80μg/mL、纤粘连蛋白的浓度为40μg/mL，表皮生长因子的浓度为20ng/mL。
[0007]所述培养液中，还包括基础培养液。
[0008]所述培养液中，余量为基础培养液。
[0009]所述培养液由基础培养液、层粘连蛋白、纤粘连蛋白和表皮生长因子组成。
[0010]所述基础培养液可为进行胚胎培养或囊胚培养的基础培养液。
[0011]所述基础培养液可为进行胚胎培养或囊胚培养的市售培养液。
[0012]所述基础培养液可为进行胚胎培养或囊胚培养的常规培养液。
[0013]所述基础培养液具体可为囊胚培养液。
[0014]所述囊胚培养液具体可为：G
‑2TM plus。
[0015]G
‑2TM plus：Vitrolife Sweden AB；产品目录号为10132。
[0016]本专利技术还保护所述培养液在体外培养胚胎中的应用。
[0017]所述胚胎为体外受精的胚胎。
[0018]所述胚胎为移植到母体子宫前的胚胎。
[0019]所述胚胎为体外受精且移植到母体子宫前的胚胎。
[0020]所述胚胎为体外受精－胚胎移植中移植到母体子宫前的胚胎。
[0021]本专利技术还保护所述培养液在体外培养囊胚中的应用。
[0022]所述囊胚为体外受精的囊胚。
[0023]所述囊胚为移植到母体子宫前的囊胚。
[0024]所述囊胚为体外受精且移植到母体子宫前的囊胚。
[0025]所述囊胚为体外受精－胚胎移植中移植到母体子宫前的囊胚。
[0026]本专利技术还保护一种体外培养胚胎的方法，包括如下步骤：采用所述培养液体外培养胚胎。
[0027]所述胚胎为体外受精的胚胎。
[0028]所述胚胎为移植到母体子宫前的胚胎。
[0029]所述胚胎为体外受精且移植到母体子宫前的胚胎。
[0030]所述胚胎为体外受精－胚胎移植中移植到母体子宫前的胚胎。
[0031]所述体外培养的条件可为：采用37℃、5％CO2的培养箱。
[0032]本专利技术还保护一种体外培养囊胚的方法，包括如下步骤：采用所述培养液体外培养囊胚。
[0033]所述囊胚为体外受精的囊胚。
[0034]所述囊胚为移植到母体子宫前的囊胚。
[0035]所述囊胚为体外受精且移植到母体子宫前的囊胚。
[0036]所述囊胚为体外受精－胚胎移植中移植到母体子宫前的囊胚。
[0037]所述体外培养的条件可为：采用37℃、5％CO2的培养箱。
[0038]本专利技术还保护所述培养液在体外受精－胚胎移植(试管婴儿)中的应用。
[0039]本专利技术还保护所述培养液在制备用于体外培养胚胎的试剂中的应用。
[0040]本专利技术还保护所述培养液在制备用于体外培养囊胚的试剂中的应用。
[0041]本专利技术还保护所述培养液在制备用于体外受精－胚胎移植(试管婴儿)的试剂中的应用。
[0042]以上任一所述胚胎为人胚胎。
[0043]以上任一所述囊胚为人囊胚。
[0044]以上任一所述胚胎为囊胚期的胚胎。
[0045]以上任一所述胚胎为发育处于4
‑
5期的胚胎。
[0046]以上任一所述囊胚为发育处于4
‑
5期的囊胚。
[0047]在进行胚胎移植前先采用本专利技术提供的培养液进行体外培养，可以显著增加胚胎的着床率。本专利技术对于生殖医学领域具有重大的应用推广价值。
附图说明
[0048]图1为囊胚粘附于子宫内膜细胞(体外着床模型)的原理示意图。
[0049]图2为实验组囊胚粘附于子宫内膜细胞并扩展的过程照片。
具体实施方式
[0050]下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。以下提供的实施例可作为本
普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本专利技术的限制。
[0051]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。如无特殊说明，以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。如无特殊说明，实施例中所用的基础培养液为市售囊胚培养液(G
‑2TM plus；Vitrolife Sweden AB；产品目录号为10132)。实施例中的细胞培养均采用37℃、5％CO2的培养箱。
[0052]囊胚包括囊胚腔、内细胞团和滋养层，分别进行评分。根据囊胚腔是否孵化以及大小将囊胚的发育分为六个时期：1期：早期有腔室囊胚，囊胚腔小于胚胎总体积的1/2；2期：囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2；3期：完全扩张囊胚，囊胚腔完全占据了胚胎的总体积；4期:扩张囊胚，囊胚腔完全充满胚胎，胚胎总体积变大，透明带变薄；5期：正在孵出的囊胚，囊胚的一部分从透明带中逸出；6期：孵出的囊胚，囊胚全部从透明带中逸出。内细胞团评分标准：A级：细胞数目多，结合紧密；B级：细胞数目偏少，结合尚紧密；C级：细胞数目较少，结合较松散；D级：细胞数目极少。滋养层评分标准：A级，细胞数目多，囊胚四周均有细胞分布；B级：细胞数目尚可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于胚胎或囊胚的体外培养的培养液，包括：层粘连蛋白、纤粘连蛋白和表皮生长因子；所述培养液中，层粘连蛋白的浓度为10
‑
300μg/mL、纤粘连蛋白的浓度为10
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100μg/mL，表皮生长因子的浓度为10
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100ng/mL。2.如权利要求1所述的培养液，其特征在于：所述培养液中，层粘连蛋白的浓度为80μg/mL、纤粘连蛋白的浓度为40μg/mL，表皮生长因子的浓度为20ng/mL。3.如权利要求1或2所述的培养液，其特征在于：所述培养液由基础培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明慧，韩烁，李媛，王京，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京朝阳医院，
类型：发明
国别省市：