一种抗皱护肤溶液及其冻干品和制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗皱护肤溶液及其冻干品和制备方法，包括如下步骤：S1、人参根预处理；S2、制备人参组织；S3、诱导培养：在诱导培养基中，将步骤S2获得的人参组织进行诱导培养，制的初始人参形成层分生组织细胞系；S4、悬浮培养：将步骤S3制备的初始人参形成层分生组织细胞系在悬浮培养基上将进行悬浮培养，经40μm细胞筛过滤，收集滤液，获得所述抗皱护肤溶液。所述抗皱护肤溶液冻干获得抗皱护肤冻干品；本发明专利技术采用培养过人生细胞的细胞培养液进行冻干，可以应用于皮肤抗皱抗衰，对人体细胞活性和胶原蛋白表达有促进作用。该方法工艺条件温和简单，对设备无特殊要求，同时提高了资源利用率，有利于大规模产业化生产。有利于大规模产业化生产。有利于大规模产业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种抗皱护肤溶液及其冻干品和制备方法


[0001]本专利技术涉及化妆品
，尤其涉及一种抗皱护肤溶液及其冻干品和制备方法。

技术介绍

[0002]皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤，使皮肤对机体的防护能力，调节能力等减退，由此皮肤不能适应内外环境的变化，出现颜色、色泽、形态、质感等外观整体状况的改变。皮肤的老化分为内源性老化和外源性老化。内源性老化是指皮肤随年龄增长的自然老化，表现为皮肤变白，出现细小皱纹、弹性下降、皮肤松弛等。外源性老化的最主要原因是日晒所致的光老化，表现为皱纹、皮肤松弛、粗糙、淡黄或灰黄色的皮肤变色、毛细血管扩张、色素斑形成。皮肤受到外界环境影响，形成游离自由基，自由基破坏正常细胞膜组织内的胶原蛋白、活性物质，氧化细胞而形成的小细纹、皱纹。皱纹渐渐出现。
[0003]形成层是植物的分裂组织。形成层由很薄的细胞壁的很少层数的细胞构成，在植物体内极微量存在。由于这样的结构特点，如果施加物理性外力的话，在分离的过程中极易受损。形成层分生组织细胞(Cambial meristematic cells，CMCs)具有很强的自我更新能力，并且可以分化成为其他类型的植物细胞。CMCs会有大量的细胞产物产生，并且这些成分都可用于化妆品、药品、食品等行业当中。以人参形成层分生组织细胞(ginseng CMCs)为例，它的细胞产物用于治疗各种综合征、预防或治疗肝疾病、治疗癌症和延缓衰老。
[0004]目前ginseng CMCs的液体培养分离获得还处于小规模阶段，达不到放大生产的要求，除此之外，在培养过程中由于无法保证遗传稳定性，导致细胞产物的含量极低甚至没有，这些原因大大影响了ginseng CMCs的应用和增加了其应用的经济成本。本专利技术人在研发ginseng CMCs产品时偶然发现培养过ginseng CMCs的细胞培养液有明显的促进胶原蛋白生成的作用，然而，现有技术人员通常将培养液当做废弃液处理。
[0005]因此，本专利技术致力于开发一种应用于皮肤抗皱的，培养过人参形成层分生组织抗皱护肤溶液及冻干品。

技术实现思路

[0006]本专利技术为了克服上述现有技术中存在的问题，提供了一种抗皱护肤溶液及其冻干品和制备方法，该方法工艺条件温和简单，对设备无特殊要求，有利于大规模产业化生产。人参形成层分生组织细胞培养后获得的培养液对人体细胞活性和胶原蛋白表达有促进作用。
[0007]本专利技术的技术方案如下：
[0008]一种抗皱护肤溶液的制备方法，包括如下步骤：
[0009]S1、人参根预处理；
[0010]S2、制备人参组织；
[0011]S3、诱导培养：在诱导培养基中，将步骤S2获得的人参组织进行诱导培养，制得初
始人参形成层分生组织细胞系；
[0012]S4、悬浮培养：将步骤S3制备的初始人参形成层分生组织细胞系在悬浮培养基上将进行悬浮培养，过滤，收集滤液，获得所述抗皱护肤溶液。
[0013]步骤S4中，过滤可采用40
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100μm细胞筛。
[0014]步骤S1具体为：选取人参根，去除须根，用自来水冲洗3h，然后用乙醇浸泡5min，无菌水冲洗3次，次氯酸钠浸泡5min、无菌水冲洗3次，得到粗处理人参根。
[0015]作为优选，步骤S1中，所用人参根为人工种植的“长白山人参”1年生人参苗，在实验室进行移栽、缓苗，待人参苗芽孢开始生长后(约1周)采集的人参根。
[0016]作为优选，步骤S1中所用乙醇体积百分比为70％，次氯酸钠体积百分比为1％。
[0017]步骤S2具体为，将步骤S1得到的粗处理人参根切成0.5cm长0.1cm粗的丝状，依次用乙醇浸泡5min，无菌水冲洗3次，次氯酸钠浸泡15min，无菌水冲洗5min，蔗糖溶液A浸泡24h，去除形成层细胞外的其他细胞；蔗糖溶液B浸泡15min，降低细胞液浓度，方便加入培养液中培养，研碎，柠檬酸溶液冲洗，得到人参组织备用。
[0018]作为优选，步骤S2中所用乙醇浓度为70％，次氯酸钠浓度为1％，蔗糖溶液A浓度为0.6mol/L、蔗糖溶液B浓度为0.3mol/L，柠檬酸溶液浓度为150mg/L。
[0019]所述诱导培养基是在液态基础培养基中添加IAA(吲哚乙酸)0.5
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10mg/L、IBA(吲哚丁酸)0.5
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10mg/L、L
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抗坏血酸50
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100mg/L、柠檬酸100
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150mg/L、苯甲酸钠0.5
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10g/L；所述液态基础培养基为B5培养基。在一些实施例中，诱导悬浮培养基是在B5液态基础培养基中添加IAA2.5mg/L、IBA2.5mg/L、L
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抗坏血酸100mg/L、柠檬酸150mg/L、苯甲酸钠2g/L。
[0020]作为本专利技术的一个实施方案，所述诱导培养条件为：22
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30℃、50
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100r/min振荡、黑暗培养10
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20d。在一些实施例中，诱导培养条件为：24.6℃、100r/min振荡、黑暗培养14d。
[0021]作为本专利技术的一个实施方案，所述悬浮培养是在液态基础培养基中添加IAA 0.5
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10mg/L、IBA0.5
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10mg/L、NAA0.5
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10mg/L、复硝酚钠0.5
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10mg/L、L
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抗坏血酸50
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100mg/L、柠檬酸100
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150mg/L、苯甲酸钠0.5
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10g/L；所述液态基础培养基为B5培养基。在一些实施例中，悬浮培养是在B5液态基础培养基中添加IAA2.9mg/L、IBA 2.6mg/L、NAA5.9mg/L、复硝酚钠5mg/L、L
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抗坏血酸100mg/L、柠檬酸150mg/L、苯甲酸钠2g/L。
[0022]作为本专利技术的一个实施方案，所述悬浮培养的条件为：22
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30℃、50
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200r/min振荡、黑暗培养10
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20天。在一些实施例中，悬浮培养的条件为：24.6℃、100r/min振荡、黑暗培养11天。
[0023]本专利技术的制备方法是基于培养步骤简单快捷，并且获得的培养液经过处理，可以再次利用，节约成本，减少了资源浪费，提高了资源利用率，绿色环保无污染。
[0024]如上所述的的制备方法制备获得的抗皱护肤溶液也属于本专利技术的保护范围。
[0025]本专利技术还提供一种抗皱护肤冻干品的制备方法，包括以下步骤：
[0026]步骤1、将上述所述抗皱护肤液冷冻干燥后获得粗冻干品，呈现浅白色；
[0027]步骤2、取上述粗冻干品，干燥去除挥发性物质，干燥后，得到浅黄色膏状物M；
[0028]步骤3，将所述浅黄色膏状物M复溶得到物质本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗皱护肤溶液的制备方法，包括如下步骤：S1、人参根预处理；S2、制备人参组织；S3、诱导培养：在诱导培养基中，将步骤S2获得的人参组织进行诱导培养，制得初始人参形成层分生组织细胞系；S4、悬浮培养：将步骤S3制备的初始人参形成层分生组织细胞系在悬浮培养基上将进行悬浮培养，过滤，收集滤液，获得所述抗皱护肤溶液。2.根据权利要求1所述的抗皱护肤液的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述诱导培养基是在液态基础培养基中添加IAA0.5
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10mg/L、IBA0.5
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10mg/L、L
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抗坏血酸50
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100mg/L、柠檬酸100
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150mg/L、苯甲酸钠0.5
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10g/L；所述液态基础培养基为B5。3.根据权利要求1所述的抗皱护肤液的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述诱导培养条件为：22
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30℃、50
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100r/min振荡、黑暗培养10
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20d。4.根据权利要求1所述的抗皱护肤液的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述悬浮培养是在液态基础培养基中添加IAA0.5
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10mg/L、IBA0.5
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10mg/L、NAA 0.5
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10mg/L、复硝酚钠0.5
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10mg/L、L
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抗坏血酸50

【专利技术属性】
技术研发人员：金司阳，高雅，王吉超，刘青，卢伊娜，陈其龙，伍承龙，张树义，
申请(专利权)人：上海珈凯生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：