百香果吲哚类生物碱的制备方法、组合物及在制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中的应用技术

本发明专利技术涉及百香果吲哚类生物碱的制备方法、组合物及在制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中的应用，涉及医药和保健品领域，从百香果中提取3个吲哚类生物碱，可抑制NKCC1的活性，对神经元氯离子内流产生抑制作用，避免了氯离子堆积，恢复神经元细胞内低氯离子水平而发挥抗抑郁效果，可用于制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中。物或保健产品中。物或保健产品中。

【技术实现步骤摘要】
百香果吲哚类生物碱的制备方法、组合物及在制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中的应用


[0001]本专利技术涉及医药和保健品领域，具体涉及百香果吲哚类生物碱的制备方法、组合物及在制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中的应用。

技术介绍

[0002]抑郁症(depression)被定义为一种情绪障碍，主要临床特征为连续且长期的心情低落，严重者可出现自杀念头和行为，已成为影响人类生活的严重精神疾病之一。科学家们也逐渐认识到，抑郁症并不是简单的心理问题，而是大脑发生了病理性改变。抑郁症传统理论认为，是由单胺类神经递质5
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羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺等减少引起。目前的抗抑郁药物大都基于这一点来进行研发，但这些药物起效的时间往往非常缓慢，需要几周甚至几个月，而且只对20％
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30％左右的病人有效。因此，开发快速有效，具有特异性和副作用小的新型抗抑郁药具有重要的科学意义和临床意义。
[0003]GABA
A
受体通道的氯离子通量方向取决于氯离子(Cl
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)的电化学梯度，并由两种跨膜氯转运体KCC2和NKCC1的表达和活性决定，维持着神经元的氯平衡稳态。已有研究证明，神经元NKCC1和/或KCC2的表达异常会导致神经元氯离子稳态失调，与抑郁症的发病机制有关。在中枢神经系统(CNS)中，NKCC1受体作为Cl
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的“输入器”，可以利用电化学梯度将Cl
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、K+和Na+运送到神经元内。相反，KCC2是Cl
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的“输出器”，它可以逆着浓度梯度从神经元中挤出氯离子。在大鼠的急性束缚应激和慢性束缚应激抑郁症模型中观察到KCC2的活性明显降低，导致神经元胞内氯离子外排受阻；而在慢性束缚应激抑郁症模型中，反复暴露于不可预测的轻度应激会增加大鼠神经元中NKCC1的活性，导致神经元胞内氯离子内流异常增加，氯离子堆积。NKCC1受体抑制剂布美他尼可抑制NKCC1活性来恢复神经元氯离子浓度，改善抑郁症小鼠模型的抑郁和焦虑行为，证明了NKCC1可作为抗抑郁疾病的有价值的靶点概念。由NKCC1和/或KCC2调控的神经元氯离子内外流功能可能成为治疗抑郁症的潜在新机制。
[0004]百香果含有丰富的营养成分和大量有益于人体健康的植物次生代谢产物，在许多西方国家中，虽然百香果传统用抗抑郁药物使用，但其活性物质基础迄今仍未清楚，因此，从百香果中挖掘具有抗抑郁的天然产物并加以开发利用，是百香果高值化利用亟需解决技术，也是为抑郁患者提供新的治疗方案。鉴于此，本专利技术提供百香果吲哚类生物碱的制备方法、组合物及在制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中的应用。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是提供百香果吲哚类生物碱的制备方法、组合物及在制备治疗抗抑郁症的药物或保健产品中的应用。
[0006]本专利技术为了解决上述技术问题，第一个目的是提供百香果吲哚类生物碱的制备方法，包括如下步骤：
[0007](1)取百香果的枝叶，将所述百香果的枝叶粉碎后加入醇类化合物进行浸提，将得
到的含有所述醇类化合物的提取液进行减压浓缩，得到所述醇类化合物的提取物；
[0008](2)将所述醇类化合物的提取物溶解于水中，依次采用乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将获得的所述正丁醇的萃取层进行减压浓缩，得到所述正丁醇的提取物；
[0009](3)将所述正丁醇的提取物进行MCI柱层析，采用水
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乙醇混合溶液进行梯度洗脱，收集含有百香果吲哚类生物碱的洗脱液；
[0010](4)将含有百香果吲哚类生物碱的洗脱液注入高效液相色谱柱进行分离，分别收集色谱峰的保留时间为21.5min的洗脱液A、33.2min的洗脱液B和37.3min的洗脱液C，将所述的洗脱液A进行浓缩干燥，得到如结构式Ⅰ的化合物Ⅰ，将所述的洗脱液B进行浓缩干燥，得到如结构式Ⅱ的化合物Ⅱ，将所述的洗脱液C进行浓缩干燥，得到如结构式Ⅲ的化合物Ⅲ；
[0011][0012]其中，如式Ⅰ的化合物Ⅰ的名称为(9S,11R)
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11
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甲基
‑9‑
羟基
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8,9,10,11
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四氢
‑
β
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咔啉，如式Ⅱ的化合物Ⅱ的名称为(9S,11S)
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11
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甲基
‑9‑
羟基
‑
8,9,10,11
‑
四氢
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β
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咔啉，和如式Ⅲ的化合物Ⅲ的名称为(9R,11R)
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11
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甲基
‑9‑
羟基
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8,9,10,11
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四氢
‑
β
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咔啉。
[0013]本专利技术的有益效果是：本专利技术从百香果的枝叶中提取3个吲哚生物碱化合物(化合物
Ⅰ‑Ⅲ
)；开展了百香果吲哚生物碱成分抗抑郁药效研究，结果显示，百香果吲哚生物碱成分有效促进新生SD大鼠原代小脑颗粒神经元氯离子外排，恢复神经元氯离子稳态，具有显著抗抑郁效果。表明本专利技术从百香果中得到的3个吲哚生物碱化合物在抗抑郁药品或保健产品方面具有广泛的应用前景。
[0014]在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。
[0015]进一步，步骤(1)中所述醇类化合物包括乙醇、甲醇、丙醇中的任意一种或至少两种的混合；
[0016]步骤(1)具体为：取百香果的枝叶，将所述百香果的枝叶粉碎后加入醇类化合物进行浸提，加入所述醇类化合物的体积为百香果的枝叶重量的1～3倍，优选的为2倍，所述浸提次数为2～5次，优选的为3次，每次所述浸提的时间为12～36h，优选的为24h，将得到的含有所述醇类化合物的提取液合并后进行减压浓缩，得到所述醇类化合物的提取物。
[0017]进一步，步骤(2)中，所述醇类化合物的提取物与所述水的重量体积比为1:1；所述醇类化合物的提取物与乙酸乙酯的重量体积比为1:1；所述醇类化合物的提取物与正丁醇的重量体积比为1:1。
[0018]进一步，步骤(3)具体为：将所述正丁醇的提取物进行MCI柱层析，采用体积比为10％～50％的水
‑
乙醇混合溶液依次进行梯度洗脱，收集体积比为30％的所述水
‑
乙醇混合溶液的洗脱液。
[0019]进一步，所述高效液相色谱进行分离的参数为：10mm
×
250mm的shim
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pack GIS C18色谱柱，所述C18色谱柱的填料的粒度为10μm，所述C18色谱柱的柱温为35℃，流动相为体积比12:88的乙腈和水，洗脱模式为等度洗脱。
[0020]上述各步骤中的减压浓缩、浓缩干燥为常规的操作，减压浓缩是使用抽真空的方式降低溶剂的沸腾温度使溶剂蒸发干燥，采用的设备主要包括浓缩罐、第一冷凝器、汽液分离器本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.百香果吲哚类生物碱的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取百香果的枝叶，将所述百香果的枝叶粉碎后加入醇类化合物进行浸提，将得到的含有所述醇类化合物的提取液进行减压浓缩，得到所述醇类化合物的提取物；(2)将所述醇类化合物的提取物溶解于水中，依次采用乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，将获得的所述正丁醇的萃取层进行减压浓缩，得到所述正丁醇的提取物；(3)将所述正丁醇的提取物进行MCI柱层析，采用水
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乙醇混合溶液进行梯度洗脱，收集含有百香果吲哚类生物碱的洗脱液；(4)将含有百香果吲哚类生物碱的洗脱液注入高效液相色谱柱进行分离，分别收集色谱峰的保留时间为21.5min的洗脱液A、33.2min的洗脱液B和37.3min的洗脱液C，将所述的洗脱液A进行浓缩干燥，得到如结构式Ⅰ的化合物Ⅰ，将所述的洗脱液B进行浓缩干燥，得到如结构式Ⅱ的化合物Ⅱ，将所述的洗脱液C进行浓缩干燥，得到如结构式Ⅲ的化合物Ⅲ；2.根据权利要求1所述百香果吲哚类生物碱的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述醇类化合物包括乙醇、甲醇、丙醇中的任意一种或至少两种的混合；步骤(1)具体为：取百香果的枝叶，将所述百香果的枝叶粉碎后加入醇类化合物进行浸提，加入所述醇类化合物的体积为百香果的枝叶重量的1～3倍，所述浸提次数为2～5次，每次所述浸提的时间为12～36h，将得到的含有所述醇类化合物的提取液合并后进行减压浓缩，得到所述醇类化合物的提取物。3.根据权利要求1所述百香果吲哚类生物碱的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述醇类化合物的提取物与所述水的重量体积比为1:1；所述醇类化合物的提取物与乙酸乙酯的重量体积比为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭兰芳，潘争红，宁德生，李连春，符毓夏，
申请(专利权)人：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所，
类型：发明
国别省市：