组合物在矫正基因突变中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物医学技术领域，特别涉及组合物在矫正基因突变中的应用。本发明专利技术利用非重组病毒载体CRISPR/Cas9基因编辑技术定向矫正视网膜色素变性患者来源诱导多能干细胞系PRPF6基因突变(c.G2699A)，通过药物抗性筛选和富集，成功获得基因矫正的诱导多能干细胞系。本发明专利技术获得的诱导多能干细胞系来源于患者，而且具有三胚层分化的能力，可为研究该疾病的发病机制和治疗提供了更加合适的模型。病的发病机制和治疗提供了更加合适的模型。

【技术实现步骤摘要】
组合物在矫正基因突变中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医学
，特别涉及组合物在矫正基因突变中的应用。

技术介绍

[0002]视网膜色素变性是一种常见的遗传性视网膜疾病，以进行性光感受器细胞和视网膜色素上皮退行性变为特征。据统计，视网膜色素变性在世界范围内发病率约为1/4000。通常儿童或青少年开始发病，典型临床表现为夜盲，伴有进行性视野缩小、眼底特征性骨细胞样色素沉着和视网膜电图异常或无波形，最终可导致失明。视网膜色素变性具有高度的遗传异质性，大多数呈单基因遗传，常见的遗传方式有常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传和X性连锁隐性遗传三种。
[0003]PRPF6基因位于20号染色体上，其突变导致的是一种常染色体显性遗传的视网膜色素变性疾病。PRPF6编码的剪接因子蛋白负责参与剪接体的形成以及前体mRNA的剪接过程，在体内基因表达的生理过程发挥着重要的作用。目前，关于PRPF6基础研究的报道较少，缺少合适的细胞或动物模型，且其致病机制尚未完全明确。
[0004]CRISPR/Cas9是一种使用gRNA序列和Cas9核酸内本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.sgRNA在如下方面中的应用：(I)、制备治疗PRPF6基因突变的产品；或(II)、制备矫正诱导多能干细胞PRPF6基因突变的产品；或(III)、制备治疗视网膜色素变性的产品；所述sgRNA具有：(1)、如SEQ ID No.5所示的核苷酸序列；或(2)、如(1)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或若干个碱基获得的核苷酸序列，且功能与(1)的相同或相似；或(3)、与如(1)或(2)所示的核苷酸序列至少有80％同源性的核苷酸序列；所述若干个为2个至5个。2.表达载体，其特征在于，包括载体骨架和sgRNA，以及可接受的基因元件；所述sgRNA具有：(1)、如SEQ ID No.5所示的核苷酸序列；或(2)、如(1)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或若干个碱基获得的核苷酸序列，且功能与(1)的相同或相似；或(3)、与如(1)或(2)所示的核苷酸序列至少有80％同源性的核苷酸序列；所述若干个为2个至5个；所述载体骨架具有：(4)、如SEQ ID No.7所示的核苷酸序列；或(5)、如(4)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列，且功能与(4)的相同或相似；或(6)、与如(4)或(5)所示的核苷酸序列至少有80％同源性的核苷酸序列；所述多个为2个至180个。3.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于，具有：(7)、如SEQ ID No.8所示的核苷酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁瑜钦，陈建苏，唐仕波，孙玺皓，
申请(专利权)人：湖南省爱尔眼科研究所，
类型：发明
国别省市：