FH定量试剂在三阴乳腺癌中的应用制造技术

本发明专利技术公开了FH定量试剂在三阴乳腺癌中的应用。发明专利技术人研究发现，用shRNA干扰FH的表达，或用FH的抑制剂处理三阴乳腺癌细胞株，在三维培养中能形成规则的圆球体，且乳腺分化的蛋白标志物GATA3、KRT8、KRT18、CDH1表达水平上调，VIM表达水平下调。临床数据分析表明FH在三阴乳腺癌中高表达，与较短的生存期相关，说明FH是导致三阴乳腺癌去分化的关键基因。因此，通过检测样本中FH的含量，可以较好地对三阴乳腺癌进行诊断或辅助诊断，也可以较好地确定三阴乳腺癌的预后。这一发明专利技术与其他肿瘤中结果相反；通过进一步结合GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM的表达量，可以更好地对三阴乳腺癌进行诊断或辅助诊断，也可以更好地确定三阴乳腺癌的预后。预后。

【技术实现步骤摘要】
FH定量试剂在三阴乳腺癌中的应用


[0001]本专利技术属于诊断领域，具体涉及FH定量试剂在三阴乳腺癌中的应用。

技术介绍

[0002]乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，2015年中国癌症统计数据显示，乳腺癌的发病率位居我国女性恶性肿瘤的首位，且有发病年龄年轻化的趋势，是造成45岁以下女性肿瘤患者死亡的首要原因。
[0003]三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)是一类高危乳腺癌，其雌激素受体(estrogen receptor, ER)、孕激素受体(progesterone, PR)和入表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor
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2.Her
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2)表达均为阴性，因而不能从针对激素受体的内分泌治疗和Her
‑
2的靶向治疗中获益。因此，尽管手术切除和靶向治疗为部分患者带来了较大的获益，但对于晚期或三阴类型乳腺癌患者仍缺乏有效的治疗方法。因此，寻找乳腺癌尤其是三阴乳腺癌的治疗靶点，探究新的治疗策略具有重要的理论意义和应用价值。
[0004]延胡索酸水合酶fumarate hydratase (FH)亦称延胡索酸酶。FH参与柠檬酸循环，研究表明FH缺失或突变与肾细胞癌、子宫多发性平滑肌瘤相关。在其他肿瘤中，FH未显示出有价值的应用或未见相关报导(Schmidt C, Sciacovelli M, Frezza C. Fumarate hydratase in cancer: A multifaceted tumour suppressor[C]//Seminars in cell & developmental biology. Academic Press, 2020, 98: 15
‑
25.、King A, Selak M A, Gottlieb E. Succinate dehydrogenase and fumarate hydratase: linking mitochondrial dysfunction and cancer[J]. Oncogene, 2006, 25(34): 4675
‑
4682.)。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供FH定量试剂在三阴乳腺癌中的应用。
[0006]本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供：FH蛋白或FH mRNA定量试剂在制备三阴乳腺癌诊断、辅助诊断或预后试剂中的应用。
[0007]在一些应用的实例中，FH蛋白定量试剂选自ELISA试剂、免疫组化分析试剂；FH mRNA定量试剂选自PCR试剂。
[0008]在一些应用的实例中，定量试剂的检测样本为肿瘤组织样本。
[0009]在一些应用的实例中，所述三阴乳腺癌为未分化的三阴乳腺癌。
[0010]本专利技术的第二个方面，提供：定量试剂组在在制备三阴乳腺癌诊断、辅助诊断或预后试剂中的应用，所述定量试剂组中含有如下定量试剂：
定量FH蛋白或FH mRNA定量试剂；以及定量GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM中至少一种的试剂。
[0011]在一些应用的实例中，所述定量试剂组含有定量GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM的试剂。
[0012]在一些应用的实例中，定量检测FH的引物为：上游引物F：5
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CCGCTGAAGTAAACCAGGATTATG
‑3’
下游引物R：5
’‑
ATCCAGTCTGCCATACCACGAG
‑3’
定量检测GATA3的引物为：上游引物F：5
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ACCACAACCACACTCTGGAGGA
‑3’
下游引物R：5
’‑
TCGGTTTCTGGTCTGGATGCCT
‑3’
定量检测KRT8的引物为：上游引物F：5
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CAGAAGTCCTACAAGGTGTCCA
‑3’
下游引物R：5
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CTCTGGTTGACCGTAACTGCG
‑3’
定量检测KRT18的引物为：上游引物F：5
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GGCATCCAGAACGAGAAGGAG
‑3’
下游引物R：5
’‑
ATTGTCCACAGTATTTGCGAAGA
‑3’
定量检测CDH1的引物为：上游引物F：5
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GCCTCCTGAAAAGAGAGTGGAAG
‑3’
下游引物R：5
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TGGCAGTGTCTCTCCAAATCCG
‑3’
定量检测VIM的引物为：上游引物F：5
’‑
AGGCAAAGCAGGAGTCCACTGA
‑3’
下游引物R：5
’‑
ATCTGGCGTTCCAGGGACTCAT
‑3’
。
[0013]本专利技术的第三个方面，提供：用于三阴乳腺癌诊断、辅助诊断或预后的系统，包括：定量装置，用于定于样本中FH蛋白或FH mRNA的表达量；分析装置，基于样本中FH蛋白或FH mRNA的表达量，确定三阴乳腺癌或其预后；结果输出装置，输出分析装置的分析结果。
[0014]在一些系统的实例中，所述定量装置还定量样本中GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM中至少一种的表达量，基于样本中FH蛋白或FH mRNA的表达量和样本中GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM中至少一种的表达量，确定三阴乳腺癌或其预后。
[0015]在一些系统的实例中，所述定量装置为PCR定量装置。
[0016]在一些系统的实例中，FH在三阴乳腺癌中高表达，确定为生存期较短。
[0017]本专利技术的有益效果是：专利技术人研究发现，用shRNA干扰FH的表达，或用FH的抑制剂（FHi）处理三阴乳腺癌细胞株，在三维培养中能形成规则的圆球体，且乳腺分化的蛋白标志物GATA3、KRT8、KRT18、CDH1表达水平上调，VIM表达水平下调。临床数据分析表明FH在三阴乳腺癌中高表达，与较短的生存期相关，说明FH是导致三阴乳腺癌去分化的关键基因。因此，通过检测样本中FH的含量，可以较好地对三阴乳腺癌进行诊断或辅助诊断，也可以较好地确定三阴乳腺癌的预后。这一专利技术与其他肿瘤中结果相反。
[0018]本专利技术的一些实例，通过进一步结合GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM的表达量，可以更好地对三阴乳腺癌进行诊断或辅助诊断，也可以更好地确定三阴乳腺癌的预后。
附图说明
[0019]图1是三维培养模型中rutecarpine诱导三阴乳腺癌细胞分化的实验结果。
[002本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.FH蛋白或FH mRNA定量试剂在制备三阴乳腺癌诊断、辅助诊断或预后试剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，FH蛋白定量试剂选自ELISA试剂、免疫组化分析试剂；FH mRNA定量试剂选自PCR试剂。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，定量试剂的检测样本为肿瘤组织样本。4.定量试剂组在在制备三阴乳腺癌诊断、辅助诊断或预后试剂中的应用，其特征在于，所述定量试剂组中含有如下定量试剂：定量FH蛋白或FH mRNA定量试剂；以及定量GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM中至少一种的试剂。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述定量试剂组含有定量GATA3、KRT8、KRT18、CDH1和VIM的试剂。6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，定量检测FH的引物为：上游引物F：5
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CCGCTGAAGTAAACCAGGATTATG
‑3’
下游引物R：5
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ATCCAGTCTGCCATACCACGAG
‑3’
定量检测GATA3的引物为：上游引物F：5
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ACCACAACCACACTCTGGAGGA
‑3’
下游引物R：5
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TCGGTTTCTGGTCTGGATGCCT
‑3’
定量检测KRT8的引物为：上游引物F：5
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CAGAAGTCCTACAAGGTGTCCA
‑3’
下游引物R：5
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CTCTGGTTGACCGTAACTGCG
‑3’
定...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书六页序列表电子公布附图三页，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，中山大学肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：