一种枝状枝孢菌及其在制备防治植物病原线虫药剂中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种枝状枝孢菌及其在制备防治植物病原线虫药剂中的应用，所述枝状枝孢菌的保藏编号为CCTCC NO：M20211658。本发明专利技术提供的枝状枝孢菌一方面可以高效防治植物线虫病害，另一方面还可促进植株根系株高生长。同时本发明专利技术对枝状枝孢菌的发酵技术进行了优化，筛选出了一种其代谢产物活性最高发酵培养基。此外，发酵技术简单，大幅降低生产设备投入和生产成本。本发明专利技术提供的防治线虫病害的制剂为生物制剂，其使用安全，不会产生药害及二次污染。会产生药害及二次污染。

【技术实现步骤摘要】
一种枝状枝孢菌及其在制备防治植物病原线虫药剂中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种枝状枝孢菌及其在制备防治植物病原线虫药剂中的应用。

技术介绍

[0002]植物病原线虫的侵染可以导致植物的产量和质量下降，全世界由于线虫的危害造成农林业生产的损失每年高达1250亿美元，严重影响农林生产安全。目前化学杀线剂仍然是线虫防控的重要组成部分，全球市场每年的杀线剂有效成分销量达250000t，其中美国和西欧的用量分别接近84000t和48000t。然而随着涕灭威、溴甲烷等常用杀线剂陆续被禁止或限制使用，亟需更多新型安全的杀线虫剂。来源于植物提取物和细菌、真菌的天然杀线剂越来越引起人们的兴趣和关注。枝孢霉属真菌隶属于子囊菌门座囊菌纲煤炱目枝孢霉科枝孢霉属，其中枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)对白蝇、蚜虫、斜纹夜蛾、叶螨等害虫都具有较好的生防效果。另有研究表明枝状枝孢菌Cladosporium cladosporioides C24G菌株分生孢子悬浮液对稻瘟病有一定的防治效果。此外，枝孢霉还可显著促进丹参的生长，并对田栽丹参的丹酚酸有效成分同样具有显著影响。Hirota等(1985)从枝孢霉属真菌Cladospori um cladosporioides的培养滤液中分离到了2种新的化合物cladospolide A和cladospolide B，经试验表明cladospolide A可抑制生菜幼苗根系生长，而cladospolide B则可促进生菜幼苗根系生长。
[0003]研究者从枝孢霉属中发现了许多结构新颖的生物活性物质，根据其化学结构的不同可大致分为：Tetramic acid衍生物、喹唑啉衍生物、环肽衍生物、Cladosporols及其衍生物、Viriditoxins及其衍生物、Cladochromes及其衍生物、萘醌衍生物、蒽醌衍生物、甾体类、苯并呋喃类、香豆素类、脂肪酸及其衍生物类、大环内酯类、酚酮类、其他类15大类。这些化合物在抗流感病毒、抑菌活性、抗炎、抗癌、抗氧化活性方面具有突出表现。Liu等从枝孢霉属真菌Cladosporium cladosporioides中分离到了3种化合物cladosporinone(1)、viriditoxin(2)以及两种viriditoxin衍生物(3
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4)，通过对小鼠淋巴瘤细胞L5178Y毒性测定，表明对该细胞株的细胞毒性最强的化合物为viriditoxin(2)。但是，枝孢霉属在防治线虫方面的作用鲜有报道。
[0004]本专利技术首次提供了一种以枝状枝孢霉为主要成分的生防制剂。该制剂可高效防治植物病原线虫引起的病害，并促进植物的生长，具有广阔的应用前景。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供了一株分离的枝状枝孢菌，所述枝状枝孢菌的保藏编号为CCT CC NO：M20211658。
[0006]本专利技术的另一个目的在于提供了枝状枝孢菌在番茄栽培中的应用。
[0007]为了达到上述目的，本专利技术采取以下技术措施：
[0008]枝状枝孢菌的获得：
[0009]由本实验室在污染的金龟子绿僵菌培养平板上分离获得，在PDA平板上连续培养3代分离纯化菌落，将分离到的菌株命名为Ch1、Ch2、Ch3、Ch4。倒置光学显微镜观察其形态特征及孢子特征，再通过28S r ITS、Actin、GAPDH和β
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tubulin引物扩增测序比对，对其进行菌种鉴定。4株菌株均被鉴定枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)。其中有一个杀线虫效果最好的菌株已于2021年12月22日送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名：枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioide)Ch 4，保藏编号：CCTCC NO：M20211658，地址：中国武汉武汉大学。
[0010]上述的枝状枝孢菌为枝孢霉属真菌，分生孢子呈椭圆形或菱形，簇生或单生，且分生孢子顶端有一明显凸起，菌丝有隔，分生孢子梗直立，在中间形成分枝，生长温度为24
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25℃。
[0011]本专利技术的保护范围还包括：
[0012]上述枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioide)Ch 4在防治番茄根结线虫病中的应用。
[0013]本专利技术的枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioide)Ch 4还可用于制备成线虫杀虫剂。
[0014]本专利技术的枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioide)Ch 4还可制备成番茄促生长剂。
[0015]以上所述的应用中，优选的，所述的枝状枝孢菌是用MEA培养基发酵得到。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：
[0017](1)本专利技术提供的枝状枝孢菌一方面可以高效防治植物线虫病害，另一方面还可促进植株根系株高生长。
[0018](2)本专利技术对枝状枝孢菌的发酵技术进行了优化，提供了一种其代谢产物活性最高的培养基。此外，发酵技术简单，大幅降低生产设备投入和生产成本。
[0019](3)本专利技术提供的防治线虫病害的制剂为生物制剂，其使用安全，不会产生药害及二次污染。
附图说明
[0020]图1为不同发酵液浓度的不同枝状枝孢菌对番茄生长的影响；
[0021]A中a
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c:不同发酵液浓度的不同枝状枝孢菌对番茄地上部的影响；d
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f:不同发酵液浓度的不同枝状枝孢菌对番茄根部的影响；
[0022]B中a:Ch 1菌株不同浓度发酵液处理下的根鲜重及地上部鲜重；b:Ch 2菌株不同浓度发酵液处理下的根鲜重及地上部鲜重；c:Ch 3菌株不同浓度发酵液处理下的根鲜重及地上部鲜重；d：Ch 4菌株不同浓度发酵液处理下的根鲜重及地上部鲜重；e:Ch 1菌株不同浓度发酵液处理下的根长及株高；f:Ch 2菌株不同浓度发酵液处理下的根长及株高；g:Ch 3菌株不同浓度发酵液处理下的根长及株高；h:Ch 4菌株不同浓度发酵液处理下的根长及株高；
[0023]柱状图上所标字母相同表示差异不显著(LSD,P<0.05)，标尺＝5cm。
[0024]图2为不同分生孢子悬浮液浓度的不同枝状枝孢菌对番茄生长的影响；
[0025]A中a
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c:不同分生孢子悬浮液浓度的不同枝状枝孢菌对番茄地上部的影响；d
‑
f:
不同分生孢子悬浮液浓度的不同枝状枝孢菌对番茄根部的影响；
[0026]B中a:Ch1菌株不同浓度分生孢子悬浮液处理下的根鲜重和地上部鲜重；b:Ch 2菌株不同浓度分生孢子悬浮液处理下的根鲜重和地上部鲜重；c:Ch 3菌株不同浓度分生孢子悬浮液处理下的根鲜重和地上部鲜重；d:Ch 4菌株不同浓度分生孢子悬浮液处理下的根鲜重和地上部鲜重e:Ch 1菌株不同浓度分生孢子悬浮液处理下的株本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株分离的枝状枝孢菌（Cladosporium cladosporioide），所述枝状枝孢菌的保藏编号为CCTCC NO：M20211658。2.权利要求1所述的枝状枝孢菌在防治番茄根结线虫病中的应用。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖炎农，李梦欢，胡营营，肖雪琼，王高峰，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：