一种处理低碳氮比微污染水体的好氧反硝化真菌新方法技术

本发明专利技术涉及微生物筛选技术领域，尤其为一种处理低碳氮比微污染水体的好氧反硝化真菌新方法，包括一株具有好氧反硝化能力的真菌，其生物学特征在于：该真菌为丝状霉菌，NCBI登录号为：OK560676，命名为：Penicillium brasiliensis，真菌的筛选方法是在pH值为5.6、30℃恒温黑暗培养的条件下，经过水样过膜富集和平板分离培养筛选获得，其中，真菌富集方法：使用真空抽滤机，将100mL水体通过0.22μm的醋酸纤维滤膜上进行真菌富集，培养周期为3天，温度为30℃，真菌的筛选方法是在pH值为5.6、30℃恒温黑暗培养的条件下，经过水样过膜富集和平板分离培养筛选获得；本发明专利技术实现了对硝氮有很好的的去除效果，而且解决了好氧反硝化真菌筛选困难，并且提供了筛选和鉴定的方法。并且提供了筛选和鉴定的方法。并且提供了筛选和鉴定的方法。

【技术实现步骤摘要】
KH2PO4、0.5g MgSO4、0.025g C20H2Cl4I4Na2O5、0.002g C6H4Cl2N2O2、0.1g C11H12Cl2N2O5、15g琼脂，超纯水进行定容，将溶液转移至1000mL锥形瓶后调节pH至5.6，并于121℃高温灭菌30分钟；
[0013]S5、真菌分离纯化方法：该方法采用将接种环经火焰灭菌并冷却后，蘸取附着在滤膜上的真菌群落，进行“十字划线法”进行平板分离培养，划线完毕后置温箱30℃中培养2～5天，如有杂菌出现，有时需反复多次划线；
[0014]S6、对反硝化培养基中总氮、硝氮、亚硝氮及氨氮进行检测方法，总氮检测方法为碱性过硫酸钾紫外分光光度法，硝氮检测方法为紫外分光光度法、亚硝氮检测方法为N
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(1
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萘基)
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乙二胺光度法、氨氮检测方法为纳氏试剂分光光度法，该方法采用了ITS鉴定方法，其鉴定方法通过PCR的扩增程序，该方法为94℃预变性5min、94℃变形45s、55℃退火45s、72℃延伸1min且30个循环、72℃修复延伸10min、4℃终止反应，而该鉴定方法中的PC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种处理低碳氮比微污染水体的好氧反硝化真菌，包括一株具有好氧反硝化能力的真菌，其生物学特征在于：该真菌为丝状霉菌，NCBI登录号为：OK560676，命名为：Penicillium brasiliensis。2.根据权利要求1所述的一种处理低碳氮比微污染水体的好氧反硝化真菌新方法，具体包括以下步骤：S1、真菌的筛选方法是在pH值为5.6、30℃恒温黑暗培养的条件下，经过水样过膜富集和平板分离培养筛选获得；其中，真菌富集方法：使用真空抽滤机，将100mL水体通过0.22μm的醋酸纤维滤膜上进行真菌富集，其后将富集的滤膜贴附在真菌固体平板上，培养周期为3天，温度为30℃；S2、反硝化培养基的制备：该方法是在25℃下，将4.130g C6H12O6、0.108g KNO3、0.1g of MgSO4、1.5g of KH2PO4、5.0g of NaHPO4
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7H2O以及2mL的微量元素溶液使用超纯水溶解完全后，使用1000mL容量瓶进行定容，将溶液转移至1000mL锥形瓶后调节pH至7.2，并于121℃高温灭菌30分钟；S3、微量元素溶液的制备：该方法为在1000mL的容量瓶中加入4.4mg ZnSO4、144mg EDTA
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2Na、10.2mg MnCl 2
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4H2O、11mg CaCl 2、10mg FeSO4
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7H2O、3.2mg CuSO4
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5H2O、2.2mg(NH4)6Mo7O24
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4H2O、3.2mg CoCl 2
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6H2O,超纯水定容至1L，4℃冷藏；S4、富集培养制备：是在1000mL的容量瓶中加入5g蛋白胨、10g C6H12O6、1g KH2PO4、0.5g MgSO4、0.025g C20H2Cl 4I4Na2O5、0.002g C6H4Cl ...

【专利技术属性】
技术研发人员：张海涵，马奔，李海云，刘祥，潘思璇，
申请(专利权)人：西安建筑科技大学，
类型：发明
国别省市：