一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒，涉及cfDNA检测技术领域，包括外盒体和安置组件，所述外盒体的上端中部设置有提手，且外盒体的中部设置有用于试剂放置的收纳组件，用于调节更换的所述安置组件连接于收纳组件的内侧，且安置组件包括安置内框、安置导轨、安置滑块和定位螺栓。本发明专利技术通过多个组件之间的相互配合，有效确保试剂在实际存放及携带过程中的安全性，避免出现破损泄漏的情况，便于实际的试管尺寸形状进行对应结构的调节工作，从而适用于不同规格尺寸的试管，同时具有很好的防护效果，避免试剂盒在实际使用及携带过程中受到外力的碰撞，出现变形损坏导致试剂外漏的情况，同时便于对试剂进行取拿及存放，便于实际使用。便于实际使用。便于实际使用。

【技术实现步骤摘要】
一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及cfDNA检测
，具体为一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤，俗称癌症。由于机体细胞失去正常调控，过度增殖而失去正常调控，过度增殖而引起的疾病，cfDNA已成为一种有前景的肿瘤生物标志物，具有巨大的早期诊断潜力。
[0003]如申请号：CN114045342A，本专利技术公开了一种新型cfDNA甲基化突变的检测方法及试剂盒，包括：提取全血游离DNA，经过末端修复、末端加“A”、连接illumina测序平台专用index测序接头，构建cfDNA基因文库；(2)将步骤(1)构建的cfDNA基因文库与提前构建好的filler DNA混合，获得cfDNA基因文库与filler DNA混合物，保证起始投入量达到100ng以上。本专利技术新型cfDNA甲基化突变的检测方法及试剂盒，避免了重亚硫酸盐处理对DNA造成的降解损失，该专利技术不同于传统甲基化测序法，不依赖于重亚硫酸盐，核心为甲基化免疫沉淀法，使用5
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mc甲基化抗体特异性抓取DNA甲基化区域片段，使样本中所有的甲基化变异DNA均沉淀富集。
[0004]类似于上述申请的新型cfDNA甲基化突变的检测方法及试剂盒目前还存在以下不足：
[0005]现有检测试剂盒不便于实际的试剂瓶尺寸进行对应的调节工作，实际使用范围受到限制。
[0006]于是，有鉴于此，针对现有的结构及缺失予以研究改良，提出一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒，以期达到更具有更加实用价值性的目的。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒，包括外盒体和安置组件，所述外盒体的上端中部设置有提手，且外盒体的中部设置有用于试剂放置的收纳组件，用于调节更换的所述安置组件连接于收纳组件的内侧，且安置组件包括安置内框、安置导轨、安置滑块和定位螺栓，所述安置内框的四角设置有安置导轨，且安置导轨远离安置内框的一侧连接有安置滑块，所述安置滑块的内侧穿设有定位螺栓，所述安置内框的上端设置有用于试剂定位的定位组件，所述外盒体的外部两侧设置有用于防碰撞的防护组件。
[0009]进一步的，所述收纳组件包括收纳仓、紧固扣、连接导轨、连接滑块、承载框、密封板和橡胶圈，且收纳仓的外部两侧设置有紧固扣，所述收纳仓的内部两侧设置有连接导轨，且连接导轨远离收纳仓一侧连接有连接滑块，所述连接滑块远离连接导轨的一侧衔接有承
载框，且承载框的前端设置有密封板，所述密封板的内侧边缘处设置有橡胶圈。
[0010]进一步的，所述密封板与承载框固定连接，且橡胶圈与密封板粘接连接，并且承载框通过连接滑块、连接导轨与收纳仓之间滑动连接。
[0011]进一步的，所述安置导轨等距分布于安置内框的四角，且安置导轨的外侧贴合于安置滑块的内侧。
[0012]进一步的，所述定位组件包括定位槽体、硅胶垫、定夹块和橡胶层，且定位槽体的内侧底部中心位置设置有硅胶垫，所述定位槽体的内壁一侧设置有定夹块，且定夹块的内壁设置有橡胶层。
[0013]进一步的，所述定位组件还包括限位槽体、定位弹簧、连接杆和动夹块，所述定位槽体的外部一侧连接有限位槽体，且限位槽体的内部连接有定位弹簧，所述定位弹簧远离限位槽体的一端连接有连接杆，且连接杆远离定位弹簧的一端连接有动夹块。
[0014]进一步的，所述连接杆的外侧直径尺寸与限位槽体的内侧直径尺寸相吻合，且动夹块通过连接杆、定位弹簧与限位槽体之间弹性连接。
[0015]进一步的，所述防护组件包括衔接底块、限位框、限位导轨、限位滑块、防护弹簧、缓冲侧板和硅胶层，且衔接底块的两端设置有限位框，所述限位框的内部一侧设置有限位导轨，且限位导轨的外侧连接有限位滑块，所述限位滑块的一侧连接有防护弹簧，且限位滑块远离限位导轨一侧连接有缓冲侧板，所述缓冲侧板的外表面包裹有硅胶层。
[0016]进一步的，所述缓冲侧板通过防护弹簧与限位框之间弹性连接，且硅胶层与缓冲侧板呈半包围结构。
[0017]进一步的，所述检测方法包括以下步骤：
[0018]S1、预处理
[0019]首先拉动承载框取出采集的cfDNA，然后将cfDNA用重亚硫酸盐处理，这样未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶，而甲基化的不变，随后行引物特异性的PCR，引物末端均设计至检测位点结束，两对引物分别只能与重亚硫酸盐处理后的序列互补配对，即一对结合处理后的甲基化DNA链，另一对结合处理后的非甲基化DNA链；
[0020]S2、甲基化检测
[0021]然后检测MSP扩增产物，用针对处理后甲基化cfDNA链的引物能扩增出片段，则说明该被检测的位点存在甲基化，若用针对处理后的非甲基化cfDNA链的引物扩增出片段，则说明被检测的位点不存在甲基化。
[0022]本专利技术提供了一种cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒，具备以下有益效果：该cfDNA甲基化突变的检测方法及检测试剂盒，通过多个组件之间的相互配合，有效确保试剂在实际存放及携带过程中的安全性，避免出现破损泄漏的情况，便于实际的试管尺寸形状进行对应结构的调节工作，从而适用于不同规格尺寸的试管，同时具有很好的防护效果，避免试剂盒在实际使用及携带过程中受到外力的碰撞，出现变形损坏导致试剂外漏的情况，同时便于对试剂进行取拿及存放，便于实际使用；
[0023]1、本专利技术通过设置于外盒体内侧中部的收纳组件，便于对试剂瓶进行存放收纳，设置在收纳仓内壁两侧的连接导轨，配合设置于承载框外部两侧的连接滑块，使得承载框可以于收纳仓内部进行Y轴直线位置上的前后滑动，从而便于将试剂瓶放置于定位组件内部进行定位放置，便于对试剂瓶的取拿及存放，配合设置于密封板内侧边缘处的橡胶圈，有
效保证承载框通过密封板及紧固扣与收纳仓之间闭合的紧密性，避免试剂瓶出现污染的情况。
[0024]2、本专利技术通过设置于承载框内侧的安置组件，便于根据实际试剂瓶的尺寸及形状进行对应结构的调节工作，设置在安置内框四角的安置导轨，配合设置于承载框内部四角的安置滑块，使得安置内框可以于承载框内部进行竖直直线位置上的上下滑动，从而便于根据实际的试剂瓶尺寸对安置内框进行对应更换，更换不同规格的定位组件实现对不同尺寸试剂瓶限位固定的效果，配合设置有的定位螺栓加以固定，确保安置内框实际使用过程中的稳定性。
[0025]3、本专利技术通过设置在安置内框上端的定位组件，便于对试剂瓶进行定位固定，通过插拔式的结构，便于取拿的同时保证试剂瓶放置的稳定性，连接于连接杆一端的动夹块，配合连接杆另一端连接有的定位弹簧，使得动夹块与限位槽体弹性连接，从而实现对插入限位槽体内部的试剂瓶进行定位夹紧，配合设置于动夹块及定夹块内壁的橡胶层，进一步保证对试剂瓶的实际夹持效果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种cfDNA甲基化突变的检测试剂盒，其特征在于，包括外盒体(1)和安置组件(4)，所述外盒体(1)的上端中部设置有提手(2)，且外盒体(1)的中部设置有用于试剂放置的收纳组件(3)，用于调节更换的所述安置组件(4)连接于收纳组件(3)的内侧，且安置组件(4)包括安置内框(401)、安置导轨(402)、安置滑块(403)和定位螺栓(404)，所述安置内框(401)的四角设置有安置导轨(402)，且安置导轨(402)远离安置内框(401)的一侧连接有安置滑块(403)，所述安置滑块(403)的内侧穿设有定位螺栓(404)，所述安置内框(401)的上端设置有用于试剂定位的定位组件(5)，所述外盒体(1)的外部两侧设置有用于防碰撞的防护组件(6)。2.根据权利要求1所述的一种cfDNA甲基化突变的检测试剂盒，其特征在于，所述收纳组件(3)包括收纳仓(301)、紧固扣(302)、连接导轨(303)、连接滑块(304)、承载框(305)、密封板(306)和橡胶圈(307)，且收纳仓(301)的外部两侧设置有紧固扣(302)，所述收纳仓(301)的内部两侧设置有连接导轨(303)，且连接导轨(303)远离收纳仓(301)一侧连接有连接滑块(304)，所述连接滑块(304)远离连接导轨(303)的一侧衔接有承载框(305)，且承载框(305)的前端设置有密封板(306)，所述密封板(306)的内侧边缘处设置有橡胶圈(307)。3.根据权利要求2所述的一种cfDNA甲基化突变的检测试剂盒，其特征在于，所述密封板(306)与承载框(305)固定连接，且橡胶圈(307)与密封板(306)粘接连接，并且承载框(305)通过连接滑块(304)、连接导轨(303)与收纳仓(301)之间滑动连接。4.根据权利要求1所述的一种cfDNA甲基化突变的检测试剂盒，其特征在于，所述安置导轨(402)等距分布于安置内框(401)的四角，且安置导轨(402)的外侧贴合于安置滑块(403)的内侧。5.根据权利要求1所述的一种cfDNA甲基化突变的检测试剂盒，其特征在于，所述定位组件(5)包括定位槽体(501)、硅胶垫(502)、定夹块(503)和橡胶层(504)，且定位槽体(501)的内侧底部中心位置设置有硅胶垫(502)，所述定位槽体(501)的内壁一侧设置有定夹块(503)，且定夹块(503)的内壁设置有橡胶层(504)。6.根据权利要求5所述的一种cfDNA甲基化突变的检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：王思振，
申请(专利权)人：无锡泛生子生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：