载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒及其制备方法和应用，所述脂质体纳米粒包括脂质体载药内核、包裹在内核表面的巨噬细胞膜以及在巨噬细胞膜上修饰有载脂蛋白A

【技术实现步骤摘要】
载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于药物制剂领域，涉及一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]非酒精性脂肪肝病(Non
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alcohol fatty liver disease，NAFLD)是指过多的脂肪以甘油三酯的形式在肝脏中堆积，患者通常存在营养过剩、肥胖和代谢综合征相关表现。近年来，因全球肥胖人口激增，导致非酒精性脂肪肝的发病率也越来越高，成了当前全球最常见的肝病之一，如果任其发展，就有可能加重为非酒精性脂肪肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis，NASH)，进而发展成为肝硬化、肝癌等末期肝病。NAFLD患者的生活方式大都不健康，存在膳食结构不合理、生活不规律和缺乏运动等问题，所以他们中的绝大部分人都属于超重或肥胖人群。目前临床上针对NAFLD的治疗主要是对其进行饮食干预，提倡少吃多动，但患者往往依从性较差，因此，研究能够用于非酒精性脂肪肝治疗的药物是很有必要的。
[0003]白藜芦醇(Resveratrol，Res)是一种主要存在于红葡萄和坚果中的活性多酚，它不仅可通过神经网络激活小鼠十二指肠SIRT1逆转胰岛素抵抗，还可以激活烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)，增强胰岛素敏感性，减少肝来源葡萄糖的产生。同时，Res还能够抑制对NF
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κB和MAPK通路，下调LPS诱导的炎症因子(IL
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1β、IL
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4、IL<br/>‑
6、TNF
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α、IFN
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γ等)的表达水平，发挥抗炎作用，改善脂肪肝的炎症反应，从而达到治疗NAFLD的目的。但白藜芦醇难溶于水、稳定性较差、在体内的生物利用度较低，很大程度地限制了白藜芦醇的应用。
[0004]现阶段治疗非酒精性脂肪肝的纳米制剂的靶向性较差，不能有效将治疗药物递送至肝脏组织，并在靶点实现药物缓慢释放，同时其在体内容易被免疫系统识别并清除，因此其体循环时间较短，生物利用度较低，很大程度上限制了纳米制剂对非酒精性脂肪肝的治疗效果。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒。
[0006]本专利技术还要解决的技术问题是提供了一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒的制备方法。
[0007]本专利技术最后要解决的技术问题是提供了一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒用于制备治疗非酒精性脂肪肝中的应用。
[0008]技术方案：本专利技术提供了一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒，所述脂质体纳米粒包括脂质体载药内核、包裹在内核表面的巨噬细胞膜以及在巨噬细胞膜上修饰有载脂蛋白A
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1，所述脂质体载药内核是利用脂质体包埋白藜芦醇和聚二甲双胍获得。
[0009]其中，所述聚二甲双胍的制备方法包括如下步骤：将盐酸化高分子固体与二氰二胺混合，加入盐酸溶液，加热条件下进行反应，反应结束后经透析、冻干得到；作为优选，所述盐酸化高分子固体是将含有伯氨基或仲胺基的高分子与盐酸搅拌混合，冻干后得到；作为优选，所述含有伯氨基或仲胺基的高分子包括壳聚糖、线性聚乙烯亚胺、聚赖氨酸、聚乙烯胺或聚烯丙胺中的一种。
[0010]其中，所述白藜芦醇和聚二甲双胍的质量比为16∶1～10∶1。
[0011]本
技术实现思路
还包括所述的载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
[0012]1)聚二甲双胍的合成：将含有伯氨基或仲胺基的高分子与盐酸搅拌混合，冻干后得盐酸化高分子固体，取盐酸化高分子固体与二氰二胺混合，加入盐酸溶液，加热条件下进行反应，反应结束后经透析、冻干得到聚二甲双胍；
[0013]2)脂质体载药内核的制备：将磷脂、胆固醇和白藜芦醇溶解在有机溶剂中，减压旋蒸至形成均匀薄膜，真空干燥后加入聚二甲双胍，用纯水溶解后水化，经探头超声分散后将所纳米混悬液用水系微孔滤膜过滤，得到脂质体载药内核；
[0014]3)细胞膜仿生脂质体载药纳米粒的制备：混合脂质体载药内核与巨噬细胞膜，超声混匀后用脂质体挤出仪经进行反复挤出，使其依次通过孔径由大到小的聚碳酸脂膜，经离心后得细胞膜仿生脂质体载药纳米粒；
[0015]4)载脂蛋白A
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1修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒的制备：将载脂蛋白A
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1加入到细胞膜仿生脂质体载药纳米粒混悬液中，搅拌使二者充分混合均匀，透析去除游离的载脂蛋白A
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1，得载脂蛋白A
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1修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒。
[0016]其中，步骤1)中所述含有伯氨基或仲胺基的高分子包括壳聚糖、线性聚乙烯亚胺、聚赖氨酸、聚乙烯胺或聚烯丙胺中的一种；所述盐酸化高分子固体与二氰二胺的质量比为1∶10～1∶20。
[0017]其中，步骤2)中所述磷脂为脑磷脂、肌醇磷脂、大豆磷脂和磷脂酸中的一种或由多种磷脂混合而成；所述有机溶剂为无水乙醇、甲醇、二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或由多种有机溶剂混合而成。
[0018]其中，步骤2)中所述磷脂与胆固醇的质量比为10∶1～4∶1；所述白藜芦醇和聚二甲双胍的质量比为16∶1～10∶1；所述磷脂与两药(Res+PM)质量之和的比例为2∶1～10∶1。
[0019]本
技术实现思路
还包括所述的载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒在制备治疗非酒精性脂肪肝的药物中的应用。
[0020]本专利技术在脂质体包埋药物形成载药内核的基础上，利用巨噬细胞膜对其包裹形成仿生外膜，最后利用apoA
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1进行修饰，由此构建一种用于非酒精性脂肪肝治疗的仿生靶向纳米粒。本专利技术构建了一种靶向修饰细胞膜仿生脂质体载药纳米粒，该纳米粒静脉给药后，能够有效避免被机体的免疫系统识别清除，进而显著延长药物的体内循环时间；利用apoA
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1的肝脏靶向性和巨噬细胞膜的炎症趋向性能够实现该递药系统在肝脏部位的定向累积，从而减少其对其它正常组织的毒副作用；脂质体载药内核的安全性和运载性良好，能够分别将水溶性药物和脂溶性药物包载在其亲水核心和疏水双分子层中，实现溶水性药物和脂溶性药物的联合给药；白藜芦醇与聚二甲双胍可增加胰岛素敏感性、改善肝损伤、减轻炎症和代谢紊乱、减少脂质累积，机制协同治疗非酒精性脂肪肝。
[0021]其中，聚二甲双胍(PolyMet，PM)不仅具有和二甲双胍相似的药理活性，可以通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)依赖和AMPK不依赖途径抑制肝葡萄糖产生，还具有细胞毒性低、生物相容性好的优点，能够改善胰岛素敏感性和葡萄糖耐量，降低血清ALT和AST水平，改善肝损伤。
[0022]该专利技术中所采用的巨噬细胞是体内一种重要的免疫细胞，与多种炎症相关疾病的发生和发展过程都息息相关。提取巨噬细胞的细胞膜并将其整合至纳米递药系统表面，制备成巨噬细胞膜仿生本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒，其特征在于，所述脂质体纳米粒包括脂质体载药内核、包裹在内核表面的巨噬细胞膜以及在巨噬细胞膜上修饰有载脂蛋白A
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1，所述脂质体载药内核是利用脂质体包埋白藜芦醇和聚二甲双胍获得。2.根据权利要求1所述的载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒，其特征在于，所述聚二甲双胍的制备方法包括如下步骤：将盐酸化高分子固体与二氰二胺混合，加入盐酸溶液，加热条件下进行反应，反应结束后经透析、冻干得到；作为优选，所述盐酸化高分子固体是将含有伯氨基或仲胺基的高分子与盐酸搅拌混合，冻干后得到。3.根据权利要求2所述的载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒，其特征在于，所述含有伯氨基或仲胺基的高分子包括壳聚糖、线性聚乙烯亚胺、聚赖氨酸、聚乙烯胺或聚丙烯胺中的一种。4.根据权利要求1所述的载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒，其特征在于，所述白藜芦醇和聚二甲双胍的质量比为16∶1～10∶1。5.权利要求1～4任一项所述的载脂蛋白修饰的细胞膜仿生脂质体载药纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)聚二甲双胍的合成：将含有伯氨基或仲胺基的高分子与盐酸搅拌混合，冻干后得盐酸化高分子固体，取盐酸化高分子固体与二氰二胺混合，加入盐酸溶液，加热条件下进行反应，反应结束后经透析、冻干得到聚二甲双胍；2)脂质体载药内核的制备：将磷脂、胆固醇和白藜芦醇溶解在有机溶剂中，减压旋蒸至形成均匀薄膜，真空干燥后加入聚二甲双胍，用纯水溶解后水化，经探头超声分散后将所纳米混悬液用水系微孔滤膜过滤，得到脂质体载药内核；3)细胞膜仿生脂质体载药纳米粒的制备：混合脂质体载药内核与巨噬细胞膜，...

【专利技术属性】
技术研发人员：王伟，杨菁，肖恰恰，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：