检测食管癌的试剂及试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及医学生物检测技术领域，提供了检测基因甲基化水平的PCR引物对及探针组合，还提供了包含该组合的食管癌诊断试剂及试剂盒。经实验验证，本发明专利技术的方案区分早期食管腺癌、进展期食管腺癌、早期食管鳞癌、进展期食管鳞癌的灵敏度分别可达到59.38％、77.78％、80％和90％，其在健康人群中的特异性可达到94％。因此，本发明专利技术提供的引物对及探针组合、试剂或试剂盒在食管癌诊断中具有良好的灵敏度和特异性，更重要的是，其提高了早期食管癌的诊断率，且便捷、快速、无创，具有广阔的市场前景。景。

【技术实现步骤摘要】
NO.1和2所示，第一探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；第二引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.10和11所示，第二探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。
[0008]第一引物对和第一探针用于检测KCNA3基因的甲基化水平，第二引物对和第二探针用于检测OTOP2基因的甲基化水平。
[0009]优选的，探针的5'端含有荧光报告基团如FAM、HEX、VIC、CY5、ROX、TexsaRed、JOE及Quasar 705中任意一种，3'端含有荧光淬灭基团，如MGB、BHQ
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1、BHQ
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2、BHQ
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3中的任意一种。
[0010]针对KCNA3基因，共设计了三种引物对及探针的核苷酸组合1～3，分别用来检测KCNA3基因的区域1(位置为Chr1:110674528
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110674658，正链)、区域2(位置为Chr1:110674719
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110674845，负链)及区域3(位置为Chr1:110674827
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110674964，正链本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测基因甲基化水平的PCR引物对及探针组合，其特征在于，包括第一引物对、第一探针、第二引物对和第二探针，所述第一引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示，所述第一探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述第二引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.10和11所示，所述第二探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。2.根据权利要求1所述的检测基因甲基化水平的PCR引物对及探针组合，其特征在于，所述第一探针和所述第二探针的5'端含有荧光报告基团，3'端含有荧光淬灭基团。3.如权利要求1或2所述的检测基因甲基化水平的PCR引物对及探针组合在制备食管癌诊断试剂中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述食管癌诊断试剂用于检测生物样本中KCNA3基因的甲基化水平和OTOP2基因的甲基化水平，其中，所述第一引物对和所述第一探针用于检测KCNA3基因的甲基化水平，所述第二引物对和所述第二探针用于检测OTOP2基因的甲基化水平。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述生物样本为食管组织样本、食管脱落细胞样本或血液样本，所述血液样本包括血浆、血清、全血、分离的血细胞或它们的组合。6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述食管癌诊断试剂采...

【专利技术属性】
技术研发人员：王洛伟，周俊，张良禄，董兰兰，李兆申，边岩，高野，林寒，庞亚南，辛磊，
申请(专利权)人：武汉艾米森生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：