一种鉴别华南忍冬和金银花的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种鉴别华南忍冬和金银花的方法，是利用薄层色谱法对华南忍冬和金银花进行区分；本发明专利技术还进一步采用高效液相色谱法对华南忍冬和金银花进行区分。本发明专利技术的鉴别方法可用于金银花或华南忍冬药材真伪及品质优劣的评价，可用于区分金银花药材与华南忍冬药材，还可用于制剂中投料药材的品质评价，保证其质量的稳定、均一，可控。本发明专利技术的方法具有操作简便、重现性好、直观性强等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术公开了一种鉴别华南忍冬和金银花的方法及其应用，属于药物分析 领域。
技术介绍
华南忍冬在2005年版《中华人民共和国药典》之前的各版中作为金银花 中的一个来源收载，2005年版《中华人民共和国药典》( 一部)将二者区分开， 但两者来源科属相同、品种相似，性味、鉴别、功能与主治、用法与用量相同， 含量测定项均为高效液相色谱法测定绿原酸含量，方法及限度相同，区别在于 金银花增加了木犀草苷含量测定项，但文献报道华南忍冬亦含有木犀草香。根 据文献报道，标准分列的主要原因是"中药材内含成分差别较大的多来源品种, 按一物一名的原则逐步分列"，表示其化学成分或有效成分的含量不同。中药复方制剂中的投料药材为华南忍冬还是金银花， 一直无法区分。国家 食品药品监督管理局规定投料药材必须固定品种，从而保证制剂质量的稳定、 均 一 ，因此区分华南忍冬和金银花是急需解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服已有技术的困难，目的在于提供一种高 效、可靠的鉴别华南忍冬和金银花的方法。本专利技术的另一目的是提供上述方法的应用。 本专利技术通过以下技术方案实现上述目的一种鉴别华南忍冬和金银花的方法，是利用薄层色镨法对华南忍冬和金银 花进行区分；所述薄层色谱法的色语条件为对照品溶液绿原酸和咖啡酸混合 的曱醇溶液，各组分浓度均为lmg/ml，供试品溶液为药材的甲醇溶液；薄层 板为以羧曱基纤维素钠为黏合剂的硅胶H板或G板；点样量0.1 20^1;展开 剂为乙酸丁酯-曱酸-水(7:2.5:1-3)的上层溶液或氯仿-曱醇-曱酸(9:1:0.5); 紫外光灯365nm下检视。检视的结果为供试品色语中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同3颜色的荧光斑点。华南忍冬供试品薄层色谱中，可以看到一系列的特征斑点， 通过与绿原酸，咖啡酸对照品对照，两个展开系统对比，能够清晰看到华南忍 冬具有的3个特征斑点区别于金银花的蓝色荧光斑点，因此可以区分金银花与 华南忍冬。更进一 步的，结合高效液相色谱对华南忍冬和金银花进行区分 高效液相色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸溶液(12:88)为流动相；检测波长为310 ~ 340nm;理论塔板数按咖啡酸峰计算不低于1000。对照品溶液的制备精密称取绿原酸和咖啡酸对照品适量，置棕色并瓦中， 加50%曱醇溶液制成每lml含绿原酸40pg、咖啡酸8吗的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉末(过四号筛)0.1 10g ，精密称定，置具 塞锥形瓶中，精密加入50。/。曱醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频 率35kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%曱醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50%曱醇至刻度，摇匀， 即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5 lOy,注入色谱仪， 测定，即得。本品按干燥品计算，10批华南忍冬和金银花中的绿原酸((:16111809) 含量2.4~3.9%,两种药材的含量相当；华南忍冬的咖啡酸(C9H804)含量范 围大约在0.1% ~ 0.23%，而金银花中咖啡酸含量大约0.02% ~ 0.03%，华南忍 冬的咖啡酸含量是金银花的IO倍左右。本专利技术还提供上述筌别方法的应用，是应用于鉴别含有华南忍冬或金银花 的药物制剂。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果本专利技术的鉴别方法可用于金银花或华南忍冬药材真伪及品质优劣的评价， 可用于区分金银花药材与华南忍冬药材，还可用于制剂中投料药材的品质评 价，保证其质量的稳定、均一，可控。本专利技术的方法具有操作简便、重现性好、 直观性强等优点。 附图说明图1和图2是本专利技术的华南忍冬与金银花薄层色谱定性图镨，置紫外光灯 365nm下检视，点样顺序1 ~ 2.金银花供试品溶液(依次为对照药材121060-200504,市售品)，3.绿原酸对照品，4.咖啡酸对照品，5~14.10批华 南忍冬供试品溶液。图1展开剂为乙酸丁酯-甲酸-水(7:2.5:1)的上层溶液， 图2展开剂为氯仿-曱醇-曱酸(9:1:0.5)。图中A、 B、 C、 D为特征斑点，其中 A为绿原酸、B为咖啡酸，两个展开系统对比，能够清晰看到蓝色荧光斑点B、 C、 D为可以区分金银花与华南忍冬的3个特征蓝色荧光斑点。图3、图4、图5是本专利技术的高效液相色谱定量图谱，分别为绿原酸、咖 啡酸混合对照品、华南忍冬药材及金银花对照药材液相色谱图；图中33均为 绿原酸，34均为咖啡酸。 具体实施例方式以下通过具体的实施例进一步说明本专利技术的技术方案。 实施例11仪器与试药1.1 仪器戴安Dionex公司高效液相色谱仪(ASI-100自动进样器、 ATH-585柱温箱、P680四元梯度泵、PDA-100 4全测器)；色语柱Dikma PLATISIL ODS C18,250mm x4.6mm,5|jm;预制硅胶H薄板、G薄板(玻璃片基20x20cm浙江省台州市路桥四曱生 化塑料厂)；CAMAG AUTOMATIC TLC SAMPLER薄层自动点样仪、CAM AG TLC REPROSTAR薄层自动成像系统、CAMAG双槽展开缸(瑞士 CAMAG公司)；1.2试药10批华南忍冬药材及口炎清颗粒、金银花对照药材，均由广 州白云山和记黄埔中药有限公司提供。实验中液相色谱所用试剂乙腈均为色谱纯，其余所用试剂均为分析纯，水为超纯水。 2方法与结果2.1 口炎清颗粒中华南忍冬的薄层鉴别取本品10袋，研细，取约10g， 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处 理(功率360W,频率35kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用曱醇补足减失 的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml,减压回收溶剂至干，残渣加水 约5ml溶解，定量转移至固相萃取小柱(填料C18,规格6ml,500mg),加 水15ml分次淋洗，'淋洗液弃去，再用曱醇15ml分次洗脱，收集洗脱液，減压 回收溶剂至干，残渣定量加入曱醇2ml，使完全溶解，用0.45pm微孔滤膜滤5过，作为成品供试品溶液。另取华南忍冬或金银花药材粉末0.2g,加曱醇提取， 滤过，滤液作为药材供试品溶液。再取绿原酸、咖啡酸对照品，加曱醇制成每 lml各含lmg的溶液，作为混合对照品溶液。照薄层色谱法(《中华人民共和 国药典》2005年一部附录VIB)试验，吸取成品供试品溶液、上述对照品溶液、 药材供试品溶液及成品供试品溶液各lOpl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为 黏合剂的硅胶H薄层板上，分别以乙酸丁酯-曱酸-水(7:2.5:1 3)的上层溶液 或氯仿-曱醇-曱酸(9:1:0.5)为展开剂，展开约15厘米，取出，晾干，置紫外 光灯(365nm)下检视。以展开剂前者所得图像见图1，以展开剂后者所得图 像见图2。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光 斑点。2.2 高效液相色谱分析供试品溶液的制备取药材粉末(过四号筛)0.5g，精密称定，置具塞锥 形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频汆 35kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用50%曱醇补足减失的重量，摇匀，滤 过，精密量取续滤液2ml，置10m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴别华南忍冬和金银花的方法，是利用薄层色谱法对华南忍冬和金银花进行区分；　所述薄层色谱法的色谱条件为：对照品溶液绿原酸和咖啡酸混合的甲醇溶液，各组分浓度均为１ｍｇ／ｍｌ，供试品溶液为药材的甲醇溶液；薄层板为以羧甲基纤维素钠为黏合剂 的硅胶Ｈ板或Ｇ板；点样量０．１～２０μｌ；展开剂为乙酸丁酯－甲酸－水（７∶２．５∶１～３）的上层溶液或氯仿－甲醇－甲酸（９∶１∶０．５）；紫外光灯３６５ｎｍ下检视。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：苏薇薇，李楚源，关倩怡，王德勤，彭维，林青，王永刚，黄琳，梁峰，肖晓丽，
申请(专利权)人：广州白云山和记黄埔中药有限公司，中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]