一种低分子肝素的结构解析的方法技术

本申请公开了一种低分子肝素的结构解析的方法，所述方法包括：对低分子肝素进行液相色谱分离，然后采用四级杆

【技术实现步骤摘要】
一种低分子肝素的结构解析的方法


[0001]本申请属于糖分析
，具体地，涉及一种低分子肝素的结构解析的方法。

技术介绍

[0002]肝素类药物是一种历史悠久的抗凝血和抗血栓类药物，包括未分级肝素、低分子肝素和超低分子肝素，主要用于心脑血管疾病和体外透析治疗。近年来，肝素类药物的抗炎症、抗肿瘤等其他药物活性也逐渐引发了人们的重视，应用前景广阔。肝素是一种高度磺酸化的动物源多糖混合物，葡萄糖醛酸/艾杜糖醛酸
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氨基葡萄糖组成的双糖单元连续排列形成了肝素的骨架结构。葡萄糖醛酸和艾杜糖醛酸的2
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O、氨基葡萄糖的3、6
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O与N位可能发生磺酸取代；氨基葡萄糖的N还可能发生乙酰基取代(参见图1)。
[0003]肝素的构成组分极为复杂、分子量分布范围广，其中各组分的精细结构及含量决定了其药物活性。尽管已应用于临床近百年，其精确表征与质量控制仍然面临极大挑战。因此，针对肝素类药物的结构特点建立完善的表征方法与质控体系对该类药物的安全性提升至关重要。
[0004]糖链指纹图谱分析是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低分子肝素的糖链结构解析的方法，其中，所述方法包括：对低分子肝素进行液相色谱分离，然后采用四级杆
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离子淌度
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高分辨质谱联用技术对低分子肝素进行分析。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述低分子量肝素的重均分子量为4000
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7000Da；优选对低分子肝素的糖链进行结构解析是指对低分子肝素中的8糖以下的糖链的结构进行解析。3.根据权利要求1所述的方法，其中，将液相色谱分离后的样品采用四级杆对8糖以下的寡糖对应的m/z的离子进行初步筛选。4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述离子淌度为环形离子淌度，采用环形离子淌度对8糖以下的寡糖对应的m/z的糖链进行分离，优选，在所述环形离子淌度分析中，控制离子在环形淌度池中的分离圈数、每次淌度分析时的离子推动次数以及对在环形淌度池中运动的离子施加的电压，进行所述环形离子淌度分析。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高分辨质谱为飞行时间质谱仪，优选在利用飞行时间质谱仪进行的分析中，控制离子源相关参数和带电离子在四级杆质谱仪中传输相关参数，进行所述质谱分析。6.根据权利要求1所述的方法，其中，在四级杆中，控制四级杆选择质核比的窗口大小，即控制LM Resolution为5
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15，优选为5
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10，同时控制HM Resolution为10
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20，优选为10
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15；优选，在四级杆中，控制带电离子在四级杆中传输所用的能量，即控制Transfer碰撞能为1
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12V，优选为1
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2V。7.根据权利要求4所述的方法，其中，控制离子在环形淌度池中的分离圈数是通过控制ADC延迟时间来实现，即控制ADC延迟时间为5n
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30n ms，优选为10n
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20n ms，其中n为在环形离子淌度中的旋转圈数，n为大于0的整数；和/或控制每次淌度分析时的离子推动次数是将其控制在1
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5的范围内，优选控制在1
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3的范围内；和/或控制对在环形淌度池中运动的离子施加的电压是通过控制静态行波高度(TW static height)来实现，即控制静态行波高度为5
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30V，优选为10
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20V。8.根据权利要求5所述的方法，其中，控制离子源相关参数包括控制毛细管电压以及脱溶剂气的温度；优选控制毛细管电压为1.0
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10.0kV，进一步优选为1.5
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3.0kV；优选控制脱溶剂气的温度为30
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100℃，进一步优选为40
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60℃；和/或控制带电离子在四级杆质谱仪中传输相关参数包括控制离子传输相关电压梯度，即控制前端传输电压梯度为0
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20V，优选为1
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【专利技术属性】
技术研发人员：赵思然，张天际，李红梅，阚莹，
申请(专利权)人：中国计量科学研究院，
类型：发明
国别省市：