一种突变型DNA聚合酶及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及分子生物学技术领域，公开了一种突变型DNA聚合酶及其制备方法与应用，该突变型DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，该氨基酸序列是在野生型FWT聚合酶的基础上突变得到，其突变位点包括：第80位的丙氨酸突变为精氨酸、第107位的天冬酰胺突变为天冬氨酸、第172位的谷氨酸突变为精氨酸、第325位的天冬酰胺突变为天冬氨酸、第423位的天冬氨酸突变为丙氨酸、第490位的丝氨酸突变为丙氨酸、第491位的苯丙氨酸突变为丙氨酸。该突变型DNA聚合酶在室温条件下具有相比于野生型更好的持续合成、链置换以及耐高盐能力，是滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。增和多重置换扩增的理想工具。

【技术实现步骤摘要】
一种突变型DNA聚合酶及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，尤其是涉及一种突变型DNA聚合酶及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]DNA聚合酶负责基因组的复制和维持，该作用对于准确地一代一代地传递遗传信息至关重要。链置换是指在DNA合成期间，聚合酶置换而不是降解所遇到的下游DNA的能力。在链置换复制期间，一次仅复制一条DNA链。链置换合成释放单链DNA，然后将其复制为双链DNA。常用的能够在常温条件下进行等温扩增聚合酶主要是PHI29聚合酶，但由于其具有外切酶活性，因此，限制了其在纳米孔测序上的应用。
[0003]相关技术中，FWT聚合酶作为聚合家族A中的一员，野生型FWT聚合酶来源于嗜冷杆菌Psychrobacilus sp.FJAT
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21963poly A0A0Q3VXV0，可用于测序，但其不具有明显的链置换能力，且仅在低温下具有较高的活性，无法在室温条件下进行有效地等温扩增，也无法耐受高盐。因此，需要不断改进野生型FWT聚合酶的性质，以获得性能更优的FWT聚合酶。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种突变型DNA聚合酶，其特征在于，所述突变型DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为：A1)、编码权利要求1所述的突变型DNA聚合酶的核苷酸序列；或A2)、与A1)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的序列如SEQ ID NO.2所示。4.生物材料，其特征在于，所述生物材料为B1)至B3)中的任一种：B1)、含有如权利要求2至3任一项所述核酸分子的表达盒；B2)、含有如权利要求2至3任一项所述核酸分子或B1)所述表达盒的重组载体；B3)、含有如权利要求2至3任一项所述核酸分子、B1)所述表达盒或B2)所述重组载体的重组生物细胞。5.一种酶制剂，其特征在于，包括权利要求1所述的突变型DNA聚合酶。6.根据权利要求5所述的酶制...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙亚萍，何筠，付康，田晖，伊戈尔，
申请(专利权)人：安序源生物科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：