【技术实现步骤摘要】
一种调节炎症微环境的混合细胞膜功能化骨修复基质及其制备方法
[0001]本专利技术属于骨修复制备
,涉及一种调节炎症微环境的混合细胞膜功能化骨修复基质及其制备方法。
技术介绍
[0002]骨缺损是骨科的临床常见病,自体骨移植是骨缺损治疗最有优势的治疗方法,但自体骨的数量有限,手术后的感染、疼痛等症状影响自体骨移植的应用。随着骨组织工程的发展,骨修复基质在骨缺损治疗中效果显著。常见的骨组织工程基质不仅可以模拟天然细胞外基质的三维结构,具有良好的力学性能和生物相容性,而且具有促进成骨细胞的黏附、增殖和成骨分化的能力;同时,骨组织再生和骨缺损修复过程具有复杂且动态变化的特点,伴随着炎症细胞的浸润、骨祖细胞的增殖、迁移和分化以及骨周围细胞外基质的形成,最终实现骨组织的重建。仿生骨细胞外基质(bone extracellular matrix,bECM)需要具备调节炎症和再生微环境的能力。
[0003]静电纺微/纳米纤维支架作为一种常见的bECM材料,具有良好的孔隙度和三维连通性,已广泛应用于伤口愈合、组织工程和药物传递 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种调节炎症微环境的混合细胞膜功能化骨修复基质的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:(1)制备生物素修饰的聚已内酯纳米纤维:将浓度为0.1~1.0mM的生物素溶液、浓度为0.1~1.0M的1
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(3
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二甲基氨丙基)
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乙基碳酰胺盐酯溶液和浓度为0.1~1.0M的N
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羟基琥珀酰亚胺溶液混合后,加入聚已内酯纳米纤维,在37℃下反应2~6h,使生物素的羧基与聚己内酯纳米纤维的氨基反应得到生物素修饰的聚已内酯纳米纤维;(2)制备混合细胞膜:将抗炎型巨噬细胞膜和成骨分化的骨髓间充质干细胞膜等质量混合后超声处理15~30min,通过100~400nm的聚碳酸酯多孔膜挤压10~20次,得到混合细胞膜;(3)制备生物素修饰的混合细胞膜:将浓度为0.1~1.0mM的生物素溶液、浓度为0.1~1.0M的1
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二甲基氨丙基)
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乙基碳酰胺盐酯溶液和浓度为0.1~1.0M的N
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羟基琥珀酰亚胺溶液混合后,加入混合细胞膜在4℃下过夜处理,使生物素的羧基与混合细胞膜的氨基反应得到生物素修饰的混合细胞膜;(4)将步骤(1)中制备的生物素修饰的聚已内酯纳米纤维、步骤(3)中制备的生物素修饰的混合细胞膜和链霉亲和素混合形成混合物,偶联反应2~6h,即得到调节炎症微环境的混合细胞膜功能化骨修复基质。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述聚已内酯纳米纤维按照如下方法制备:将纯聚已内酯颗粒溶解在六氟异丙醇中,依次通过喷射泵、16~22G钝化不锈钢针和在15kv高压电源进行速度为1mL/h的输送,在铝箔上进行收集得到;其中所述铝箔包裹在转速不大于1000rpm的开笼式滚筒收集器上。3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述生物素溶液中的生物素、1
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(3
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二甲基氨丙基)
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乙基碳酰胺盐酯、N
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羟基琥珀酰亚胺与聚已内酯纳米纤维表面积的比例为1.22:0.96:0.58:1~4.82:0.40:0.11:1,mg:mg:mg:cm2。4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述抗炎型巨噬细胞膜按照如下方法制备:(1)以RAW264.7为巨噬细胞代系,使用含10~100ng/mL白介素4的条件培养基培养巨噬细胞7...
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