EGCG在预防和/或治疗白内障中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，提供了一种预防和/或治疗白内障的制剂，所述制剂中含有EGCG。本发明专利技术提供的预防和/或治疗白内障的制剂，可有效降低衰老小鼠晶状体混浊程度，并减少氧化应激诱导晶状体上皮细胞凋亡的发生，为进一步明确EGCG在白内障发生过程中的分子机制奠定了基础，为EGCG的临床转化提供重要的实验基础，为白内障的早期诊断和靶向治疗提供新的方向。向。向。

【技术实现步骤摘要】
EGCG在预防和/或治疗白内障中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，特别涉及EGCG在预防和/或治疗白内障中的应用。

技术介绍

[0002]白内障是导致人们视力损伤和可逆性失明的最常见的眼部疾病之一。发病通常始于45至50岁的年龄相关性白内障(age
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related cataract,ARC)是白内障中最常见的类型。目前，大多数患者都可以通过白内障超声乳化术联合人工晶体植入术重获光明，但是手术治疗仍可能产生一系列的术中、术后并发症，影响患者的视力以及视觉质量情况。因此目前仍然需要研究者们持续的努力去探索更好的预防与治疗白内障的方案。
[0003]ARC的发病机制错综复杂，目前的共识认为因氧化应激诱导的晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)凋亡是大部分类型白内障的起始。因此，阻止ARC形成的关键在于减轻晶状体的氧化应激损伤以及减少LECs的凋亡。
[0004]表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶的主要多酚成分，占绿茶中儿茶素总含量的50
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80％。一系列研究表明，EGCG具有强大的抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗衰老和抗纤维化活性。据报道，EGCG已在临床试验中进行了测试，结果表明EGCG的给药可改善放射性食管炎、口腔粘膜炎以及心脏相关疾病和肺毒性。然而，EGCG在预防或治疗ARC方面的有效性仍然未知。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术中存在的上述问题，本专利技术提供了EGCG在预防和或治疗白内障中的应用。
[0006]本专利技术第一方面提供了EGCG在预防和/或治疗白内障中的应用。
[0007]本专利技术第二方面提供了一种用于预防和/或治疗白内障的制剂，所述制剂中含有EGCG。
[0008]本专利技术第三方面提供了一种EGCG或其制剂在制备用于预防和/或治疗白内障的药物中的应用。
[0009]本专利技术第四方面提供了一种预防和/或治疗白内障的方法，所述方法包括将含有EGCG或其制剂的药物施用给人或动物的操作。
[0010]本专利技术通过对小鼠施用EGCG，可有效降低衰老小鼠晶状体混浊程度，并减少氧化应激诱导晶状体上皮细胞凋亡的发生，证明了EGCG可通过靶向抑制RASSF2进而激活AKT信号通路，有效地延缓了LECs的凋亡，为进一步明确EGCG在ARC发生过程中的分子机制奠定了基础，为EGCG的临床转化提供重要的实验室基础，为ARC的预防、早期诊断和靶向治疗提供了新的方向。
附图说明
[0011]图1为本专利技术实施例1中，长期使用低剂量EGCG治疗小鼠的晶状体混浊进展情况
图。其中，(a)数码裂隙灯下分别对青年组(Young)、老年组(Aged)和EGCG治疗组小鼠晶状体拍照。(b)根据LOCS II对三组小鼠晶状体混浊程度进行评分。**p<0.01。(c)三组小鼠晶状体上皮细胞的比较，用苏木精染色的细胞核(蓝)。比例尺：20μm。(d)使用整个晶状体的H&E染色，通过来自三个独立实验的5个随机视野来确定细胞密度，并显示为平均值
±
SD。**p<0.01。
[0012]图2为本专利技术实施例1中，用来说明长期使用低剂量EGCG治疗可降低衰老小鼠的LECs凋亡率的图。其中，(a)通过阳性TUNEL和Hoechst33342染色，明确三组小鼠的LECs凋亡情况。比例尺：100μm。(b)在来自三个独立实验的5个随机视野确定阳性TUNEL(绿)和Hoechst33342(蓝)细胞，并显示为平均值
±
SD。**p<0.01.(c)免疫组织实验显示各组小鼠间Cleaved caspase3蛋白水平差异。比例尺：20mm。
[0013]图3为本专利技术实施例1中，用来说明RT
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qPCR验证DEGs的情况图。青年组、老年组和EGCG治疗组小鼠晶状体前囊膜样本中6个DEGs的相对表达水平。**P<0.01。
[0014]图4为本专利技术实施例1中，用来说明Rassf2水平升高与ARC相关的图。
[0015]其中，(a、b)Western blot检测了各组小鼠以及临床样本中Rassf2蛋白水平的差异。**p<0.01。(c、d)免疫组织实验显示各组小鼠以及人组织样本中Rassf2蛋白水平的差异。比例尺：20mm。
[0016]图5为本专利技术实施例1中，用来说明EGCG可减少H2O2诱导的LECs凋亡并影响RASSF2的蛋白表达图。其中，(a)cck8方法分析不同浓度EGCG联合200μM H2O2作用下细胞的存活率。(b、c)50μM EGCG预处理联合H2O2作用或单纯H2O2处理细胞后，Hoechst 33342染色观察细胞凋亡并进行亡分析。比例尺：50μm。(d)Western blot检测EGCG联合H2O2或单纯H2O2处理细胞后，RASSF2的蛋白表达变化。*p<0.05,**p<0.01。
[0017]图6为本专利技术实施例1中，用来说明EGCG通过抑制RASSF2的表达降低LECs的凋亡。其中，(a)Western blot验证pcDNA3.1
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RASSF2介导的RASSF2高表达。(b、c)pcDNA3.1
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RASSF2质粒转染细胞或联合EGCG以及H2O2处理后，进行Hoechst 33342染色观察细胞凋亡并进行分析。比例尺：50μm。(d)cck8方法分析RASSF2过表达后HLE
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B3细胞的存活率。*p<0.05,**p<0.01。
[0018]图7为本专利技术实施例1中，用来说明RASSF2的低表达可有效减少H2O2诱导的LECs凋亡。其中，(a)Western blot验证pSilencer3.1
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RASSF2介导的RASSF2低表达。(b、c)pSilencer3.1
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RASSF2质粒转染细胞或联合H2O2处理后，进行Hoechst33342染色观察细胞凋亡，并进行分析。比例尺：50μm。(d)cck8方法分析RASSF2沉默后HLE
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B3细胞的存活率。**p<0.01。
[0019]图8为本专利技术实施例1中，用来说明EGCG通过抑制RASSF2进而激活AKT介导ARC的发生。其中，(a)Western blot检测EGCG预处理细胞1小时后加入H2O2作用后AKT和p
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AKT(ser473)的蛋白表达。(b)细胞转染RASSF2过表达质粒后或联合EGCG作用下，Western blot检测AKT总蛋白及其磷酸化水平变化。(c)Western blot检测了细胞在单纯H2O2处理以及联合转染RASSF2沉默质粒后AKT总蛋白及其磷酸化水平变化。**p<0.01。(d)Western 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.EGCG在预防和/或治疗白内障中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述白内障为年龄相关性白内障；优选地，所述白内障为中老年白内障。3.一种用于预防和/或治疗白内障的制剂，所述制剂中含有EGCG。4.根据权利要求3所述的制剂，其特征在于：所述白内障为年龄相关性白内障；优选地，所述白内障为中老年白内障。5.根据权利要求3或4所述的制剂，其特征在于：所述制剂还含有药学上可接受的载体；所述药学上可接受的载体为任何与药物施用相容的溶剂、分散介质、包衣、等渗剂、吸收延迟剂。6.根据权利要求3或4所述的制剂，其特征在于：所述制剂还含有药学上可接受的增效剂和/或赋形剂。7.根据权利要求6所述的制剂，其特征在于：所述制剂为液体剂型、固体...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏冬梅，胡姗姗，刘善贺，马旭，韦千秋，朱文娜，关丽娜，魏莹，
申请(专利权)人：牡丹江医学院附属红旗医院，
类型：发明
国别省市：