一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物。该系统由金纳米星、包覆在金纳米星表面的聚多巴胺，负载在聚多巴胺内部的化疗药物顺铂(CDDP)以及负载在聚多巴胺表面的化疗药物盐酸阿霉素(DOX)，以及修饰在聚多巴胺表面的靶向多肽9R

【技术实现步骤摘要】
一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法及应用


[0001]本专利技术属于生物医药与健康
，具体涉及一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]肝细胞癌是世界上最常见的癌症之一，是一个重大的全球卫生挑战。目前肝癌患者的治疗选择包括肝移植、手术切除、经皮消融和放疗等。大多数实体瘤最主要的治疗方式仍为手术切除，但肝癌术后的高复发率不容忽视。因此，寻找治疗肝癌的新型治疗方案是研究学者亟待解决的问题。
[0003]金纳米星(GNS)是具有针刺状结构的金纳米粒子，通过调节金纳米星的合成条件，可以有效地将金纳米星的吸收峰调节至近红外区，因此其可以作为近红外光热试剂将光能转化为热能进行光热治疗。
[0004]聚多巴胺 (PDA)是由传统的功能性生物分子多巴胺在一定的条件下通过聚合反应形成的具有特定功能的聚合物，且其对微酸环境具有一定的响应性。
[0005]光热治疗(otothermal therapy，PTT)是近年来新兴起来的一种肿瘤局部治疗方法，通过局部注射或者靶向修饰等方法，将光热材料递送到肿瘤部位，再通过外部局部近红外光照射，富集在肿瘤部位的光热试剂将光能转化为热能，使肿瘤局部温度升高达到热疗消融的效果。光热治疗可以选择性地杀死癌细胞而减少对正常组织的损伤，因此成为研究的热点。
[0006]虽然目前研究者已经研发出多种抗肿瘤的治疗方法，如光热治疗、光动力治疗、化学动力学治疗、免疫治疗等，然而单一治疗模式存在治疗不彻底，易复发，因此同时使用两种及以上不同药物或者不同方式来治疗肿瘤的协同治疗模式成为研究的热点。

技术实现思路

[0007]本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法及其在抗肝癌肿瘤方面的应用。本专利技术是一个双重化疗
‑
热疗型靶向纳米药物递送系统，其中聚多巴胺包覆的金纳米星作为一种良好的光热材料，发挥着光热作用以及负载化疗药物的作用，两种化疗药物发挥着协同化疗作用，靶向多肽发挥着将整个纳米药物递送至肝癌肿瘤部位的作用。在近红外激光照射下，纳米药物在肿瘤部位微酸、加热条件下先后释放化疗药物DOX和CDDP，实现肝癌肿瘤的双重化疗、光热治疗以及靶向治疗的联合治疗。
[0008]为实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案：一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物，其由金纳米星、包覆在金纳米星表面的聚多巴胺、负载在聚多巴胺内部的化疗药物顺铂(CDDP)、负载在聚多巴胺表面的化疗药物盐酸阿霉素(DOX
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HCl)以及修饰在聚多巴胺表面的靶向多肽9R
‑
P组成。
其中，金纳米星作为一种良好的近红外光热转换材料发挥着光热转换作用，聚多巴胺发挥着增强水溶性、生物相容性及官能团修饰的作用，顺铂和阿霉素发挥着协同化疗的作用，靶向多肽发挥着主动靶向作用。整个纳米药物在靶向多肽的作用下靶向至肝癌肿瘤部位，在外部进行肿瘤局部激光照射，聚集在肿瘤处的纳米粒子在激光照射下将光能转化为热能，达到肿瘤热疗消融的目的。肿瘤局部温度升高以及肿瘤微酸的条件有助于DOX和CDDP的释放，可以达到肿瘤协同化疗的目的。整个纳米药物递送系统实现了双重化疗、光热治疗与靶向治疗于一体的联合治疗。
[0009]一种所述pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法，其包括如下步骤：S1:制备金种子溶液：在温度为80~120℃的Au
3+
溶液中，加入一定量的柠檬酸钠溶液，搅拌8~12 min，迅速用冰水冷却，获得金种子溶液；S2：制备牛血清白蛋白稳定的金纳米星：在含有HCl的Au
3+
溶液中加入金种子溶液，然后快速加入硝酸银（AgNO3）溶液和抗坏血酸（AA）溶液启动金纳米星的生长，反应20~40 s, 得到金纳米星溶液；然后加入一定量的牛血清白蛋白（BSA）反应4~8 h，获得BSA稳定的金纳米星溶液；S3：制备负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星：离心步骤S2所得BSA稳定的金纳米星溶液并收集固体产物（即BSA稳定的金纳米星），然后用pH值7.5~9.5、浓度8~12 mM的Tris缓冲溶液稀释，在室温搅拌下加入盐酸多巴胺DA
·
HCl晶体和化疗药物顺铂CDDP粉末，通空气反应8~12 h，离心收集沉淀物，获得负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星；S4:制备负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星：将步骤S3所得负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星用pH值为7.5~9.5、浓度8~12 mM的Tris缓冲溶液稀释，在室温搅拌下加入盐酸阿霉素DOX
·
HCl粉末，避光反应10~14 h，离心收集沉淀物，获得负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星；S5:制备靶向多肽修饰的负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星：将步骤S4所得负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星溶于水中，加入靶向多肽，避光反应10~14 h，离心收集固体产物，洗涤，即得。
[0010]具体的，步骤S1中，所述Au
3+
、柠檬酸钠的摩尔浓度比为1：4~7。
[0011]具体的，步骤S2中，所述BSA稳定的金纳米星溶液中，HCl、Au
3+
、AgNO3、抗坏血酸的摩尔浓度比为1：0.2~0.4：0.01~0.03：0.4~0.6；所述BSA的质量终浓度为0.4~0.6 mg/mL。
[0012]进一步的，步骤S3反应体系中，BSA稳定的金纳米星、DA
·
HCl、CDDP粉末的质量浓度比为1：1
‑
3：1
‑
3。
[0013]具体的，步骤S4反应体系中，负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星与盐酸阿霉素的质量比为1：0.2~0.4。
[0014]进一步的，步骤S5中，负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星与靶向多肽的质量比为1:0.4~0.6。
[0015]进一步的，步骤S5中，所述靶向多肽的序列为：RRRRRRRRRGSGSWHLDYPSMWYLD，购于上海强耀生物科技有限公司。
[0016]本专利技术还提供了上述pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物在用于光热治疗和双重化疗联合抗肝癌肿瘤方面的应用。
[0017]上述的应用，在用于光热治疗时，需要用近红外激光器照射，激光器波长为700~900 nm。
[0018]此外，本专利技术还提供了一种较为详细的一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法，具体包括如下步骤：S1:制备金种子溶液：配制一定浓度的Au
3+
溶液，用油浴锅将其加热至一定温度后，加入一定量的柠檬酸钠溶液，搅拌至一定时间，迅速以冰水冷却，即得；所述Au
3+
的浓度为0.001 M；所述加热温度为80~120℃，具体可为100 ℃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物，其特征在于，由金纳米星、包覆在金纳米星表面的聚多巴胺、负载在聚多巴胺内部的化疗药物顺铂、负载在聚多巴胺表面的化疗药物盐酸阿霉素以及修饰在聚多巴胺表面的靶向多肽9R
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P组成。2.一种权利要求1所述pH响应型用于化疗、热疗及靶向治疗的仿生金纳米药物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1:制备金种子溶液：在温度为80~120℃的Au
3+
溶液中，加入一定量的柠檬酸钠溶液，搅拌8~12 min，冰水冷却，获得金种子溶液；S2：制备牛血清白蛋白稳定的金纳米星：在含有HCl的Au
3+
溶液中加入金种子溶液，然后加入AgNO3溶液和抗坏血酸溶液启动金纳米星的生长，反应20~40 s, 得到金纳米星溶液；然后加入牛血清白蛋白BSA反应4~8 h，获得BSA稳定的金纳米星溶液；S3：制备负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星：离心步骤S2所得BSA稳定的金纳米星溶液并收集固体产物，然后用pH值7.5~9.5的Tris缓冲溶液稀释，在室温搅拌下加入盐酸多巴胺DA
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HCl晶体和化疗药物顺铂CDDP粉末，通空气反应8~12 h，离心收集沉淀物，获得负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星；S4:制备负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星：将步骤S3所得负载CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星用pH值为7.5~9.5的Tris缓冲溶液稀释，在室温搅拌下加入盐酸阿霉素DOX
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HCl粉末，避光反应10~14 h，离心收集沉淀物，获得负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星；S5:制备靶向多肽修饰的负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星：将步骤S4所得负载DOX和CDDP的聚多巴胺包覆的金纳米星溶于水中，加入靶向多肽，避光反应10~14 h，离...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵美霞，赵雪杰，李林松，刘棒棒，程冬，陈鹏威，杨晓静，甘莹，张亚宏，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：