一种基于Ce37基因鉴定油莎豆成分的SYBRGreen荧光定量PCR方法及其应用技术

本发明专利技术公开一种基于Ce37基因鉴定油莎豆成分的SYBR Green荧光定量PCR方法及其应用，通过基于SYBR Green的实时荧光定量PCR技术，利用油莎豆植物基因组的单拷贝基因作为标记基因，建立具有特异性强、灵敏度高的油莎豆成分检测方法。本发明专利技术建立的方法可以准确区分油莎豆与4种莎草科植物及其它12种代表性植物，对6种市场上的食品样品进行实际检测，可准确判断出是否含有油莎豆成分。本发明专利技术建立的油莎豆特异性实时荧光定量PCR检测方法可以为油莎豆制品中油莎豆成分的定性、定量检测提供技术参考。参考。参考。

【技术实现步骤摘要】
一种基于Ce37基因鉴定油莎豆成分的SYBR Green荧光定量PCR方法及其应用


[0001]本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种基于Ce37基因鉴定油莎豆成分的SYBR Green荧光定量PCR方法及其应用。

技术介绍

[0002]油莎豆(学名：Cyperus esculentus L.，英文名：tiger nut)营养丰富，富含脂肪、淀粉、优质蛋白，以及生物碱、萜类、甾醇等功能活性成分。油莎豆油是一种天然高油酸食用油，抗氧化性好，不易酸败变质，有与橄榄油媲美的营养价值，并具有降低胆固醇、改善血液循环、提高脑细胞活性等保健作用。油莎豆淀粉属于慢消化淀粉，具有较高的消化率，食用后不会造成血糖的快速升高，这有助于预防糖尿病、肥胖等疾病。油莎豆中含有多种糖类，油莎豆水溶性糖的组成为果糖、棉籽糖、蔗糖和葡萄糖，棉籽糖也被称作蜜三糖，是一种功能性三糖，也是双歧杆菌的增殖因子，具有调节肠道菌群、促进益生菌再生、维持肠道正常功能的作用。油莎豆中的蛋白质营养价值较全面，是一种优良的蛋白质来源。油莎豆蛋白质具有比大豆蛋白质和马铃薯蛋白质更高的氨基酸比值本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鉴定油莎豆成分的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括上游引物Ce37
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F25、下游引物Ce37
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R176，所述上游引物Ce37
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F25的序列如SEQ IDNO.1，所述下游引物Ce37
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R176的序列如SEQ ID NO.2。2.一种鉴定油莎豆成分的SYBR Green荧光PCR方法，其特征在于，所述SYBR Green荧光定量PCR方法采用权利要求1所述的引物组合物和SYBR Green的扩增体系中进行扩增。3.根据权利要求2所述的SYBR Green荧光PCR方法，其特征在于，所述SYBR Green荧光PCR方法具体包含以下步骤：S1)获得待鉴定样本的基因组DNA；S2)采用包含的权利要求1所述的引物组合物实时荧光PCR反应体系对步骤1)中提取的基因组DNA进行扩增；S3)出现特异性扩增的样本，则确认待鉴定样本中含有油莎豆成分；优选地，S2)中实时荧光定量PCR反应体系中还包含SYBR Green；优选地，所述步骤S2)中的反应体系为：DNA模板1μL，qPCR SYBR Green Master Mix 10μL，10μM正、反向引物各0.4μL，加ddH2O补足至20μL；优选地，S2)中扩增的Ct值小于40；优选地，S1)中基因组DNA的浓度调整至0.032ng/μL
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20ng/μL范围内；优选地，所述步骤S2)采用荧光定量PCR进行扩增，所述荧光PCR的反应条件为：95℃预变性2min；95℃变性10s，60℃退火和延伸30s，40个循环。4.一种鉴定油莎豆成分的SYBR Green荧光定量PCR方法，其特征在于，所述SYBR Green荧光PCR方法具体包含以下步骤：S1)获得待鉴定样本的基因组DNA；并进行定量梯度稀释；S2)采用包含上述引物组合物实时荧光定量PCR反应体系对步骤1)中提取并稀释的不同浓度基因组DNA进行扩增；S3)采用S2)的反...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹智，张丽，肖艳华，普豪祯，赵永国，郭安平，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院三亚研究院，
类型：发明
国别省市：