【技术实现步骤摘要】
八肽、环八肽及衍生物、制备方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用
[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及一种八肽、该八肽的环化物、两种肽的制备方法以及在制备抗肿瘤药物中的用途。
技术介绍
[0002]癌症及恶性肿瘤是细胞恶性增殖的一类疾病，具有侵袭，扩散和远处转移的潜力。近年来，虽然在癌症化疗、放疗和免疫治疗方面取得巨大进展，但目前癌症仍然是全世界最主要的死亡原因。非小细胞肺癌(NSCLC)在全世界的患病率逐年上升，约75％支气管癌是非小细胞肺癌。肺癌患者由于早期转移以及缺乏有效的早期转移治疗，其五年生存率仅为8％
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14％，因此抑制肺癌细胞转移是肺癌治疗的关键之一。
[0003]肿瘤细胞的转移和侵袭行为是癌细胞内多基因改变和突变共同调控的结果，主要涉及MMPs，c
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Met，CD44，EGFR家族以及PAK家族等。癌细胞转移和侵袭行为与细胞外基质(ECM)的降解密切相关，而基质金属蛋白酶家族(MMPs)通过对细胞外基质成分的降解，在细胞外基质降解过程中起着至关重要的作用。
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种八肽，其特征在于，该八肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种环八肽，其特征在于，为权利要求1所述的八肽的环状物，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示：Cyclo(Ser
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Phe
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Gly
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Leu
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Ser
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Trp
‑
Leu
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Asp)，结构如下所示：3.权利要求1所述的八肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)溶胀后，在缩合剂作用下使首个氨基酸的1
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位羧酸与固相载体偶联，采用的缩合剂为HOBt
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DMAP缩合体系，活化剂为DIC，溶剂为DMF；氨基酸、HOBt、DIC、DMAP间的摩尔比为3:3:3:1；(2)封闭：加入吡啶和乙酸酐混合液，在25℃下振荡后依次用DCM、DMF、无水乙醚各洗涤树脂多次后，抽真空干燥树脂；(3)脱Fmoc保护：向步骤(1)中加入Oxyma、哌啶及DMF的混合溶液至树脂完全浸没，振荡后脱去树脂上的Fmoc，然后依次采用DCM、DMF洗涤；(4)连接第二个氨基酸：根据步骤(1)中的条件，在缩合剂作用下连接下一个氨基酸，根据多肽序列依次将Fmoc氨基酸、Oxyma和DIC混溶于NMP中，加入到树脂中，于60℃下振荡一定时间后，依次用DCM、DMF多次洗涤树脂；(5)重复进行脱保护
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偶联
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脱保护操作，直至所有氨基酸连接完成；(6)八肽粗品制备及纯化：使用切割试剂将肽链从载体上切下，纯化后得到所述八肽，其中，所述切割剂为TIPS、H2O、苯酚和TFA的混合溶液，采用的纯化方法为反向高效液相色谱法。4.根据权利要求3所述的八肽的制备方法，其特征在于：其中，步骤(1)中，树脂选用Wang树脂，载样量为0.57mmol/g，用DCM进行溶胀；偶联反应的温度为50～60℃，偶联反应的时间为20
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30min，步骤(2)中，吡啶和乙酸酐的体积比为1:1，反应时的振荡时间为20min，而后依次用DCM、DMF、无水乙醚各洗涤树脂3次后，抽真空干燥树脂，步骤(3)中，Oxyma与哌啶及DMF溶液的质量体积比为0.71:1:4(mg/ml/ml)，进行脱保护时，在20～30℃连续振荡两次5min后，脱去树脂上的Fmoc基团，然后依次采用DCM、DMF洗涤树脂各3次，步骤(4)中，进行氨基酸连接时，在60℃下的振荡时间为20min，然后依次采用DCM、DMF洗涤树脂各3次，步骤(6)中，切割试剂中TIPS、H2O、PhOH和TFA的体积比为2.5:5:5:87.5，所述切割试剂与直链肽的体积质量比为1:10mL/mg，切割的温度为20～30℃，切割的时间为4h；纯化条件如下：色谱柱：CST Daiso C18柱,10μm，30*250mm；流动相：流动相A为0.1％
TFA/水，流动相B为0.1％TFA/乙腈；梯度洗脱程序：25％B洗脱0～5min，25％B～45％B、5～60min；流速为15ml/min，进样量为5ml，检测波长214nm。5.权利要求2所述的环八肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)固相载体树脂溶胀后，在缩合剂作用下使首个氨基酸的1
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位羧酸与固相载体偶联，采用的缩合剂为HOBt
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DMAP缩合体系，活化剂为DIC，溶剂为DMF；氨基酸、HOBt、DIC、DMAP间的摩尔比为3:3:3:1；(2)封闭：加入吡啶和乙酸酐混合液，在25℃下振荡后依次用DCM、DMF、无水乙醚各洗涤树脂多次后，抽真空干燥树脂；(3)脱Fmoc...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹燕，赵庆杰，李安鹏，邹季花，柴晓云，宋琰，卓小斌，朱鴷，陈帅，廖俊，盖聪昊，杨积顺，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学，
类型：发明
国别省市：
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