一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法技术

本发明专利技术公开了一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法，包括以下步骤：（1）发酵液过滤后得到过滤液；（2）调节过滤液的pH，过滤得到除钙液；（3）除钙液经过交换树脂吸附、洗杂、洗脱，得到洗脱液；（4）调节洗脱液pH，脱色过滤得到脱色液；（5）调节脱色液pH，采用中低压分离柱对脱色液进行各组分单体分离，分别收集得到硫酸多粘菌素B各组分B1、B1

【技术实现步骤摘要】
一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体是一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法。

技术介绍

[0002]硫酸多粘菌素B(多粘菌素B)英文名：Polymyxin B Sulfate(Aerosporin)，系由多粘芽胞杆菌产生的一组由多种氨基酸和脂肪酸组成的碱性多肽类抗生素，于1947年被发现。除变形杆菌属外，硫酸多粘菌素B对几乎所有的革兰氏阴性细菌都有抗菌作用，多粘菌素对生长繁殖期和静止期的细菌都有效。多粘菌素B抗菌谱对大肠埃希菌、肠杆菌属、沙门氏菌属、克雷伯菌属流感杆菌等，特别是对铜绿假单胞菌属鲍曼不动菌属有高度敏感，并且对绿脓杆菌有高效，曾经是抗绿脓杆菌的首选药物，但是由于其毒副作用较大，只是局部用于敏感菌的眼、耳、皮肤、粘膜感染及烧伤绿脓杆菌感染。
[0003]近年来，随着超级细菌，即对几乎所有抗菌药物耐药的院内泛耐药菌的出现，临床治疗面临严重威胁。目前，耐多药革兰阴性杆菌感染，如铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌的感染，由于病原菌对许多抗菌药物存在天然本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将发酵液用酸调节pH，陶瓷膜过滤后得到过滤液；（2）向过滤液中加入草酸，再加入碱液调节过滤液的pH，再过滤除钙，得到除钙液；（3）将除钙液用阳离子交换树脂吸附、洗杂、洗脱，得到洗脱液；（4）将洗脱液用液碱调节pH，通过活性炭脱色，过滤得到脱色液；（5）调节脱色液的pH，采用上中低压分离柱对脱色液进行各组分单体分离，分别收集得到硫酸多粘菌素B各组分B1、B1
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I、B2和B3洗脱液；（6）将得到的各组分洗脱液分别加入液碱进行pH调节，结晶析出，过滤，对滤饼水洗除盐，得到各组分的结晶湿粉；（7）将得到的结晶湿粉用硫酸溶解分别得到多粘菌素B1、B2、B3和B1
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I硫酸盐溶解液；（8）将得到的各组分硫酸盐溶解液进行干燥，即得硫酸多粘菌素B各组分成品。2.根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法，其特征在于：所述步骤（1）中的酸为1M盐酸溶液或1M硫酸溶液，调节pH的范围为1.5
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3.0，优选2.0
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2.5。3. 根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法，其特征在于：所述步骤（2）中采用的碱液为1
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2 M的NaOH溶液调节pH值范围为3.0
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5.0，优选3.0
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3.5；所述过滤温度为15
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25 ℃。4. 根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法，其特征在于：所述步骤（3）中阳离子交换树脂，优选树脂型号为D001、D113、C105、C106中一种；所述树脂吸附产品量为30 g/L
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100 g/L，优选50 g/L
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70 g/L；所述洗杂溶剂为0.01
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0.05 mol/L的硫酸水溶液，优选为0.02
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0.03 mol/L的硫酸水溶液；所述洗脱溶剂为0.10
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0.40 mol/L的硫酸水溶液，优选浓度为0.15
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0.30 mol/L的硫酸水溶液。5. 根据权利要求1所述的一种从发酵液中提取高纯度高含量硫酸多粘菌素B单组分的方法，其特征在于：所述步骤（4）中的活性炭为酸碳或中性碳，优选303或301酸性活性炭；所述活性炭的添加量为洗脱液中硫酸多粘菌B质量的5 %
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40 %，优选15 %
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30 %；所述脱色液用液碱调节pH值为2.0
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3.0，优选2.5
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3.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈腊英，袁卫东，
申请(专利权)人：黄石曼菲特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：