本发明专利技术公开了肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，包括装置主体，所述装置主体包括防护机构、玻璃板、插槽以及冷却机构，所述装置主体侧面设有两个凸块，所述凸块与卡块相互配合卡合连接，所述卡块顶部与密封盖连接，所述密封盖一端与装置主体轴连接，所述密封盖底部安装有防护机构，所述装置主体内部设有内层，所述内层内部与插槽焊接，所述装置主体外部一端安装有冷却机构，仅能够对试剂盒内部进行降温，从而导致该试剂盒内部以及外界温度较高的情况下保持低温，从而防止试剂盒内部温度较高，从而对试剂产生影响，进而影响测试结果，方便外出携带或者在恶劣环境下临时储存试剂盒，保证试剂的性能。保证试剂的性能。保证试剂的性能。
【技术实现步骤摘要】
肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
[0001]本专利技术涉及生物检测试剂盒
，具体为肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)。
技术介绍
[0002]经检索，中国专利授权号为CN216402276U的专利公开了一种支原体污染PCR检测试剂盒，涉及生物检测试剂盒
，包括检测试剂盒、盒盖和线套壳，检测试剂盒上方活动连接有盒盖，检测试剂盒右侧下方固定连接有线套壳，通过第一海绵夹板、第二海绵夹板和第三海绵夹板均分布在检测试剂盒内部上、中、下三层设置，使其试管本体从试管孔穿过第一海绵夹板、第二海绵夹板放置，配合棉球对试管底部形成衬托，在运输试剂时对试管的上、中、下部进行分别保护，从而有效的保护试剂管，防止颠簸颤动造成试剂管破裂、损坏，解决了检测试剂盒包装效果差，导致其在运输过程中受颠簸对试剂管的影响，造成保护效果不是很理想，容易出现破裂的情况的问题。
[0003]上述专利存在以下不足：
[0004]1.该装置在运输的过程中，只能依赖外界因素如冰袋或者冰箱使该试剂盒的储存温度到达低温环境，在恶劣环境中，该试剂盒内部以及外界温度较高的情况下无法保持低温，从而容易导致试剂盒内部温度较高，从而对试剂产生影响，进而影响测试结果。
技术实现思路
[0005](一)解决的技术问题
[0006]针对现有技术的不足，本专利技术提供了肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，解决了
技术介绍
中所提出的问题。
[0007](二)技术方案
[0008]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，包括装置主体，所述装置主体包括防护机构、玻璃板、插槽以及冷却机构，所述装置主体侧面设有两个凸块，所述凸块与卡块相互配合卡合连接，所述卡块顶部与密封盖连接，所述密封盖一端与装置主体轴连接，所述密封盖底部安装有防护机构，所述装置主体内部设有内层，所述内层内部与插槽焊接，所述插槽设有两个，两个所述插槽在装置主体内部上下分布，所述装置主体外部一端安装有冷却机构。
[0009]优选的，所述防护机构包括缓冲弹簧、伸缩杆、玻璃板，所述密封盖下方设有玻璃板，所述玻璃板为透明玻璃。
[0010]优选的，所述玻璃板顶部通过伸缩杆与密封盖连接，所述伸缩杆外部套装缓冲弹簧。
[0011]优选的，所述插槽两侧与弹簧片焊接，所述弹簧片为弹性金属片，所述缓冲垫安装于插槽下方。
[0012]优选的，所述冷却机构包括导流板、冷却器、调节钮、温度监测装置、排风装置，所
述导流板设置于内层与装置主体之间，所述内层呈上下错位分布，所述装置主体一端安装有冷却器.且装置主体另一端安装有排风装置，所述排风装置与温度监测装置电性连接，所述温度监测装置表面安装有调节钮。
[0013]优选的，步骤包括如下：
[0014]S1，PCR反应液中间品配制：用移液枪向已清洗灭菌的容量瓶内依次配制A、B、C、D、E、F、G，其成分分别为：氯化钾(KCl)、盐酸、氯化镁、甘油、氯化铵、BSA、Tween
‑
20，进一步结合dNTPs安照比例配置成为PCR反应液；PCR反应酶配制：用移液枪向已清洗灭菌的容量瓶内配制反应酶，其成分为热启动核酸聚合酶、UNG酶；质控品配制：用移液枪向已清洗灭菌的容量瓶内配制质控品，其成分为阳性假病毒以及阴性基质。
[0015]S2,样本准备：从待测EHP的对虾中取肝胰腺，(4
‑
5只虾)放进一个样本储存器中，或者装运对虾的虾槽中对排泄物和水进行了取样。
[0016]S3，准备试剂：包括PCR反应液、PCR反应液酶、阳性质控品及阴性质控品。
[0017]S4，核酸处理：采用磁珠法或者柱提取法对核酸进行纯化，把纯化好的样本加到反应体系中。
[0018]S5，上机(Applied7500、SLAN
‑
96P/SLAN
‑
96S、天隆TL988等)：通过上机程序对试剂进行反应，温度为50℃，时间为2min，再进行预变性，温度95℃，时间为3min，预变性之后进行变性，温度为94℃，时间为30S，复性，温度为60℃，时间为30S并进行荧光型号采集，最后仪器冷却。
[0019]S6，曲线：通过仪器实时监测，收集荧光信号读取信息，形成曲线，自动或手动分析检测结果，进一步测试对虾中是否含有EHP病原体。
[0020]优选的，所述步骤S1中，氯化钾浓度为3～6M，氯化镁浓度为0.2～0.3M，甘油浓度为30％～40％，氯化铵浓度为4
‑
6M，BSA的浓度为1％～3％，Tween
‑
20的浓度为20
‑
40％。
[0021]优选的，步骤S1中EHP_PCR反应液成分为dUTP、dATP、dGTP、dCTP、EHP引物及探针、12X buffer A，PCR反应酶的主要成分为热启动核酸聚合酶、UNG酶，EHP阳性质控品主要成分EHP假病毒颗粒、阴性基质，EHP阴性质控品主要成分为阴性基质。
[0022](三)有益效果
[0023]本专利技术提供了肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)。具备以下有益效果：
[0024](1)、该肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，通过各个部件的互相组合，在使用的过程中通过温度监测装置对装置主体内部的温度进行监测，当装置主体内部温度较高时，通过排风装置将内层与装置主体之间的空气排出，同时在排风装置的作用下，空气从冷却器一端进入装置主体内部，在冷却器的作用下能够对空气进行冷却，冷却的空气通过装置主体两侧的导流板上下迂回经过，同时冷却的空气能够与内层表面进行接触，从而与装置主体内部进行热量交换，被内层加热过的空气能够从排风装置排出，从而达到对装置主体内部冷却的效果，进而有利于使装置主体内部保持良好的试剂存储环境。
附图说明
[0025]图1为本专利技术整体结构示意图；
[0026]图2为本专利技术内部结构示意图；
[0027]图3为本专利技术导流板结构示意图；
[0028]图4为本专利技术缓冲垫结构示意图；
[0029]图5为本专利技术玻璃板结构示意图。
[0030]图6为本专利技术2
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buffer A中间品配制参考用量图；图7为本专利技术EHP_PCR反应液图；图8为本专利技术PCR反应酶图；图9为本专利技术试剂主要成分图；图10为本专利技术上机程序图；图11为本专利技术阴性结果图；图12为本专利技术扩增曲线图；图13为本专利技术原始曲线图；图14为本专利技术EHP阳性质控品图。图中，1、装置主体；2、凸块；3、卡块；4、密封盖；5、防护机构；504、伸缩杆；505、玻璃板；6、插槽；601、弹簧片；602、缓冲垫；7、内层；8、冷却机构；801、导流板；802、冷却器；803、调节钮；804、温度监测装置；805、排风装置。
具体实施方式
[00本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，其特征在于：包括装置主体(1)，所述装置主体(1)包括以及，所述装置主体(1)侧面设有两个凸块(2)，所述凸块(2)与卡块(3)相互配合卡合连接，所述卡块(3)顶部与密封盖(4)连接，所述密封盖(4)一端与装置主体(1)轴连接，所述密封盖(4)底部安装有照明机构(5)，所述装置主体(1)内部设有内层(7)，所述内层(7)内部与插槽(6)焊接，所述插槽(6)设有两个，两个所述插槽(6)在装置主体(1)内部上下分布，所述装置主体(1)外部一端安装有冷却机构(8)。2.根据权利要求1所述肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，其特征在于：所述照明机构(5)包括缓冲弹簧(501)、灯管(502)、灯槽(503)、伸缩杆(504)、玻璃板(505)，所述灯槽(503)顶部与密封盖(4)粘接，所述灯槽(503)呈等间距规律状分布于密封盖(4)底部表面，所述灯槽(503)内部安装有灯管(502)，所述灯槽(503)下方设有玻璃板(505)，所述玻璃板(505)为透明玻璃。3.根据权利要求2所述肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，其特征在于：所述玻璃板(505)顶部通过伸缩杆(504)与密封盖(4)连接，所述伸缩杆(504)外部套装缓冲弹簧(501)。4.根据权利要求1所述肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，其特征在于：所述插槽(6)两侧与弹簧片(601)焊接，所述弹簧片(601)为弹性金属片，所述缓冲垫(602)安装于插槽(6)下方。5.根据权利要求4所述肠胞子虫病(EHP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)，其特征在于：所述内层(7)内部安装有加热管(701)，所述加热管(701)呈多弯曲状，所述加热管(701)安装与缓冲垫(602)下方，所述内层(7)为铜铝复合材质构成。6.根据权利要求1
‑
5所述一种虾EHP荧光PCR检测方法，其特征在于：步骤包括如下：S1，PCR反应液中间品配制：用移液枪向已清洗灭菌的容量瓶内依次配制A、B、C、D、E、F、G，其成分分别为：氯化钾(KCl)、盐酸、氯化镁、甘油、氯化铵、BSA、Tween
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20，进一步结合dNTPs安照比例配置成为PCR反应液；PCR反应酶配制：用移液枪向已清洗灭菌的容量瓶内配制反应酶，其成分为热启动核酸聚合酶、UNG酶；质控品配制：用移液枪向已清洗灭菌的容量瓶内配制质控品，其成分为阳性假病毒以及阴性基质。S2,样本准备：从待测EHP的对虾中取肝胰腺，(4
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5只虾)放进一个样本储存器中，或...
【专利技术属性】
技术研发人员：温建新，黎梅连，付雨思，庄其山，
申请(专利权)人：百吉泰厦门医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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