【技术实现步骤摘要】
一种基于核苷酸探针的密码子浓度检测方法及其在识别检测转基因食品上的应用
[0001]本专利技术涉及食品检测
,具体为一种基于核苷酸探针的密码子浓度检测方法及其在识别检测转基因食品上的应用。
技术介绍
[0002]近年来,转基因作物(Genetically Modified Crops,GMC)涉及到人体健康风险、环境危害和经济问题引起人们的广泛关注。许多国家要求强制标识转基因食品,并对转基因食品规定了最低检出标准(例如,在欧盟为0.5%)。因此,转基因食品的检测需求急剧增加。目前聚合酶链反应(PCR)结合凝胶电泳分析是应用最广泛的转基因鉴定工具。然而,PCR和凝胶电泳费时费力,而且需要相应的昂贵仪器和专业人员操作。所以发展简单、快速、灵敏的转基因筛选方法是很有必要的。核酸生物大分子具有合成简单、易于修饰、结构灵活等特点,作为一种具有一定生化用途的功能核苷酸探针,长期以来受到广泛的研究。其中,之前报道的分子信标(molecularbeacon,MB)是最经典的核苷酸探针,具有操作简单、选择性高、实时检测能力强等优点。然而 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.用于密码子检测的核苷酸探针,其特征在于,所述核苷酸探针包括:目标物识别区,用于与靶DNA密码子进行杂交;延伸序列切割区;G
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四面体序列模板区,其扩增产物与荧光染料结合,产生荧光信号;切割产物循环识别延伸区。2.根据权利要求1所述的用于密码子检测的核苷酸探针,其特征在于,所述核苷酸探针的序列为:5
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GTGCTTCACCCAACCCGCCCTACCCgctgaggCC CACCGGTCCTTCAGTGCTTCATTTTT
‑3’
,其中,目标物识别区的序列为:CCCACCGGTCCTTCA,延伸序列切割区的序列为:gctgagg,G
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四面体序列模板区的序列为:CCCAACCCGCCCTACCC,切割产物循环识别延伸区设置有两段相同序列,分布在两端,其序列为:GTGCTTCA;与该核苷酸探针对应的靶DNA密码子序列为:5
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GAACATGAAGGACC GGTGGG
‑3’
,其中,与目标物识别区杂交的序列为:TGAAGGACCGGTGG G。3.根据权利要求1所述的用于密码子检测的核苷酸探针,其特征在于,所述核苷酸探针的序列为:5
’‑
GTGCTTCACCCAACCCGCCCTACCCgctgaggGA GGCACCAACATTCGTGCTTCATTTTT
‑3’
,其中,目标物识别区的序列为:GAGGCACCAACATTC;与该核苷酸探针对应的靶DNA密码子序列为:5
’‑
AAGAATGTTGGTGC CTC
‑3’
,其中,与目标物识别区杂交的序列为:GAATGTTGGTGCCTC。4.根据权利要求1所述的用于密码子检测的核苷酸探针,其特征在于,所述核苷酸探针的序列为:5
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GTGCTTCACCCAACCCGCCCTACCCgctgaggGG GTGAGGATAGGGTGTGCTTCATTTTT
‑3’
,其中,目标物识别区的序列为:GGGTGAGGATAGGGT;与该核苷酸探针对应的靶DNA密码子序列为:5
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CAGAGAACCCTATC CTCACCC
‑3’
,其中,与目标物识别区杂交的序列为:ACCCTATCCTCACCC。5.一种基于权利要求1
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4任一所述核苷酸探针的密码子浓度检测方法,其特征在于,具体包括如下步骤:S1、检测前准备:配置反应缓冲液和...
【专利技术属性】
技术研发人员:闫超,陈彦,姚帮本,陈伟,陈赵然,童宁,
申请(专利权)人:安徽大学绿色产业创新研究院,
类型:发明
国别省市:
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