一株产黄色素的臭曲霉菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株产黄色素的臭曲霉菌及其应用。该臭曲霉菌的名称为臭曲霉(Aspergillus foetidus)HC32，于2023年01月03日保藏于位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:63106。该臭曲霉菌是在新会陈皮自然发酵分离得到的菌株，通过紫外诱变，得到的高产胞内黄色素的菌株。通过该菌株发酵可制备得到组分较明确的天然黄色素。然黄色素。然黄色素。

【技术实现步骤摘要】
一株产黄色素的臭曲霉菌及其应用


[0001]本专利技术属于微生物菌种选育的
，特别涉及一株产黄色素的臭曲霉菌及其应用。

技术介绍

[0002]天然色素具有无毒、安全性高，色泽自然鲜艳的特点，日益受到重视和青睐。天然色素现在主要来源是植物和微生物。但植物源色素因植物生长周期较长，受季节、气候、产地、规模、成本等因素的影响，其加工工艺也常常导致产品批次间的差异，从中提取的色素价格昂贵，使其在大规模应用中受限。而利用微生物资源采取发酵方法生产天然色素，不受季节、场地影响，微生物生长速度快、生产成本低，转化率高，易于工业化。因此，采用微生物生产天然色素将逐渐成为天然色素来源的主流。
[0003]天然黄色素的需求量较大，但适合生产的菌种资源缺乏，目前国内获批由微生物发酵生产的黄色素只有红曲黄色素一种，且因红曲霉所产色素中黄色素含量较低，实际生产中采用的是化学转化方法，将红曲红色素经硫化物磺化后制成红曲黄色素。严格来说，转化后形成的红曲黄色素为非天然色素，因此，天然黄色素生产技术有待进一步开发。
[0004]臭曲霉是一种已经应用在生产淀粉酶、柠檬酸、糖化曲以及酿造酱油、酒和醋等领域的菌种，通过对原始菌株进行紫外诱变，筛选出高产天然黄色素的突变菌株，对天然黄色素的生产及应用具有直接现实的重要意义和价值。

技术实现思路

[0005]本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一株产黄色素的臭曲霉菌。
[0006]本专利技术的另一目的在于提供上述产黄色素的臭曲霉菌的应用。
>[0007]本专利技术的再一目的在于提供一种黄色素，通过上述臭曲霉菌生产得到。
[0008]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0009]一株产黄色素的臭曲霉菌，名称为臭曲霉(Aspergillus foetidus)HC32，于2023年01月03日保藏于位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:63106。
[0010]所述的臭曲霉HC32具有如下形态学特征：在种子平板(PDA)上培养7天，形成圆形菌落，菌落直径在30～40mm，菌落呈黄色，短绒毛状、无褶皱，气生菌丝白色，基内菌丝黄色，有内容物；不具辐射状沟纹；菌落背面亦不具辐射状沟纹，背面呈深黄棕色。
[0011]上述产黄色素的臭曲霉菌在黄色素生产中的应用。
[0012]一种黄色素的生产方法，包括如下步骤：
[0013](1)将上述产黄色素的臭曲霉菌种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵菌液；
[0014](2)将步骤(1)得到的发酵菌液进行固液分离，取菌体；
[0015](3)用有机溶剂振荡提取步骤(2)得到的菌体的胞内容物，得到的提取液即为胞内黄色素溶液。
[0016]步骤(1)中所述的臭曲霉菌种子液为处于对数生长期的臭曲霉菌；优选通过如下步骤制备得到：将臭曲霉菌保存菌种活化后接种于种子培养基中进行摇瓶培养，得到处于对数生长期的臭曲霉菌。
[0017]所述的活化的步骤优选如下：将臭曲霉菌保存菌种划线于PDA培养基平板中，于25～30℃培养4～7天，进行活化。
[0018]所述的接种的接种量为每50mL种子培养基接种两块直径为0.5～1cm的平板菌块。
[0019]所述的种子培养基优选为PDB液体培养基。
[0020]所述的摇瓶培养的条件优选为于25～35℃、100～200rpm培养24～48h；更优选为于28～30℃、180～200rpm培养48h。
[0021]步骤(1)中所述的臭曲霉菌种子液的接种量为体积百分比5～15％；更优选为体积百分比10％。
[0022]步骤(1)中所述的发酵培养基的组成优选如下：碳源20～80g/L、氮源4～60g/L、KH2PO
4 0～1g/L、MgSO4·
7H2O 0～0.5g/L、KCl 0～0.5g/L和FeSO4·
7H2O0～0.01g/L，用蒸馏水定容至1000mL，pH值自然。
[0023]所述的碳源为葡萄糖、果糖、蔗糖、红糖、麦芽糖、大米粉、可溶性淀粉、乳糖、葡萄糖酸钠和马铃薯淀粉中的至少一种；优选为葡萄糖。
[0024]所述的葡萄糖在所述的发酵培养基中的浓度优选为50～80g/L；更优选为55～65g/L。
[0025]所述的氮源为大豆蛋白胨、细菌学蛋白胨、鱼粉蛋白胨、胰蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、酵母粉、黄豆粉、谷氨酸钠、氯化铵和硫酸铵中的至少一种；优选为大豆蛋白胨。
[0026]所述的大豆蛋白胨在所述的发酵培养基中的浓度优选为5～20g/L；更优选为10～15g/L。
[0027]所述的发酵培养基的组成优选如下：K2HPO
4 1g/L、MgSO
4 0.5g/L、KCl0.5g/L、FeSO
4 0.01g/L、葡萄糖50～80g/L、大豆蛋白胨5～20g/L，pH自然；更优选如下：K2HPO
4 1g/L、MgSO
4 0.5g/L、KCl 0.5g/L、FeSO
4 0.01g/L、葡萄糖55～65g/L、大豆蛋白胨10～15g/L，pH自然。
[0028]步骤(1)中所述的发酵培养的条件优选如下：于25～35℃、100～200rpm培养4～12天；更优选如下：于25～30℃、150～200rpm培养5～10天；最优选如下：于28～30℃、150～200rpm培养6～7天。本专利技术人发现，菌株的培养时间并非越长越好，而是存在着波动。本专利技术的变异株臭曲霉(Aspergillus foetidus)HC32，其发酵周期显著短于原始菌株，其能够在发酵起始后的短时间内达到黄色素的大量产生。因此，本专利技术的变异株臭曲霉(Aspergillus foetidus)HC32的培养时间可以为4～12天、较佳地5～10天、更佳地6～7天。
[0029]步骤(2)中所述的固液分离的方式包括滤纸过滤、抽滤和离心；优选为滤纸过滤。
[0030]步骤(3)中所述的有机溶剂优选pH值为1.5～2.5、浓度为体积百分比60～80％的乙醇水溶液；更优选pH值为2.0、浓度为体积百分比70％的乙醇水溶液。
[0031]所述的pH优选为用盐酸调节得到。
[0032]步骤(3)中所述的提取液可经过进一步浓缩、干燥，得到黄色素。
[0033]一种黄色素，通过上述生产方法得到；其主要成分为4个成分，分子量分别为472.30、574.42、486.31和412.37。
[0034]所述的黄色素在经过适当的加工、提纯、无毒化处理后，可作为色素添加剂。
[0035]所述的黄色素为天然黄色素，能在医药、化妆品、食品、饲料和工业制品等需要增色处理的产品中应用。
[0036]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0037](1)现有用来生产微生物天然色素的红曲霉，能产生的红曲色素已被鉴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株产黄色素的臭曲霉菌，其特征在于：所述的产黄色素的臭曲霉菌的名称为臭曲霉(Aspergillus foetidus)HC32，于2023年01月03日保藏于位于广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省科学院微生物研究所的广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:63106。2.权利要求1所述的产黄色素的臭曲霉菌在黄色素生产中的应用。3.一种黄色素的生产方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将上述产黄色素的臭曲霉菌种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养，得到发酵菌液；(2)将步骤(1)得到的发酵菌液进行固液分离，取菌体；(3)用有机溶剂振荡提取步骤(2)得到的菌体的胞内容物，得到的提取液即为胞内黄色素溶液。4.根据权利要求3所述的黄色素的生产方法，其特征在于：步骤(1)中所述的臭曲霉菌种子液通过如下步骤制备得到：将臭曲霉菌保存菌种活化后接种于种子培养基中进行摇瓶培养，得到处于对数生长期的臭曲霉菌；所述的活化的步骤如下：将臭曲霉菌保存菌种划线于PDA培养基平板中，于25～30℃培养4～7天，进行活化，获得平板种子；臭曲霉菌种子液的制备过程中：所述的接种的接种量为每50mL种子培养基接种两块直径为0.5～1cm的平板菌块；所述的种子培养基为PDB液体培养基；所述的摇瓶培养的条件为于25～35℃、100～200rpm培养24～48h；步骤(1)中所述的发酵培养基的组成如下：碳源20～80g/L、氮源4～60g/L、KH2PO
4 0～1g/L、MgSO4·
7H2O 0～0.5g/L、KC...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴振强，吴宇豪，胡曦，
申请(专利权)人：益为益生物制造江门有限公司，
类型：发明
国别省市：