一种高效表达羊生长激素的方法技术

本发明专利技术公开了一种高效表达羊生长激素的方法。本发明专利技术提供了一种制备羊生长激素的方法，包括如下步骤：1)制备表达羊生长激素的重组载体；该重组载体含有Trx标签、凝血酶酶切位点和羊生长激素；2)将所述重组载体和表达分子伴侣的载体共同转入大肠杆菌中，得到表达羊生长激素融合蛋白的重组菌；3)诱导表达所述重组菌，得到带有Trx标签的羊生长激素；4)凝血酶酶切所述带有Trx标签的羊生长激素蛋白，即得到羊生长激素；本发明专利技术的方法显著提高生长激素的可溶性表达，通过改变表达条件，及与分子伴侣共表达，大大的提高了羊生长激素的可溶性表达。达。

【技术实现步骤摘要】
一种高效表达羊生长激素的方法


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及一种高效表达羊生长激素的方法。

技术介绍

[0002]生长激素(growth hormone,GH)是由动物脑垂体前叶嗜酸性细胞合成、储存和分泌的一种蛋白质激素，其结构是一条约186
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191个氨基酸构成的肽链,分子质量约21kDa
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22kDa。生长激素不仅可以增加体重和身高,而且其参与机体糖、蛋白和脂质的代谢调节。动物的生长激素(如：牛)主要用来增加产奶量和瘦肉率,提高饲料转化率等。
[0003]关于生长激素的获得主要来自两个途径，第一个是直接从动物或者人的脑垂体中进行提取；第二个方法是通过基因工程的手段来获得。而第一种方法是很久之前科技相对落后时候的方法，当时人的生长激素含量只占到了脑垂体干重的4％
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8％，按一般的情况来讲一个垂体可得到3
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5mg的生长激素。到了20世纪70年代，随着科技尤其是基因工程技术的发展，通常使用第二种方法来制备大量的重组生长激素来代替天然的生长激素。19本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高羊生长激素可溶性原核表达的方法，包括如下步骤：1)将重组载体和表达分子伴侣的载体共同转入大肠杆菌中，得到重组菌；所述重组载体含有Trx标签和羊生长激素；2)诱导表达所述重组菌，实现提高羊生长激素可溶性表达。2.一种制备羊生长激素的方法，包括如下步骤：1)将重组载体和表达分子伴侣的载体共同转入大肠杆菌中，得到重组菌；所述重组载体含有Trx标签和羊生长激素；2)诱导表达所述重组菌，得到带有Trx标签的羊生长激素；3)去除所述带有Trx标签的羊生长激素中的Trx标签，即得到羊生长激素。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述重组载体为将含有羊生长激素编码基因的核酸分子插入到带有Trx标签的表达载体，得到载体；或，所述含有羊生长激素编码基因的核酸分子包括限制酶识别位点、凝血酶酶切位点、纯化标签、羊生长激素编码基因和另一限制酶识别位点。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述限制酶识别位点和所述另一限制酶识别位点分别为MscI和BamHI；或，所述纯化标签为His标签；或，所述羊生长激素为如下任一种：a)包括序列2第133
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322位的氨基酸序列的蛋白；b)在a)所示蛋白序列的末端带有标签的蛋白；c)序列2第125
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322位所示的蛋白；d)与a)
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c)中任一至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且具有相同功能的蛋白；或，所述含有羊生长激素编码基因的核酸分子为序列1。5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述带有Trx标签的表达载体源于pET
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32a(+)；或，所述带有Trx标签的表达载体为将Msc1和BamH1双酶切pET
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32a(+)载体后得到的线性载体骨架。6.根据权利要求1
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5中任一所述的方法，其特征在于：所述表达分子伴侣...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯健，刘克雄，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：