提高培养液细胞密度和高密度细胞培养的方法技术

本申请公开了提高培养液细胞密度和高密度细胞培养的方法。该提高培养液细胞密度的方法包括：培养细胞以得到培养液；和对所述培养液进行灌流浓缩。液进行灌流浓缩。

【技术实现步骤摘要】
提高培养液细胞密度和高密度细胞培养的方法


[0001]本申请涉及细胞培养
，具体涉及高密度细胞培养以提高目标蛋白表达的方法。

技术介绍

[0002]通过哺乳动物细胞培养生产基因工程蛋白是一种常用的获得治疗性蛋白如单克隆抗体的方法。哺乳动物细胞培养工艺的升级发展，显著促进了生物医药类产品包括抗体、融合性蛋白、酶等治疗性蛋白的合成生产。如下简要介绍当前生物制药工业界常用的生产工艺与新型开发的工艺类型。
[0003]现阶段，国内外生物制药行业使用哺乳动物工程细胞株表达生产单抗或融合蛋白，主要采用大规模的批式流加培养方式。
[0004]CN201210057859.7指出传统的批次流加补料哺乳动物细胞培养工艺(Fed batch，FB)作为常规方法，在研发上需要长时间的工艺摸索与大量的条件验证与重复，在cGMP (Current Good Manufacture Practices)生产上往往需要经过反复验证的、体积巨大的细胞培养设备与复杂的配套系统。即传统的哺乳动物细胞批式流加培养有一些难以克服的缺点，如最高细胞生长密度不高、单本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高培养液细胞密度的方法，所述方法包括：培养细胞以得到培养液；和对所述培养液进行灌流浓缩。2.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞表达目标产物，优选目标蛋白或多肽；和/或任选地，所述细胞包括哺乳动物细胞。3.如权利要求1所述的方法，其中所述培养步骤包括灌流培养；任选地，所述培养步骤的持续时间为1
‑
10天，优选2
‑
5天；和/或任选地，所述灌流培养的接种密度为0.3
‑
10
×
106个细胞/mL或更高。4.如权利要求1所述的方法，其中所述灌流浓缩步骤在所述培养步骤的最后一天或所述培养步骤结束后开始；任选地，所述灌流浓缩步骤持续1
‑
24小时，优选2
‑
5小时；和/或任选地，所述灌流浓缩步骤的细胞密度为浓缩前所述培养步骤的细胞密度的至少1.5倍，优选至少2倍，更优选至少6倍。5.如权利要求1所述的方法，其中所述灌流浓缩步骤包括使用切向...

【专利技术属性】
技术研发人员：张金亮，于乐，曹伟佳，田军，王伟钧，周伟昌，
申请(专利权)人：无锡药明生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：