一种溶葡萄球菌酶变体及其在益生菌中表达的方法及其应用技术

本发明专利技术提供本发明专利技术属于微生物技术和酶工程技术领域，具体涉及一种溶葡萄球菌酶变体及其在益生菌中表达的方法及其应用。本发明专利技术首先实现溶葡萄球菌酶在益生菌EcN中组成型分泌和表达，所得重组溶葡萄球菌酶具有良好的杀菌活性和相对广谱性。进一步定向改造溶葡萄球菌酶，以获得与原始蛋白质相比具有更高热稳定性的突变蛋白。基于上述特点，我们建立了一种低成本、简单的，即利用组成型表达的益生菌菌株EcN

【技术实现步骤摘要】
一种溶葡萄球菌酶变体及其在益生菌中表达的方法及其应用


[0001]本专利技术属于微生物技术和酶工程
，具体涉及一种溶葡萄球菌酶变体及其在益生菌中表达的方法及其应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]金黄色葡萄球菌是最臭名昭著和最广泛的细菌病原体之一，它不仅每年在世界范围内产生不可估量的简单皮肤感染。它也是肺炎和其他呼吸道感染、手术部位、假体关节、心血管疾病和院内菌血症的主要病原体，引起大量严重的侵袭性感染。乳腺炎是奶牛的常见病，其发病率高，流行速度快，防控难度大，不仅给奶农造成严重的经济损失，而且造成严重的食品安全问题。金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的最重要病原体之一。
[0004]溶葡萄球菌酶是一种锌依赖性甘氨酸内肽酶，可有效切割金黄色葡萄球菌的细胞壁，最初由模拟葡萄球菌分泌。目前，它已作为治疗伤口金黄色葡萄球菌感染的新型抗菌剂进入临床研究。成熟的葡萄球菌酶由两个结本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种溶葡萄球菌酶变体，其特征在于，所述溶葡萄球菌酶变体是在溶葡萄球菌酶基础上进行突变，并且所述溶葡萄球菌酶变体选自如下所示的突变体：突变体：E252C/N319C；所述溶葡萄球菌酶变体还修饰有短肽；所述溶葡萄球菌酶其氨基酸编号是以SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中的第一个氨基酸残基丙氨酸作为第248个氨基酸残基位点，依次顺延编号。2.如权利要求1所述溶葡萄球菌酶变体，其特征在于，所述短肽为柔性短肽，具体为(G4S)
n
和(GGG)
n
，其中，n取自1～5；进一步的，所述短肽修饰于溶葡萄球菌酶变体的末端。3.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1或2所述所述溶葡萄球菌酶变体。4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体含有权利要求3所述多核苷酸；进一步的，所述重组表达载体通过权利要求3所述多核苷酸有效地连接到表达载体上获得，所述表达载体为病毒载体、质粒、噬菌体、噬菌粒、黏粒或人工染色体中的任意一种或多种，所述质粒为pET28a；进一步的，将pET28a载...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢雪梅，张书航，祁庆生，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：