用于发酵生产L-赖氨酸的表达盒、菌株及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于发酵生产L

【技术实现步骤摘要】
用于发酵生产L
‑
赖氨酸的表达盒、菌株及其应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种用于发酵生产L
‑
赖氨酸的表达盒、菌株及其应用。

技术介绍

[0002]赖氨酸(lysine)又名2,6
‑
二氨基己酸，属于碱性氨基酸。赖氨酸具有重要的营养生理功能，在医药、食品和饲料工业中应用广泛。同时，其也可作为前体物质用于合成尼龙聚合材料。赖氨酸的生产途径主要包括蛋白水解法、化学合成法以及发酵法三种，其中，微生物发酵法具有生产成本低、生产强度高、特异性高、环境污染小等特点，成为赖氨酸工业化生产应用最广的方法。
[0003]用于生产赖氨酸的原核微生物主要包括棒状杆菌、短杆菌、诺卡氏菌、假单胞菌、埃希氏菌、芽孢杆菌等。谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum)是发酵生产氨基酸最为重要和安全的菌株，通过代谢改造提高它过量合成各种氨基酸的能力一直是研究热点。例如，过表达赖氨酸合成途径的相关基因和反馈抑制脱敏的相关基因，或者从葡萄糖代谢开始的能量供应途径强化以及优化细胞膜上赖氨酸转运蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒包含启动子和透明颤菌血红蛋白vhb基因，所述启动子包括Peftu或Psod。2.如权利要求1所述的表达盒，其特征在于，编码所述透明颤菌血红蛋白vhb基因的氨基酸序列如SEQ ID NO:20所示；优选地，所述透明颤菌血红蛋白vhb基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.如权利要求1所述的表达盒，其特征在于，所述Peftu启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，和/或，所述Psod启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。4.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸包含如权利要求1～3任一项所述的表达盒。5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括如权利要求1～3任一项所述的表达盒，或包括如权利要求4所述的核酸；优选地，所述重组表达载体的骨架质粒为pK18mob。6.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中转入了如权利要求1～3任一项所述的表达盒，或如权利要求4所述的核酸，或如权利要求5所述的重组表达载体；较佳地，所述基因工程菌的出发菌为谷氨酸棒状杆菌；更佳地，所述出发菌为C.glutamicum B253。7.如权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，当如权利要求1～3任一项所述的表达盒，或如权利要求4所述的核酸，或如权利要求5所述的重组表达载体被转入所述出发菌后，通过同源重组方式整合在所述基因工程菌的基因组上，或以非整合形式存在于所述基因工程菌中；优选地，所述表达盒整合在所述基因工程菌的基因组上。8.如权利要求6或7所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌不表达乳酸脱氢酶，例如其ldh基因被敲除；优选地，将如权利要求1～3任一项所述的表达盒，或如权利要求4所述的核酸，或如权利要求5所述的重组表达载体转入所述出发菌，使所述表达盒整合至其基因组上的ldh基因位点，所述ldh基因的locus_tag为SB89_13725。9.一种制备L
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：张明明，刘修才，
申请(专利权)人：CIBT美国公司，
类型：发明
国别省市：