一种检测猴痘的芯片及其制备方法和试剂盒技术

本申请公开了一种检测猴痘的芯片，包括固相载体、固定在所述固相载体上的猴痘蛋白，所述猴痘蛋白至少包括来源原核及真核表达的B16R、I1L、L1R、A29L、C19L、A30L、D6L、E8L、A33R、A35R、H3L中的三种蛋白。本申请还公开了一种检测猴痘的芯片的制备方法和芯片试剂盒。本申请通过优得到合适的蛋白组合，能够实现高特异性和高灵敏度地检测到猴痘病人的血样抗体，可大大提高检测效率，实现早期诊断，同时在高通量芯片的检测平台下，有效降低了成本，为人类健康带来福音。康带来福音。康带来福音。

【技术实现步骤摘要】
一种检测猴痘的芯片及其制备方法和试剂盒


[0001]本专利技术涉及体外免疫分析
，特别是涉及一种检测猴痘的芯片试剂盒。

技术介绍

[0002]猴痘病毒是痘病毒科正痘病毒属的一员。猴痘病毒导致猴痘，这是一种新出现的人畜共患疾病，被认为是天花根除后人类最重要的正痘病毒感染。许多动物物种，包括啮齿动物和猴子，都可以传播病毒。猴痘的临床表现与天花非常相似，即发烧前驱症状之后是皮疹期。淋巴结病是猴痘的典型症状。猴痘的病死率取决于病毒分支，它在1％到11％之间。中非和西非的11个国家报告了猴痘。这种疾病还出口到非洲大陆以外的美国、英国、以色列和新加坡。近年来，人类猴痘病例的频率和地理传播有所增加，对该疾病的发生、流行病学和生态学了解甚少。猴痘可以通过对病变标本进行聚合酶链反应来诊断。鉴于正痘病毒的血清学交叉反应性，血清学检测和抗原检测不能提供明确的诊断。改良安卡拉痘苗最近在美国获得批准，用于在感染高危人群中预防猴痘。目前尚无猴痘感染的专门治疗方法。

技术实现思路

[0003]为了克服现有技术的不足，本申请的目的在于提供一种检测猴痘的芯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测猴痘的芯片，包括固相载体、固定在所述固相载体上的猴痘蛋白，其特征在于，所述猴痘蛋白至少包括来源于原核表达的B16R、I1L、L1R、A29L、C19L、A30L、D6L、E8L、A33R、A35R、H3L蛋白中的三种蛋白。2.根据权利要求1所述的检测猴痘的芯片，其特征在于，所述猴痘蛋白在原核表达后的猴痘蛋白经过包涵体复性透析纯化，纯度大于90％。3.根据权利要求1所述的检测猴痘的芯片，其特征在于，所述固相载体为氨基化玻片或醛基化玻片。4.根据权利要求1所述的检测猴痘的芯片，其特征在于，所述猴痘蛋白的浓度在150μg/mL
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1000μg/mL。5.一种检测猴痘的芯片的制备方法，其特征在于，包括质粒构建：将待表达的猴痘蛋白基因插入Pet
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28b质粒中，获得重组表达载体，然后将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)，恒温培养箱过夜，次日随机挑取转化菌落提取质粒，测序得到正确折增的基因片段，菌落冷冻保存；蛋白纯化：取出冷冻的菌种，预冷处理后用超声破碎仪破碎，离心留沉淀即为包涵体，在沉淀中加入洗涤液进行重悬，然后将沉淀部分打散，置于冰上孵育后离心，收集上清部分，沉淀部分继续洗涤，直至离心后的上清与Bio
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Rad反应颜色变成浅蓝色或者棕色，跑SDS
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PAGE胶后进行上柱纯化，采用咪唑洗涤液洗涤并收集样本，获得纯化蛋白；包涵体蛋白复性：上述纯化蛋白经过分步方式用复性液冷藏过夜透析后，透析完立刻按体积比加入甘油保护剂；芯片组装：包涵体蛋白复性后采用点样仪器在固定载体上点制成图，在预定的温度和湿度下过夜，干燥后与芯片框架组装成蛋白芯片。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述洗涤液包含Na2HPO4、NaCl、尿素，其中Na2HPO4的pH值为7.4，尿...

【专利技术属性】
技术研发人员：方建民，谢社火，王弢，黄若磐，
申请(专利权)人：瑞博奥广州生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：