目标miRNA检测探针及其试剂盒与应用制造技术

本发明专利技术公开了目标miRNA检测探针及其试剂盒与应用。该目标miRNA检测探针为形成茎环结构的单链DNA分子，所述单链DNA分子由相互互补的杆状区域和环状区域组成，所述杆状区域具有8

【技术实现步骤摘要】
目标miRNA检测探针及其试剂盒与应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及目标miRNA检测探针及其试剂盒与应用。

技术介绍

[0002]MicroRNA(miRNA)是长度为19～25个核苷酸的非编码RNA，在细胞生长、分化和代谢等过程中具有重要的调控作用。现有研究表明，血液中某些miRNA的异常表达同心血管疾病、癌症、糖尿病等疾病具有显著的相关性，可作为潜在的疾病标志物，辅助疾病诊断。然而，miRNA序列较短、同族序列相似性极高、且丰度较低，在复杂样品中高效精确地检测miRNA面临极大的挑战。
[0003]现有的miRNA检测方法主要有RNA印迹(Northern blotting)、微阵列(microarray
‑
based assay)、实时定量PCR(quantitative real
‑
time PCR，qRT
‑
PCR)、表面增强拉曼光谱(surface enhanced Raman spectroscopy)、原位杂交(in situ hybridiz本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.目标miRNA检测探针，其特征在于：所述目标miRNA检测探针为形成茎环结构的单链DNA分子，所述单链DNA分子由相互互补的杆状区域和环状区域组成，所述杆状区域具有8
‑
10个核苷酸碱基对；所述环状区域具有17
‑
20个核苷酸，所述环状区域序列与所述目标miRNA序列至少具有16个核苷酸互补。2.根据权利要求1所述的目标miRNA检测探针，其特征在于：所述目标miRNA检测探针的5
’
端修饰有生物素。3.根据权利要求1或2所述的目标miRNA检测探针，其特征在于：所述杆状区域的序列由CGAAAAAAC和其互补序列组成。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的目标miRNA检测探针，其特征在于：所述目标miRNA检测探针序列如SEQ ID No.13
‑
15中任一所示。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的目标miRNA检测探针，其特征在于：所述目标miRNA为let
‑
7a、let
‑
7b、let
‑
7c、let
‑
7d和let
‑
7e中的至少一种。6.用于检测目标miRNA的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括权利要求1
‑
5中任一项所述的目标miRNA检测探针和用于纳米孔检测的系统，所述用于纳米孔检测的系统包括表面修饰链霉亲和素的磁珠、缓冲液A、缓冲液B、S1核酸酶和/或S1核酸酶抑制剂，所述缓冲液A和所述缓冲液B均包括LiCl，所述缓冲液B的LiCl浓度高于所述缓冲液A的LiCl浓度。7.检测或辅助检测目标miRNA的方法或者检测或辅助检测目标miRNA含量的方法，其特征在于：包括(1)混合权利要求1
‑
5中任一项所述的目标miRNA检测探针和待测样本获得杂交产物；(2)混合表面修饰链霉亲和素的磁珠和步骤(1)获得的所述杂交产物获得结合所述杂交产物的磁珠；(3)采用磁性分离提取步骤(2)获得的所...

【专利技术属性】
技术研发人员：翁婷，王德强，张庞，唐鹏，方绍熙，田荣，尹雅洁，殷博华，周硕，何石轩，谢婉谊，梁丽媛，
申请(专利权)人：中国科学院重庆绿色智能技术研究院，
类型：发明
国别省市：