一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌YJ0801及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YJ0801及其应用。本发明专利技术提供的乳酸乳球菌菌株YJ0801，保藏号为CGMCC NO.25642。该菌株从采自自然保护区的中华蟾蜍(Bufo gargarizans)肠道中分离筛选得到，在MRS琼脂培养基上生长良好，没有溶血现象，对多种抗生素敏感，不携带抗生素抗性基因，对酸、胆盐、人工胃液、人工肠液有较好的耐受能力，对人结肠癌细胞HT

【技术实现步骤摘要】
一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌YJ0801及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，特别是一种具有较强抑菌和抗炎作用的乳酸乳球菌YJ0801及其应用。

技术介绍

[0002]中华蟾蜍(Bufo gargarizans)在我国分布广、数量多，对环境适应能力强，还是我国传统药用两栖动物，蟾酥、蟾衣均有悠久的药用历史。最近，我们对中华蟾蜍体表和肠道微生物进行了16S rRNA测序和宏基因组测序研究，发现蟾蜍体表和肠道微生物非常丰富，多达数千种，包括众多对人体和动物有益的益生菌类群，是十分珍贵的微生物资源库。
[0003]细菌性肠炎是多种细菌如大肠杆菌、沙门菌、梭菌、痢疾杆菌等感染引起的消化系统疾病(如小肠炎和结肠炎等)，是人和家养动物的常见病，临床上主要使用各种抗生素进行治疗，但由于细菌容易产生抗生素抗性，常常达不到预期的效果。大量研究表明，乳酸菌作为益生菌的一类，被美国食品和药品监督管理局(FDA)认定是高度安全的食品级微生物。国内应用也越来越普遍，到目前为止，国家卫生健康委员会批准的《可用于食品的菌种名单》中共列入38种，其中包括大量乳酸菌，乳酸乳球菌也名列其中。作为肠道中的主要益生菌群之一，乳酸乳球菌可调节肠道菌群，可以抑制病原微生物的生长繁殖，所以利用乳酸乳球菌预防或抑制病原菌感染，调节肠道菌群结构已引起人们的广泛关注。因此，从中华蟾蜍(Bufo gargarizans)肠道中分离筛选抑菌抗炎能力强的乳酸菌，将其应用于功能性食品领域，具有广阔的应用前景。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌YJ0801，并提供该乳酸乳球菌YJ0801在制备具有抑菌、抗炎及调节人和动物肠道菌群的功能性食品中的应用。
[0005]本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：本专利技术提供一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YJ0801，其于2022年9月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.25642。
[0006]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801是从自然保护区采集的野生中华蟾蜍消化道中分离筛选获得。
[0007]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801通过采用细菌通用引物16S rRNA的27F/1492R对其基因组总DNA为模板进行PCR扩增，得到由1002碱基对(bp)组成的目的基因序列，序列如附表所示。将测序得到的基因序列输入NCBI数据库进行比对，其与GenBank中的标准菌株Lactococcus lactis strain Guimu 24相似率达99.90％，鉴定该菌株为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)。
[0008]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801，在MRS琼脂培养基上生长良好，菌落为乳白色，表面光滑，边缘整齐，不透明，对菌体形态进行镜检，革兰氏染色呈紫色。
[0009]本专利技术还提供所述乳酸乳球菌YJ0801在制备具有抑菌、抗炎的组合物上的应用，所述组合物包括食品或药品。
[0010]本专利技术还提供所述乳酸乳球菌YJ0801在制备调节人和动物肠道菌群的组合物上的应用，所述组合物包括食品或药品。
[0011]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801，对酸和胆盐有一定的耐受能力，对人结肠癌细胞HT
‑
29黏附能力较强，产乙酸能力较强。
[0012]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801，对乙型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、溶血性葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌具有抑菌能力。
[0013]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801，对的肠道菌群失调有较好的促进菌群恢复作用。
[0014]进一步的，所述乳酸乳球菌YJ0801，对DSS小鼠结肠炎模型有较好的预防和治疗效果，炎症指标明显降低。
[0015]本专利技术具有以下优点：
[0016]1、本专利技术提供的乳酸乳球菌YJ0801，分离筛选自保护区野生中华蟾蜍消化道，在MRS琼脂培养基上生长良好，对酸和胆盐有较好的耐受能力，对人结肠癌细胞HT
‑
29黏附能力强。
[0017]2、所述乳酸乳球菌YJ0801，对乙型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、单增李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、溶血性葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等常见肠道病原细菌抑菌能力较强。
[0018]3、本专利技术提供的乳酸乳球菌YJ0801，通过动物实验表明，对肠道菌群失调有较好的促进菌群恢复作用，对DSS小鼠结肠炎模型有较好的预防和治疗效果，炎症指标明显降低，因此，应用于食品或药品领域，不仅具有实际生产价值，而且对人和动物健康也具有非常重要的意义。
附图说明
[0019]图1为乳酸乳球菌YJ0801菌株与GenBank中其它菌株的系统进化关系图。
[0020]图2为本专利技术乳酸乳球菌YJ0801在MRS琼脂培养基上的菌落形态图。
[0021]图3为乳酸乳球菌YJ0801菌株的溶血性实验图。
[0022]图4为乳酸乳球菌YJ0801菌株发酵液短链脂肪酸GC
‑
MS测定图
[0023]图5为乳酸乳球菌YJ0801促进抗生素引起的小鼠肠道菌群失调后的恢复
[0024]图6为乳酸乳球菌YJ0801预防和治疗DSS诱导结肠炎小鼠结肠HE染色。
具体实施方式
[0025]为使本专利技术实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施方式中的附图，对本专利技术实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施方式是本专利技术一部分实施方式，而不是全部的实施方式。凡在本专利技术原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。
[0026]下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，培养基中所涉及的百分比，
均为质量体积比。
[0027]实施例1
[0028]乳酸乳球菌YJ0801的分离、筛选及分子生物学鉴定：
[0029]本专利技术提供一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YJ0801，其于2022年9月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.25642。
[0030]所述乳酸乳球菌YJ0801的16S rRNA序列如SEQ ID:1所示。
[0031]1.1、材料准备
[0032]中华蟾蜍采自四川自然保护区野生个体；
[0033]16s rRNA通用引物27F和1492R通用引物由生工生物工程(上海)有限公司合成，序列如下：
[0034]27F：5
‑
AGAGTTTGATCMTGGCTCAG
‑
3；
[0035]1492R：5
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)YJ0801，其特征在于：所述乳酸乳球菌YJ0801已于2022年9月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.25642。2.根据权利要求1所述的一种抑菌和抗炎作用较强的乳酸乳球菌YJ0801，其特征在于：所述乳酸乳球菌YJ0801，在MRS琼脂培养基上生长良好，菌落为乳...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐永军，
申请(专利权)人：益加生物科技成都有限公司，
类型：发明
国别省市：