一种PLGA纳米乳及其制备和在副结核疫苗中的应用制造技术

本发明专利技术提供了新型共装载多种免疫刺激剂与抗原共装载PLGA纳米乳的制备方法，使用PLGA包载全反式维甲酸并将纳米颗粒表面镀层盐酸多巴胺后，成功将重组抗原蛋白与CPG寡核苷酸装载于纳米颗粒表面，为防治肠道病菌副结核提供了新方法。供了新方法。供了新方法。

【技术实现步骤摘要】
一种PLGA纳米乳及其制备和在副结核疫苗中的应用


[0001]本申请属于生物
中的疫苗领域，具体地，本申请提供了一种共装载CPG寡核苷酸
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全反式维甲酸
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抗原蛋白的PLGA纳米乳及其制备和在副结核疫苗中的应用。

技术介绍

[0002]副结核病(Paratuberculosis)是由禽分支杆菌亚种的副结核分枝杆菌(Mycobacterium aviumsubsp paratuberculosis，MAP)引起的普通家畜和反刍动物慢性消化道疾病，严重影响畜牧业发展，亟需开发防治副结核分枝杆菌的新方法。传统的疫苗接种方式如皮下注射、肌肉注射和皮内注射由于组织限制性已被反复证明无法实现黏膜免疫的激活，为提高临床使用便利性，本研究旨在专利技术一种免疫途径简便且能激活肠道黏膜免疫的新型纳米疫苗以防治家畜副结核感染。
[0003]CpG ODN是人工合成的含有以非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸为核心的寡脱氧核苷酸，可模拟细菌DNA刺激包括人等多种哺乳动物的免疫细胞，也是一种Toll样受体9激动剂，直接激活B细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PLGA纳米乳，其特征在于，所述PLGA纳米乳装载有CPG寡核苷酸
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全反式维甲酸
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抗原蛋白。2.根据权利要求1所述的PLGA纳米乳，其中所述PLGA纳米乳通过将脂溶性的全反式维甲酸与水溶性的CPG寡核苷酸以及抗原蛋白共同装载在PLGA上制备而成。3.根据权利要求2所述的PLGA纳米乳，其中所述抗原蛋白为副结核分枝杆菌抗原。4.根据权利要求3所述的PLGA纳米乳，其中所述抗原蛋白为融合蛋白HBHA
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Ag85B
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Bfra。5.根据权利要求1
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4任一项所述的PLGA纳米乳的制备方法，其特征在于，所述方法包括：1)称取适量PLGA和全反式维甲酸，溶于油相，振荡混匀直至完全溶解；2)将1)制备的溶液中滴加到PVA溶液中中，在冰浴条件下超声乳化；3)将2)制得的溶液倒入PVA溶液中，搅拌4小时，挥发油相；4)将3)制得的包载atRA的PLGA纳米乳离心洗涤后，重悬于含有盐酸多巴胺的Tris缓冲液中，室温下混合反应；5)将制得的表面镀层盐酸多巴胺的纳米乳离心洗涤后，重悬于含CPG寡核苷酸和抗原蛋白的PBS溶液中，室温下混合；6...

【专利技术属性】
技术研发人员：周向梅，刘一朵，王元智，葛昕，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：