封闭方法技术

在用于测定的基板(20)上施加封闭组合物(116)的方法，包括：提供用于测定(20)的基板，其中用于测定的基板包括固体基板，该固体基板在其表面上设置有多个生物材料的离散点；以及将封闭组合物(116)作为直径小于生物材料的打印点的直径的颗粒或液滴喷洒在基板(20)上。印点的直径的颗粒或液滴喷洒在基板(20)上。印点的直径的颗粒或液滴喷洒在基板(20)上。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】封闭方法


[0001]本公开涉及用于在用于测定的基板比如微阵列上施加封闭组合物的方法和设备。

技术介绍

[0002]微阵列为生物材料(比如蛋白质、DNA、抗原或抗体)的二维阵列，其沉积并且固定在通常由官能化的玻璃或塑料制成的固体和常见的平坦基板上。通常选择提供与生物材料的充分结合，并且也避免材料的任何改性(比如蛋白质变性)的基板。
[0003]典型地，一旦生物材料的微阵列已经沉积在基板上，将封闭缓冲液施加至微阵列表面以防止不需要的材料结合至基板表面。然后使微阵列与样品反应，并且通过合适的微阵列分析技术(例如暗场显微镜)进行检测。这种基于微阵列的技术用于血型检定和供体疾病筛查的示例是Quotient的MosaiQ
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。
[0004]不需要的材料与基板表面的结合通常被称为“非特异性结合”。非特异性结合的影响是，其在检测期间导致高背景水平，并且因此可影响从背景信号检测阳性应答(前景)的能力。期望的分析物信号与不需要的背景的量通常称为“信噪比”。过高的背景水平和/或低信噪比可导致异常结果，包括，例如所谓的“假阳性”或“假阴性”结果。
[0005]为了缓解非特异性结合并且减少假阴性结果，通常增加基板上生物材料的浓度，以便在随后的光学检测期间增加对比度。尽管这可提高灵敏度，但是这种方法可通过增加假阳性结果的发生，造成特异性降低的问题。这种由打印生物材料浓度增加引起的“假阳性结果”问题通常表现为所谓的“彗尾”效应。彗尾是生物材料(例如抗体)之间反应的结果，最初作为微阵列的一部分打印在基板上，但已迁移到其预期的特定打印区域之外，并且在与指定感兴趣的样本的随后反应期间导致彗尾现象。彗尾现象能够影响相邻打印区域的结果，并且使感兴趣打印区域的反应状态的不确定性增加。不希望受到理论的束缚，认为这种彗尾可能是由于在微阵列上施加封闭缓冲液的过程造成的。过长的封闭时间可导致DNA点样被洗掉。微阵列特别容易出现这个问题，因为微阵列的表面通常是平的或基本上是平的。这种现象称为“彗尾”(Eisen，M.B.和Brown，P.O.(1999)DNA Arrays for Analysis of Gene Expression,Methods in Enzymology,303,179
‑
205)。其他人认为，“彗尾”可能是由于点样过程中使用了高浓度的生物材料(例如抗体)。
[0006]EP2640876A1(Honkanen等人)和EP2603325A1(Oliver等人)公开了将孔内校准特征打印到测定基板上的方法。在靶板上施加封闭材料，靶板由多个孔形成，因此不会像微阵列一样受到潜在的“彗尾”效应的影响，并且该文档没有提供解决该问题的任何方案。
[0007]WO2013/037886(Causette等人)公开了用于检测样品中分析物的方法。尽管将封闭材料喷洒在硝化纤维膜上，但是该膜不会像微阵列一样受到潜在的“彗尾”效应的影响，并且该文档也没有提供解决该问题的任何方案。
[0008]本专利技术的目的是消除和/或缓解与现有技术和/或传统方法和系统相关的限制和/或缺点。

技术实现思路

[0009]根据第一方面，提供了在用于测定的基板上施加封闭组合物的方法，该方法包括：
[0010]提供用于测定的基板；和
[0011]将封闭组合物喷洒在基板的至少一部分上。
[0012]方法可包括将封闭组合物喷涂在基板的至少一部分上。
[0013]用于测定的基板可包括固定化的物质或组合物。物质或组合物可固定至基板的表面。物质或组合物可固定在基板(表面)上的一个或多个离散位置。物质或组合物可以阵列的形式固定，即，在基板(表面)上的多个离散位置。基板的表面上可以具有该物质或组合物的一维、二维或三维阵列。典型地，基板的表面上可以具有该物质或组合物的二维阵列。通常，基板的表面，例如物质或组合物固定在其上的表面，是平坦的或平面的，或者基本上是平坦的。术语“平坦”和“平面”将理解为指宏观水平上的表面形状，即，在此理解为表面不包括可配置为接收物质或组合物的任何孔或槽。而是，物质或组合物在基本上连续的表面上被固定在基板的不同和/或离散位置。基板的至少一部分，例如，配置为接收该物质或组合物的基板表面的一部分，可以没有孔或凹部。
[0014]该物质或组合物可包括生物材料。
[0015]术语“生物材料”在本文中将理解为包括任何生物材料，无论是天然的还是合成的。
[0016]通常，生物材料可包含肽、蛋白质(包括重组蛋白)、氨基酸、核酸(DNA和/或RNA)、寡核苷酸、脂质、碳水化合物、酶、代谢产物、抗体(包括单克隆和/或多克隆抗体及其任何(抗原结合)片段)、抗原、细胞、红细胞、血浆、血清等。
[0017]在实施方式中，生物材料可包含抗体、基本上由抗体组成或由抗体组成。
[0018]在另一实施方式中，生物材料可包含红细胞、基本上由红细胞组成或由红细胞组成。
[0019]基板可称为“芯片”。
[0020]可提供单个基板，例如芯片。在这种情况下，方法可包括将封闭组合物喷洒至单个基板(例如芯片)上。
[0021]可提供多个基板，例如芯片。在这种情况下，方法可包括将封闭组合物喷洒至多个基板(例如芯片)上。
[0022]方法可包括将封闭组合物喷洒在生物材料的至少一部分上。
[0023]用于测定的基板可包括固体基板，固体基板在其表面上，例如在其基本平坦的表面上，具有多个离散量的(固定的)生物材料，例如点样。
[0024]用于测定的基板可包括微阵列或可为微阵列。
[0025]典型地，固定到基板表面的生物材料的离散量(例如点样)的大小(例如直径)可为约100μm至300μm，例如约150μm至250μm，典型地为约210μm+/
‑
40μm。
[0026]封闭组合物可包含封闭缓冲液、可由封闭缓冲液组成或可基本上由封闭缓冲液组成。
[0027]应认识到，施加至基板(例如微阵列)上的封闭组合物的选择可取决于使用的微阵列，尤其是取决于所分析的基板材料、生物材料和/或样品。
[0028]封闭组合物，例如封闭缓冲液，可包含封闭剂，例如牛血清白蛋白(BSA)、血清和/
或鱼胶。封闭组合物可进一步包含碱缓冲液，例如Tris缓冲盐水(TBS)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。
[0029]典型地，固体基板可由玻璃、硅或比如硝化纤维的聚合物制成。
[0030]固体基板可任选地涂覆有涂层，可以选择改善或改变生物材料的性质或与生物材料的相互作用(包括粘附、固定、稳定等)的涂层。涂层可包含比如铝或金的金属、比如亲水性聚合物或亲水性聚合物(例如聚丙烯酰胺等)的聚合物或由包含比如铝或金的金属、比如亲水性聚合物或亲水性聚合物(例如聚丙烯酰胺等)的聚合物组成或基本上由包含比如铝或金的金属、比如亲水性聚合物或亲水性聚合物(例如聚丙烯酰胺等)的聚合物组成。
[0031]该方法可包括使用喷涂装置将封闭本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在用于测定的基板上施加封闭组合物的方法，所述方法包括：提供用于测定的基板，其中所述用于测定的基板包括固体基板，所述固体基板在其表面上具有多个生物材料的离散点；和将所述封闭组合物作为直径小于生物材料打印点的直径的颗粒或液滴喷洒在所述基板上。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法包括将所述封闭组合物喷涂在所述基板上。3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述基板在其表面上具有所述生物材料的阵列。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述用于测定的基板包括微阵列。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述基板的表面上的生物材料点的尺寸为约100μm至300μm。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述封闭组合物包括封闭缓冲液、基本上由封闭缓冲液组成或由封闭缓冲液组成。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述生物材料包括肽、蛋白质、氨基酸、核酸、寡核苷酸、DNA、RNA、脂质、碳水化合物、酶、代谢产物、抗体、抗原、细胞、红细胞、血浆或血清。8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括使用喷涂装置将所述封闭组合物喷洒在所述基板上。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述喷涂装置包括气压驱动的喷涂装置。10.根据权利要求8所述的方法，其中所述喷涂装置包括超声雾化器。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述基板的表面基本上是平坦的。12.一种在用于测定的基板上施加封闭组合物的方法，所述方法包括：提供用于测定的基板，其中所述用于测定的基板包括固体基板，所述固体基板在其表面上具有多个生物材料的离散点，并且其中所述基板的表面基本上是平坦的；和将所述封闭组合物喷洒在所述基板上。13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括保持固定至其的生物材料的完整性。14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，包括在后续分析期间提高特异性和/或灵敏度。15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述方法减少、避免和/或防止异常结果的发生，任选地其中所述方法减少...

【专利技术属性】
技术研发人员：埃梅特，
申请(专利权)人：瑞士商数有限公司，
类型：发明
国别省市：