一种金鱼幼苗专用的液体开口饵料的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种金鱼幼苗专用的液体开口饵料制备方法。首先将小球藻、金藻、亚心形扁藻藻泥按比例混合成混合藻泥，在混合藻泥中，加入酶解液，混合均匀后进行首次酶解；酶解后离心获得酶解的混合藻蛋白沉淀物；取混合藻蛋白沉淀物，加入去离子水、复合蛋白酶液进行两次酶解两次超滤，获得蛋白酶解超滤液；将蛋白酶解超滤液进行循环浓缩，得到混合藻蛋白肽浓缩液；利用混合藻蛋白肽浓缩液配制1号饵料、2号饵料和3号饵料。采用本发明专利技术制备的混合藻蛋白肽浓缩液喂养的金鱼幼苗适口性强、有营养易消化，生长快，为开口期金鱼幼苗健康快速生长和规模化鱼苗养殖创造良好基础。规模化鱼苗养殖创造良好基础。

【技术实现步骤摘要】
一种金鱼幼苗专用的液体开口饵料的制备方法


[0001]本专利技术属于鱼类人工饵料制备方法及应用。具体涉及一种金鱼幼苗专用的液体开口饵料制备方法。

技术介绍

[0002]金鱼卵孵化成苗都要经过开口阶段。在这个阶段，传统养殖金鱼的幼苗死亡率较高。这主要与自然界环境中不能够提供充足的高营养、适口性的开口饵料有关。而早期金鱼卵在3月份正值春寒水冷，水体中活体饵料较少，很难满足规模化金鱼苗繁育的要求。如金鱼初孵仔鱼其口裂较小，开口饵料只能摄食粒径小于60μm的饵料，而早期金鱼卵在3月份正值春寒水冷，水体中活体饵料如卤虫卵、单细胞藻较少，很难满足规模化金鱼苗繁育的要求。
[0003]目前大多采用人工饵料基本是固体饵料，包括微囊固体饵料，主要成分是鱼粉、干燥单细胞藻、强化浮游动物、蛋黄等方法。由于金鱼幼苗开口期只能部分被吞噬，所投入固体饵料2/3左右常常沉淀于池底，增加饲养成本和池底沉积饵料分解污染水质。
[0004]针对以上存在的金鱼苗养殖开口饵料的技术问题，本专利技术专利研制一种金鱼苗专用的液体开口饵料的制备方法。该液体开口饵料是一种适口性、有营养、易消化的金鱼苗开口饵料，能够保持水质稳定性，为金鱼开口期幼苗度过开口期，健康生长和规模化金鱼苗开口期养殖创造良好饵料基础。

技术实现思路

[0005]本专利技术将培养小球藻、金藻、塔胞藻、亚心形扁藻等单细胞藻进行按比例混合、二次酶解超滤、循环浓缩制备成混合藻蛋白肽浓缩液，作为金鱼苗养殖液体开口饵料，其营养成分比较全面，饵料的营养均衡性好，饵料无毒、无害，在水中的稳定性好、不污染水质。同时能有效提高金鱼苗开口期人工养殖的生长速度和成活率，解决现有存在的金鱼苗养殖开口饵料的技术问题，满足规模化金鱼苗培育的需求。
[0006]为了解决上述金鱼苗开口饵料的技术问题，本专利技术实施技术方案如下：1、制备单细胞藻混合藻（1）将小球藻（Chlorella vulgaris）藻泥、金藻（Isochrysis zhanjiangensis）藻泥、塔胞藻（Pyramimonas sp.）藻泥、亚心形扁藻（Platymonas subcordiform is）的单细胞藻泥按如下比例混合成混合藻泥：小球藻藻泥
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30
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35金藻藻泥
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25
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30塔胞藻藻泥
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10
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15亚心形扁藻藻泥
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20
‑
25；上述单细胞藻为福建师范大学生命科学学院藻类研究室，通过人工培养单细胞藻方式培养得到，并各自通过小型压滤机过滤成藻泥；藻泥含水量20
‑
23%。
[0007]2、制备混合藻蛋白沉淀物（1）酶解液配制，其重量份数比为：果胶酶
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8g蜗牛酶
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10
‑
12g纤维素酶
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5g去离子水
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6000
‑
7000g；混合藻泥酶解液配制后用质量分数36%的浓盐酸调节pH至4.0～5.0；（2）混合藻酶解在混合藻泥中，加入混合藻泥重量份的0.5
‑
1.0％的酶解液，混合均匀后进行首次酶解，首次酶解条件为：首次酶解温度45～60℃、首次酶解时间2～3h、首次酶解时搅拌转速为150 rpm；首次酶解后于离心机中按5000 rpm进行离心，离心时间20 min，去除上清液，获得酶解的混合藻蛋白沉淀物；3、制备混合藻蛋白肽浓缩液（1）复合蛋白酶液配制：胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、水按1：1：1：20重量份比例混合；（2）酶解
‑
超滤两步法制备蛋白酶解超滤液取1重量份酶解的混合藻蛋白沉淀物，加入3重量份去离子水溶解，再加入酶解的混合藻蛋白沉淀物重量的0.3～0.4％的复合蛋白酶液，调整酶解温度45～55℃、pH至7.5～8.0条件下进行30～50min第一次酶解，酶解结束后进行第一次超滤，获得第一次的蛋白酶解超滤液；第一次超滤条件：中空纤维式超滤膜孔径为0.01μm，压力为0.25～0.35MPa；在第一次的蛋白酶解超滤液中，加入酶解的混合藻蛋白沉淀物重量的0.2～0.3％复合蛋白酶，调整温度50～60℃条件下进行第二次酶解，第二次酶解时间40～60min；酶解结束后先在100℃水浴中灭活处理15min，迅速冷却至室温，之后进行第二次超滤，获得第二次蛋白酶解超滤液；第二次超滤条件：中空纤维式超滤膜孔径为孔径0.01μm，压力为0.25～0.35MPa；（3）制备蛋白肽浓缩液采用截留分子量为500～2000的纳滤膜，对第二次蛋白酶解超滤液进行循环浓缩，超滤液循环浓缩过程中，控制料液温度为55～60℃，调节膜进口压力为1.5～1.8Mpa，循环浓缩过程流量在120～180L/min；待调节膜进口压力降至1.0MPa时，停止循环浓缩得到混合藻蛋白肽浓缩液；4、配制金鱼幼苗开口期不同阶段液体开口饵料1号饵料：以混合藻蛋白肽浓缩液直接作为金鱼幼苗开口期第一阶段液体开口饵料，将该开口饵料编为1号饵料；2号饵料：以含有98％的混合藻蛋白肽浓缩液、2％复合维生素液混合作为金鱼幼苗开口期第二阶段液体开口饵料，将该开口饵料编为2号饵料；3号饵料：以含有90％的混合藻蛋白肽浓缩液、2％复合维生素液、3％啤酒酵母粉、5％丰年虫混合作为金鱼幼苗开口期第三阶段液体开口饵料，将该开口饵料编为3号饵料；所述的复合维生素液，其配方为：每kg复合维生素液中含有：20
‑
30g维生素A、2g 维生素D3、40
‑
50g维生素E、5g维生素K3、30g维生素B1、2g维生素B2、5g维生素B12、20
‑
25g烟
rpm；酶解后进行离心，离心机转速于5000 rpm，离心20 min，去除上清液。
[0013]3、制备混合藻蛋白肽浓缩液（1）复合蛋白酶液，取10g胰蛋白酶、10g碱性蛋白酶、10g木瓜蛋白酶、200g水，混合配制成复合蛋白酶液。
[0014]（2）采用酶解
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超滤两步法制备蛋白酶解超滤液取100克混合藻酶解的蛋白沉淀物，加300克去离子水溶解，再加入0.3克的复合蛋白酶液，控制酶解温度50℃、pH 8.0下进行40min酶解，酶解后进行第一次超滤，获得第一次的蛋白酶解超滤液；超滤条件：中空纤维式超滤膜孔径为0.01μm，压力为0.3MPa。
[0015]在第一次蛋白酶解超滤液中，加入0.3的复合蛋白酶，在温度50℃条件下进行第二次酶解，酶解时间60min；酶解结束后先在100℃水浴中灭活处理15min，迅速冷却至室温，之后进行第二次超滤，获得第二次蛋白酶解超滤液；超滤条件：中空纤维式超滤膜孔径为孔径0.01μm，压力为0.25MPa；（3）制备蛋白肽浓缩液采用截留分子量为500～2000的纳滤膜对二次蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种金鱼幼苗专用的液体开口饵料的制备方法，其特征在于：（1）制备单细胞藻混合藻1）将小球藻（Chlorella vulgaris）藻泥、金藻（Isochrysis zhanjiangensis）藻泥、塔胞藻（Pyramimonas sp.）藻泥、亚心形扁藻（Platymonas subcordiform is）的单细胞藻泥按如下比例混合成混合藻泥： 小球藻藻泥
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30
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35 金藻藻泥
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25
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30 塔胞藻藻泥
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10
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15 亚心形扁藻藻泥
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25；（2）制备混合藻蛋白沉淀物1）酶解液配制，其重量份数比为：果胶酶
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8g蜗牛酶
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12g纤维素酶
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5g去离子水
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6000
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7000g；混合藻泥酶解液配制后用质量分数36%的浓盐酸调节pH至4.0～5.0；2）混合藻酶解在混合藻泥中，加入混合藻泥重量份的0.5
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1.0％的酶解液，混合均匀后进行首次酶解；首次酶解后于离心机中按5000 rpm进行离心，离心时间20 min，去除上清液，获得酶解的混合藻蛋白沉淀物；（3）制备混合藻蛋白肽浓缩液1）复合蛋白酶液配制：胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、水按1：1：1：20重量份比例混合；2）酶解
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超滤两步法制备蛋白酶解超滤液取1重量份酶解的混合藻蛋白沉淀物，加入3重量份去离子水溶解，再加入酶解的混合藻蛋白沉淀物重量的0.3～0.4％的复合蛋白酶液进行第一次酶解结束后进行第一次超滤，获得第一次的蛋白酶解超滤液；在第一次的蛋白酶解超滤液中，加入酶解的混合藻蛋白沉淀物重量的0.2～0.3％复合蛋白酶进行第二次酶解，酶解结束后先在100℃水浴中灭活处理15min，迅速冷却至室温，之后进行第二次超滤，获得第二次蛋白酶解超滤液；3）制备蛋白肽浓缩液采用截留分子量为500～2000的纳滤膜，对第二次蛋白酶解超滤液进行循环浓缩，待调节膜进口压力降至1.0MPa时，停止循环浓缩得到混合藻蛋白肽浓缩液；（4）配制金鱼幼苗开口期不同阶段液体开口饵料1号饵料：以混合藻蛋白肽浓缩液直接作为金鱼...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄镇，黄祖新，
申请(专利权)人：福建师范大学，
类型：发明
国别省市：