一种红霉素药膏中主要物质及干扰物的测定方法技术

本发明专利技术属于药物检测技术领域，特别是涉及一种红霉素药膏中主要物质及干扰物的测定方法。包括以下步骤：1)供试品溶液的制备；2)对照溶液的制备；3)系统适应性对照品溶液的制备；4)检测。本发明专利技术采用优化条件的前处理和检测方法，能够使目标组分和干扰物有效分离，且确定了红霉素氧化杂质(干扰物H)，保证了红霉素药膏产品的质量，中国药典红霉素有关物质的杂质谱进行补充完善，使其质量标准得到提升。使其质量标准得到提升。使其质量标准得到提升。

【技术实现步骤摘要】
一种红霉素药膏中主要物质及干扰物的测定方法


[0001]本专利技术属于药物检测
，特别是涉及一种红霉素药膏中主要物质及干扰物的测定 方法。

技术介绍

[0002]红霉素软膏是红霉素与适量基质均匀混合制成的半固体制剂，其原料药红霉素是由红霉 素链霉菌发酵产生，为大环内酯类抗生素。红霉素软膏的现行法定检测标准收载于《中国药 典》2020年版二部，标准中含性状、化学鉴别、装量、粒度、微生物限度检查、含量测定等 项目。然而仅根据法定检测标准，无法对红霉素软膏质量进行真正全面的比较，对于药物质 量而言，有关物质是一个重要的评价指标。但是，目前现有的红霉素软膏检验方法中无法对 红霉素软膏的有关物质进行快速、准确的测定(仅存在红霉素原料的有关物质检测方法，收 载于《中国药典》2020年版二部)，所以根据现有的红霉素软膏检测方法所得出的结果无法 反映出红霉素软膏的真实质量。
[0003]因此，急需开发出一种可以真实反映出红霉素软膏的真实质量的检测方法。

技术实现思路

[0004]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种红霉素药膏中主要物质及干 扰物的测定方法，用于解决现有技术中的问题。
[0005]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种红霉素药膏中主要物质及干扰物的测 定方法，包括以下步骤：红霉素药膏中主要物质及干扰物的测定方法，包括以下步骤：
[0006]1)供试品溶液的制备：称取红霉素药膏样品，加入石油醚溶解，并加入磷酸盐的醇溶液 萃取、静置分层，取续滤液作为供试品溶液；
[0007]2)对照溶液的制备：移取供试品溶液，加入磷酸盐的醇溶液稀释并定容、摇匀作为对照 溶液；
[0008]3)系统适应性对照品溶液的制备：在系统适应性对照品加入甲醇溶解、用磷酸盐稀释定 容，摇匀，得到系统适应性对照品溶液；所述系统适应性对照品包括红霉素A、红霉素B、 红霉素C、干扰物A、干扰物B、干扰物C、干扰物D、干扰物E、干扰物F、干扰物H；
[0009]4)检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液、对照溶液、系统适应性对照品溶液， 将获得的供试品溶液的液相色谱图，与系统适应性对照品溶液的液相色谱图进行比较，并根 据自身对照法获得相对保留时间和色谱峰面积，确定供试品溶液中红霉素A、红霉素B、红 霉素C、干扰物A、干扰物B、干扰物C、干扰物D、干扰物E、干扰物F和干扰物H的含 量。
[0010]在本专利技术的一些实施方式中，所述步骤1)中，所述红霉素药膏样品加入的质量g，与石 油醚加入的体积ml之比为4:12～4:15。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，步骤1)中，所述红霉素药膏样品加入的质量g，与磷酸盐 的醇溶液加入的体积ml之比为4：5～4：15。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，步骤1)中，所述磷酸盐的醇溶液选自磷酸盐甲醇；优选 的，所述磷酸盐甲醇为含体积百分比为60％以上的磷酸盐的甲醇溶液，其中，所述磷酸盐的 pH为7.5～8.5。
[0013]在本专利技术的一些实施方式中，步骤1)中，所述萃取的温度为20℃～30℃，萃取时间为 2min～10min。
[0014]在本专利技术的一些实施方式中，所述磷酸盐选自磷酸氢二钾。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，步骤3)中，所述系统适应性对照品加入的质量mg，与甲 醇加入的体积ml之比为25：2～25：5。
[0016]在本专利技术的一些实施方式中，步骤3)中，所述系统适应性对照品加入的质量mg，与磷 酸盐加入的体积ml之比为25：3～25：7.5。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，步骤3)中，磷酸盐选自磷酸氢二钾，所述磷酸盐的pH为 7.9～8.1。
[0018]在本专利技术的一些实施方式中，步骤4)中，所述高效液相色谱法的色谱条件包括如下条 件的任一项或多项：
[0019]色谱柱：Waters XTERRA C18色谱柱，250mm
×
4.6mm，3.5μm；
[0020]检测波长：205～215nm；
[0021]流动相：水
‑
磷酸氢二钾溶液
‑
乙腈，其中，A相：水、磷酸氢二钾溶液与乙腈的体积比 为32～37：2～8：57～63；B相：水
‑
磷酸氢二钾溶液
‑
乙腈的体积比为47～53：2～8：42～48；
[0022]进样量为90～100μl；
[0023]流速：0.8～1.2ml/min；
[0024]柱温：60～68℃；
[0025]分析时间：75min；
[0026]梯度洗脱。
[0027]在本专利技术的一些实施方式中，所述梯度洗脱的具体程序为：
[0028]0‑
48min，A相：B相体积比为98：2～98：2；
[0029]48
‑
50min，A相：B相体积比为98：2～0：100；
[0030]50
‑
57min，A相：B相体积比为0：100～0：100；
[0031]57
‑
58min，A相：B相体积比为0：100～98：2；
[0032]58
‑
75min，A相：B相体积比为98：2～98：2。
[0033]本专利技术另一方面提供一种红霉素药膏中干扰物H的测定方法，包括以下步骤：
[0034]a)供试品溶液的制备：称取红霉素药膏样品，加入氧化剂氧化、甲醇溶解，并加入磷 酸盐溶液稀释定容后，得到供试品溶液；
[0035]b)干扰物H对照品溶液的制备：取干扰物H对照品，加入甲醇溶解、用磷酸盐稀释定 容，摇匀，得到干扰物H对照品溶液，其中，所述干扰物H对照品为氧化红霉素A；
[0036]c)检测：采用液相色谱
‑
质谱联用分别测定供试品溶液、干扰物H对照品溶液，将获得的 供试品溶液的液相色谱图，与干扰物H对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时 间和色谱峰面积，确定供试品溶液中干扰物H的含量；并根据质谱测定干扰物H分子量。
[0037]在本专利技术的一些实施方式中，步骤a)中，所述氧化剂选自双氧水，优选的，所述红霉素 药膏样品加入的质量g，与双氧水加入的体积ml之比为20:1～20:3；更优选的，所述双氧水的 溶液浓度为8～15％。
[0038]在本专利技术的一些实施方式中，步骤a)中，所述红霉素药膏样品加入的质量g，与甲醇加 入的体积ml之比为25:2～25:5。
[0039]在本专利技术的一些实施方式中，步骤a)中，所述红霉素药膏样品加入的质量g，与磷酸盐加 入的体积ml之比为25:3～25:7.5。
[0040]在本专利技术的一些实施方式中，步骤a)和/或步骤b)中，所述磷酸盐选自磷酸氢二钾，所 述磷酸氢二钾的pH值为7.9～8.1。
[0041]在本专利技术的一些实施方式中，步骤b)中，所述干扰物H对照品加入的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种红霉素药膏中主要物质及干扰物的测定方法，包括以下步骤：1)供试品溶液的制备：称取红霉素药膏样品，加入石油醚溶解，并加入磷酸盐的醇溶液萃取、静置分层，取续滤液作为供试品溶液；2)对照溶液的制备：移取供试品溶液，加入磷酸盐的醇溶液稀释并定容、摇匀作为对照溶液；3)系统适应性对照品溶液的制备：在系统适应性对照品加入甲醇溶解、用磷酸盐稀释定容，摇匀，得到系统适应性对照品溶液；所述系统适应性对照品包括红霉素A、红霉素B、红霉素C、干扰物A、干扰物B、干扰物C、干扰物D、干扰物E、干扰物F、干扰物H；4)检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液、对照溶液、系统适应性对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与系统适应性对照品溶液的液相色谱图进行比较，并根据自身对照法获得相对保留时间和色谱峰面积，确定供试品溶液中红霉素A、红霉素B、红霉素C、干扰物A、干扰物B、干扰物C、干扰物D、干扰物E、干扰物F和干扰物H的含量。2.如权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤1)中，还包括以下条件中的任一项或多项：A1)步骤1)中，所述红霉素药膏样品加入的质量g，与石油醚加入的体积ml之比为4:12～4:15；A2)步骤1)中，所述红霉素药膏样品加入的质量g，与磷酸盐的醇溶液加入的体积ml之比为4：5～4：15；A3)步骤1)中，所述磷酸盐的醇溶液选自磷酸盐甲醇；优选的，所述磷酸盐甲醇为含体积百分比为60％以上的磷酸盐的甲醇溶液，其中，所述磷酸盐的pH为7.5～8.5；A4)步骤1)中，所述萃取的温度为20℃～30℃，萃取时间为2min～10min。3.如权利要求2所述的测定方法，其特征在于，所述磷酸盐选自磷酸氢二钾。4.如权利要求1所述的测试方法，其特征在于，步骤3)中，还包括以下条件中的任一项或多项：B1)步骤3)中，所述系统适应性对照品加入的质量mg，与甲醇加入的体积ml之比为25：2～25：5；B2)步骤3)中，所述系统适应性对照品加入的质量mg，与磷酸盐加入的体积ml之比为25：3～25：7.5；B3)步骤3)中，磷酸盐选自磷酸氢二钾，所述磷酸盐的pH为7.9～8.1。5.如权利要求1所述的测试方法，其特征在于，步骤4)中，所述高效液相色谱法的色谱条件包括如下条件的任一项或多项：C1)色谱柱：Waters XTERRA C18色谱柱，250mm
×
4.6mm，3.5μm；C2)检测波长：205～215nm；C3)流动相：水
‑
磷酸氢二钾溶液
‑
乙腈，其中，A相：水、磷酸氢二钾溶液与乙腈的体积比为32～37：2～8：57～63；B相：水
‑
磷酸氢二钾溶液
‑
乙腈的体积比为47～53：2～8：42～48；C4)进样量为90～100μl；C5)流速：0.8～1.2ml/min；C6)柱温：60～68℃；C7)分析时间：75min；
C8)梯度洗脱。6.如权利要求5所述的测试方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑斌，刘斐，占垚，徐子平，
申请(专利权)人：上海正大通用药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：