一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法及诊断试剂盒技术

一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法，包括一个制备田鼠巴贝虫感染的BALB/c小鼠红细胞载玻片的步骤；一个配制样品稀释液、荧光抗体稀释液和洗液的步骤；一个田鼠巴贝虫感染的BALB/c小鼠红细胞载玻片室温平衡的步骤；对待测样品、阳性对照、阴性对照稀释静置；然后吸掉上清液，加入荧光标记二抗；吸掉二抗溶液；将载玻片置于荧光显微镜下观察荧光，判定结果，有绿色荧光的为阳性反应，无绿色荧光则未有免疫反应，表示样本中不含有田鼠巴贝虫IgG抗体。本发明专利技术还提供了实现田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法的诊断试剂盒。本发明专利技术能对田鼠巴贝虫进行快速灵敏的检测，操作简便。简便。简便。

【技术实现步骤摘要】
一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法及诊断试剂盒


[0001]本专利技术属于生物医学领域，涉及体外诊断技术，具体来说是一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法及诊断试剂盒。

技术介绍

[0002]巴贝虫病(babesiosis)是由于人或牛、马、犬等哺乳动物感染了巴贝虫(Babesia) 所引起的一种人兽共患寄生虫病，巴贝虫主要寄生于人或其它哺乳动物红细胞内，经蜱媒或输血、血制品传播。感染人体的巴贝虫主要有田鼠巴贝虫(B.microti)、分歧巴贝虫(B.divergens)、牛巴贝虫(B.bovis)和猎户巴贝虫(B.venatorum)等，而在全球感染病例中田鼠巴贝虫为感染人体最主要的虫种。巴贝虫首次在1888年由匈牙利科学家在牛体内发现，1957年发现第一例人体巴贝虫病感染病例，至今全球包括欧洲、亚洲、非洲、南北美洲及澳洲等均有人巴贝虫病病例报道，而其中美国是报道人巴贝虫病病例最多的国家，主要流行人田鼠巴贝虫病，欧洲也是巴贝虫病报道较多的一个地区，主要分布在意大利和德国。近年来，巴贝虫病在许多国家都被定为法定须呈报传染病，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1)一个制备田鼠巴贝虫感染的BALB/c小鼠红细胞载玻片的步骤:(2)一个配制样品稀释液，荧光抗体稀释液和洗液的步骤；(3)一个田鼠巴贝虫感染的BALB/c小鼠红细胞载玻片的平衡步骤：将载玻片从
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80℃取至室温中，放置10分钟；(4)对待测样品、阳性对照、阴性对照用样本稀释液1:16稀释，室温静置10分钟，将所有样本用样本稀释液倍比稀释5个梯度，分别为1:16、1:32、1：64、1:128、1:256，将所有稀释样本每孔加入10μL，所述的阳性对照为抗田鼠巴贝虫可溶性总蛋白的兔阳性血清；(5)吸掉上清液，每孔加入20ul洗液，10秒吸掉洗液，再重复一次；(6)加入荧光标记二抗；(7)吸掉二抗溶液，每孔加入20ul洗液，10秒吸掉洗液，再重复一遍；(8)结果判定：将载玻片置于荧光显微镜下观察荧光，判定结果，有绿色荧光的为阳性反应，无绿色荧光则未有免疫反应，表示样本中不含有田鼠巴贝虫IgG抗体。2.根据权利要求1所述的田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法，其特征在于：步骤(2)所述的样品稀释液和荧光抗体稀释液均为0.01M的磷酸盐缓冲液PBS，所述的洗液是将体积百分比浓度为0.05％吐温20溶于0.01M磷酸盐缓冲液中。3.根据权利要求1所述的一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法，其特征在于：步骤(4)所述的待测样品、阳性对照、阴性对照，每孔加入10ul，盖上盖子，室温放置90分钟。4.根据权利要求1所述的一种田鼠巴贝虫IgG抗体的间接免疫荧光检测方法，其特征在于：步骤(6)中所述的荧光标记二抗为羊抗兔与羊抗人二抗混合液。5.根据权利要求1所述的田鼠...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡玉春，陈家旭，宋鹏，陈木新，孙家辉，周魇，林琳，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所国家热带病研究中心，
类型：发明
国别省市：