一种促进皮下网状纤维再生的多肽制造技术

本发明专利技术属于生物制品技术领域，公开了一种促进皮下网状纤维再生的多肽。该多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术的优点在于，该促进皮下网状纤维再生的多肽能够促进成纤维细胞的增殖，并抑制其中胶原蛋白水解酶的分泌，宏观上提升皮肤的弹性，缓解如细纹等皮肤衰老问题。该促进皮下网状纤维再生的多肽通过重组工程菌等现代生物技术生产，在保证高纯度的同时扩大规模实现量产。的同时扩大规模实现量产。的同时扩大规模实现量产。

【技术实现步骤摘要】
一种促进皮下网状纤维再生的多肽


[0001]本专利技术属于生物制品
，简而言之，具体涉及一种促进皮下网状纤维再生的多肽。

技术介绍

[0002]皮肤衰老是皮肤组织内一系列复杂的生物学过程，是所有内源性生理因素和外源性环境因素共同作用的结果，其不仅仅可影响正常皮肤组织结构和生理功能，而且也可直接影响皮肤外层的外观和容貌，引起皱纹、色斑、皮肤变暗等问题。因此，抗皮肤老化等是医学美容、化妆品科学、护肤保健等领域高度重视的方向。
[0003]皮肤从外到内依次包括表皮、真皮和皮下组织。研究表明，皮肤的衰老主要是真皮层成纤维细胞的生理功能发生改变，如分泌角质细胞生长因子、基质金属蛋白酶增多，血管内皮生长因子减少，致使真皮层结构出现明显变化，最终宏观上表现为皱纹、色斑和皮肤变暗等。然而，由于皮肤角质层的阻挡作用，日常肌肤护理所用产品中的功能性成份基本停留在皮肤表面，无法到达真皮层发挥其作用。因此，需要研发一种能缓解真皮层老化的护肤品。

技术实现思路

[0004]为了解决现有技术存在的上述问题，本专利技术目的在于提供一种促进皮下网状纤维再生的多肽。
[0005]本专利技术所采用的技术方案为：
[0006]一方面，本专利技术提供了一种促进皮下网状纤维再生的多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0007]进一步的，所述多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
[0008]进一步的，所述多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
[0009]第二方面，本专利技术提供了一种重组质粒，由前述多肽的核苷酸序列插入pET系列载体得到。
[0010]进一步的，所述重组质粒，所述pET
‑
系列载体包括pET
‑
28a、pET
‑
30a(+)和pET
‑
32a。
[0011]第三方面，本专利技术提供了一种重组工程菌，由前述的质粒转入大肠杆菌表达系统得到。
[0012]进一步的，所述大肠杆菌表达系统包括BL21。
[0013]第四方面，本专利技术提供了一种前述的多肽的制备方法，包括如下步骤：得到前述核苷酸序列，将所述核苷酸序列用双酶切后与同样双酶切后的pET
‑
系列载体连接，得到重组质粒，将所述重组质粒转入大肠杆菌表达系统，诱导培养后收集含有所述多肽的上清液，纯化并冷冻干燥后得到所述多肽。
[0014]第五方面，本专利技术提供了一种护肤品，包括前述多肽和组成护肤品的必要基质。
[0015]本专利技术的有益效果为：
[0016]本实施例提供的促进皮下网状纤维再生的多肽，通过生物工程技术制备出的小分子多肽，可以促进成纤维细胞的增殖，并抑制其中基质金属蛋白酶1和弹性蛋白酶的表达。皮肤的衰老即源于成纤维细胞的生理功能异常，分泌的弹性蛋白、胶原蛋白等减少，从宏观上看即皱纹、细纹增多、暗沉增加。基质金属蛋白酶1和弹性蛋白酶的表达受到抑制后，则会减少对于皮肤中弹性蛋白和胶原蛋白的特异性水解，延缓皮肤的衰老。本申请提供的多肽能够显著增加成纤维细胞的增殖，进而促进皮肤深层真皮层衰老的网状纤维细胞更新换代，使得皮肤更加细腻，从深层次解决肌肤问题。此外，本申请提供的促进皮下网状纤维再生的多肽使用生物工程菌技术，可实现高纯度量产。
附图说明
[0017]图1是本专利技术实施例1中促进皮下网状纤维再生的多肽对成纤维细胞的影响；
[0018]图2是本专利技术实施例1中促进皮下网状纤维再生的多肽对成纤维细胞中基质金属蛋白酶1表达的影响；
[0019]图3是本专利技术实施例1中促进皮下网状纤维再生的多肽对成纤维细胞中弹性蛋白酶表达的影响。
具体实施方式
[0020]下面将结合具体实施方式和实施例，具体阐述本专利技术，本专利技术的优点和各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式和实施例是用于说明本专利技术，而非限制本专利技术。
[0021]在整个说明书中，除非另有特别说明，本文使用的术语应理解为如本领域中通常所使用的含义。因此，除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本专利技术所属领域技术人员的一般理解相同的含义。若存在矛盾，本说明书优先。
[0022]除非另有特别说明，本专利技术中用到的各种原材料、试剂、仪器和设备等，均可通过市场购买得到或者可通过现有方法制备得到。
[0023]一方面，本专利技术提供了一种促进皮下网状纤维再生的多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。为适应大肠杆菌代谢系统，本专利技术提供的多肽在金枪鱼蛋白酶水解后筛选出的抗氧化性多肽重复五次，防止过短的多肽在大肠杆菌表达系统中出现错位表达。
[0024]在一些具体实施例中，所述多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
[0025]在一些具体实施例中，所述多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
[0026]第二方面，本专利技术提供了一种重组质粒，由前述多肽的核苷酸序列插入pET系列载体得到。
[0027]在一些具体实施例中，所述重组质粒，所述pET
‑
系列载体包括pET
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28a、pET
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30a(+)和pET
‑
32a。
[0028]第三方面，本专利技术提供了一种重组工程菌，由前述的质粒转入大肠杆菌表达系统得到。
[0029]在一些具体实施例中，所述大肠杆菌表达系统包括BL21。
[0030]第四方面，本专利技术提供了一种前述的多肽的制备方法，包括如下步骤：得到前述核苷酸序列，将所述核苷酸序列用双酶切后与同样双酶切后的pET
‑
系列载体连接，得到重组质粒，将所述重组质粒转入大肠杆菌表达系统，诱导培养后收集含有所述多肽的上清液，纯化并冷冻干燥后得到所述多肽。
[0031]第五方面，本专利技术提供了一种护肤品，包括前述多肽和组成护肤品的必要基质。包括但不限于透明质酸、卡波姆、甘油等。
[0032]下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照国家标准测定。若没有相应的国家标准，则按照通用的国际标准、常规条件、或按照制造厂商所建议的条件进行。
[0033]实施例1
[0034]本实施例的目的在于提供一种促进皮下网状纤维再生的多肽。
[0035]1.制备促进皮下网状纤维再生的多肽的核苷酸序列
[0036]以金枪鱼蛋白酶水解后筛选出的抗氧化性多肽(如SEQ ID NO.1所示)，在SEQ ID NO.1的下游添加上SPACE，并将其和SPACE序列重复五次，如SEQ ID NO.2所示，避免过小的肽段无法在大肠杆菌重组系统的正确表达，过长的肽段不利于其穿透皮肤屏障，并结合大肠杆菌密码子偏好性，将该段氨基酸序列翻译为对应的核苷酸序列，得到SEQ ID NO.3。为后续构建重组工程菌等，再在SE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进皮下网状纤维再生的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。2.根据权利要求1所述的一种促进皮下网状纤维再生的多肽，其特征在于，所述多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。3.根据权利要求2所述的一种促进皮下网状纤维再生的多肽，其特征在于，所述多肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。4.一种重组质粒，其特征在于，由权利要求2的多肽的核苷酸序列插入pET系列载体得到。5.根据权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，所述pET系列载体包括pET
‑
28a、pET
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30a(+)和pET
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32a。6.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：何备战，刘木水，
申请(专利权)人：广州和佳润颜医药有限公司，
类型：发明
国别省市：