胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法及分析系统技术方案

实现一种能够总合分析胆汁酸类、固醇类及激素类的技术。胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法系包含以下步骤：通过反相液相色谱法将从样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类中选择的多种分子分离的步骤；使分离后的所述分子离子化的步骤；及MS分析并检测离子化后的所述分子的步骤。的步骤。的步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法及分析系统


[0001]本专利技术涉及一种胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法及分析系统。

技术介绍

[0002]通过质量分析装置(MS)将采取自生物体的血液或组织等中所包含的特定成分作为健康和疾病的指标(生物标记)来检测，以预测或者诊断健康状况或疾病的技术已为人所周知。在这样的生物体成分中，许多以胆固醇为前体的胆汁酸类、固醇类及激素类具有生理活性，而其与各种疾病的关联性亦已为人所知。因此，针对胆汁酸类、固醇类及激素类的总合分析的实现，对于高效率地探索和发现高精确度的生物标记来说极为重要。
[0003]以胆固醇为前体的成分的分析方法有例如在非专利文献1中所记载的，针对来自人血(血清)的胆固醇类似物类、氧化胆固醇类、维生素D类进行MS分析的方法。此外，非专利文献2中记载了针对氧化胆固醇类，非专利文献3中记载了针对类固醇类，专利文献1中记载了针对类固醇类似物及维生素D3类似物来各自使用衍生物化法进行MS分析的方法。
[0004][现有技术文件][0005][专利文献][0006][专利文献1]日本专利申请公开第2007
‑
132741号
[0007][非专利文献][0008][非专利文献1]Jeffrey G.McDonald,Daniel D.Smith,Ashlee R.Stiles,David W.Russell,A comprehensive method for extraction and quantitative analysis of sterols and secosteroids from human plasma,Journal of Lipid Research 53(7):1399
‑
409.2012
[0009][非专利文献2]Akira Honda,Kouwa Yamashita,Takashi Hara,Tadashi Ikegami,Teruo Miyazaki,Mutsumi Shirai,Guorong Xu,Mitsuteru Numazawa,Yasushi Matsuzaki,Highly sensitive quantification of key regulatory oxysterols in biological samples by LC
‑
ESI
‑
MS/MS,Journal of Lipid Research 50(2):350
‑
7.2009
[0010][非专利文献3]Teng
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Fei Yuan,Juan Le,Shao
‑
Ting Wang,Yan Li,An LC/MS/MS method for analyzing the steroid metabolome with high accuracy and from small serum samples,Journal of Lipid Research 61(4):580
‑
586.2020

技术实现思路

[0011][专利技术所欲解决之问题][0012]如上所述，胆汁酸类、固醇类及激素类系作为生物标记候补的重要成分，故能够通过MS从生物样本中综合检测这些分子是非常有益处的。另一方面，这些分子在种类之间的分子极性不同，而在同一种类中又存在许多结构相似的结构异构体。因此，以往是预先缩小作为分析对象的种类的范围，再根据所含有的分子进行个别检测，而尚未确立总合的分析方法。
[0013]非专利文献1中记载的技术，系为组合衍生物化等前处理法、复数的分离法(气相色谱法、液相色谱法)及MS分析用的离子化法(大气压离子化法、电喷雾离子化法)等来进行分析的技术，并未达到包含胆汁酸类或激素类的检测。此外，非专利文献2系为针对氧化胆固醇类使用衍生物化法进行MS分析的技术，非专利文献3系为针对类固醇类使用衍生物化法进行MS分析的技术，专利文献1系为针对类固醇激素类使用衍生物化法进行MS分析的技术，而尚未实现包含胆汁酸类、维生素D类、类固醇类、甲状腺激素类的总合分析。由此可见，针对胆汁酸类、固醇类及激素类的总合分析技术尚未被确立。
[0014]本专利技术之一态样旨在实现一种针对生物样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类进行总合分析技术。
[0015][解决问题的技术手段][0016]为了解决上述问题，本专利技术之一态样的胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法，包含以下步骤：通过反相液相色谱法将从样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类中选择的多种分子分离的步骤；使分离后的所述分子离子化的步骤；及MS分析并检测离子化后的所述分子的步骤。
[0017]本专利技术之一态样的胆汁酸类、固醇类及激素类的分析系统，系具备：通过反相液相色谱法，将从样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类中选择的多种分子分离的装置；及使分离后的所述分子离子化，MS分析并检测离子化后的所述分子的质量分析装置。
[0018][专利技术效果][0019]通过使用本专利技术之一态样的分析方法，能够总合分析生物样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类。
附图说明
[0020]图1是表示本专利技术之一态样的分析系统的主要结构的框图。
[0021]图2是显示实施例中从人血清中提取的胆汁酸类、固醇类及激素类的MS分析结果的图。
[0022]图3是显示实施例中从人血清中提取的胆汁酸类、固醇类及激素类的MS分析结果的图。
[0023]图4是显示实施例中从人毛发中提取的胆汁酸类、固醇类及激素类的MS分析结果的图。
[0024]<附图标记说明>
[0025]10液相色谱仪(分析装置)
[0026]20 质量分析装置
[0027]21 离子化部
[0028]22 检测部
[0029]30 运算部
[0030]100 分析系统
具体实施方式
[0031][胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法][0032]本专利技术之一态样的分析方法，无需在前处理步骤中对样本中的分子进行衍生物化，而系包含通过反相液相色谱法将从样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类中选择的分子分离的步骤；使分离后的所述分子离子化的步骤；及MS分析并检测离子化后的所述分子，以检测胆汁酸类、固醇类及激素类之复数成分的步骤。
[0033]<样本>
[0034]作为本分析方法之对象的样本没有特别限定，可以是可能含有胆汁酸类、固醇类及激素类的样本。此外，这些样本可以是从人类、动物或植物中采取的样本，或者是从生物体制备成的生物样本。再来，生物样本可以选自由皮肤、指甲、脏器、组织、细胞、血液、尿液、脊髓液、粪便及盲肠内容物所组成的群组。
[0035]此外，生物样本可以是毛。毛亦称为毛发，包括头发及体毛。此外，毛在包含皮肤外侧的毛干部分及皮肤内侧的毛根部分的同时，还包含存在于毛囊(或称本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法，其特征在于，包含以下步骤：通过反相液相色谱法，将从样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类中选择的多种分子分离的步骤；使分离后的所述分子离子化的步骤；及MS分析并检测离子化后的所述分子的步骤。2.根据权利要求1所述的胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法，其特征在于，在所述分离步骤中，系通过在酸性条件下的反相液相色谱法来分离样本中的胆汁酸类、固醇类及激素类分子。3.根据权利要求1或2所述的胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法，其特征在于，在所述离子化步骤中，系通过ESI法使所述分子离子化。4.根据权利要求1至3中任一项所述的胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法，其特征在于，所述分离步骤中的样本系为采取自生物体的生物样本的提取物。5.根据权利要求1至3中任一项所述的胆汁酸类、固醇类及激素类的分析方法，其特征在于，进一步包含：在所述分离步骤之前，从采...

【专利技术属性】
技术研发人员：池田和贵，石川将己，五十岚亨平，太田敦子，
申请(专利权)人：公益财团法人上总DNA研究所，
类型：发明
国别省市：