基于中温Argonaute蛋白和等温扩增的核酸检测方法技术

本发明专利技术提供了基于中温Argonaute蛋白和等温扩增的核酸检测方法。具体地，本发明专利技术提供了一种用于检测靶标核酸分子的检测体系，该体系包含：(a)向导ssDNA对或向导ssRNA对；(b)中温Argonaute蛋白(Ago酶)，所述中温Argonaute蛋白(Ago酶)为以DNA或RNA为向导指导剪切靶标DNA或靶标RNA的中温Argonaute蛋白(Ago酶)；(c)荧光报告核酸，所述荧光报告核酸带有荧光基团和淬灭基团；(d)用于等温扩增反应的试剂；其中，所述的靶标核酸分子为目标核酸。本发明专利技术方法可以广泛应用于感染性疾病如重大传染性和病原体感染性疾病(病毒、病原菌)检测领域等领域。领域。

【技术实现步骤摘要】
基于中温Argonaute蛋白和等温扩增的核酸检测方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种基于中温Argonaute蛋白和等温扩增的核酸检测方法。

技术介绍

[0002]核酸检测是病原体检测、基因分型、病程监测的重要手段。被广泛应用于分子医学诊断、食品安全检测以及环境监测等诸多领域。
[0003]目前检测病毒核酸最为有效的方法是qPCR，该方法也是目前检测病毒核酸的金标准。但其需要专业而昂贵的仪器，对引物和探针的设计要求严格等缺点，使其不能成为便携式、家庭式的检测方法。
[0004]近年来，等温扩增技术在核酸检测领域得到了长足的发展。等温扩增技术不仅具有快速、高效、特异的优点，而且无需专用的设备。常见的恒温核酸扩增技术如环介导等温扩增技术(LAMP)、恒温指数扩增反应(EXPAR)等现已与下游检测技术相结合，发展新型核酸检测技术。然而，大多数现有技术在性能指标(如敏感性和特异性)方面都有折中。
[0005]可编程性核酸结合蛋白因其可靶向定位于不同的基因序列，并能对目的序列进行特异性的结合和切割的特点，使本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测靶标核酸分子的检测体系，其特征在于，该体系包含：(a)向导ssDNA对或向导ssRNA对；(b)中温Argonaute蛋白(Ago酶)，所述中温Argonaute蛋白(Ago酶)为以DNA或RNA为向导指导剪切靶标DNA或靶标RNA的中温Argonaute蛋白(Ago酶)；(c)荧光报告核酸，所述荧光报告核酸带有荧光基团和淬灭基团；(d)用于等温扩增反应的试剂；其中，所述的靶标核酸分子为目标核酸。2.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述等温扩增反应包括(反转录)扩增消化反应或(反转录)转录反应。3.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述等温扩增包括RT
‑
RAA、NASBA、RT
‑
RPA。4.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述目标核酸包括单链RNA、双链RNA、单链DNA、双链DNA。5.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述检测体系中，目标核酸经过等温扩增(消化)，所获得的靶标DNA或RNA被所述中温Argonaute蛋白(Ago酶)识别剪切。6.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述中温Argonaute蛋白(Ago酶)具有以DNA为向导指导剪切靶标DNA的能力。7.如权利要求1所述的检测体系，其特征在于，所述中温Argonaute蛋白(Ag...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘倩，李晓，冯雁，孙奕杰，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：